鸭子的育种方法技术

本发明专利技术公开了一种鸭子的育种方法，利用20个STR荧光标记在亲代和子代鸭个体间进行亲子鉴定，从而建立起系谱记录，保证育种工作的连续性。采用亲子鉴定技术建立选育群体的系谱记录，不但可以降低育种中的工作量，而且准确性可以大大提高，从而提高选种的准确性，加快水禽的育种进展，同时提高了种鸭产蛋率、受精率和孵化率，具有较好的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及了通过STR标记的PCR扩增和检测以及亲缘关系鉴定的方法进行鸭育种。
技术介绍
鸭作为世界上饲养量最大的水禽，具有生活力强、耐粗饲等生物学特性，能够为人类提供肉、蛋、羽绒等产品，在世界禽类生产中占有重要地位。我国是世界上最大的肉鸭生产国和消费国，在养禽业中的比重越来越大，尤其是南方养鸭业发展迅猛，但是也存在着行业整体水平较低、品种单一的问题。我国有许多具有优良遗传特性的地方鸭品种，但是缺乏有效的开发利用，鸭的育种工作进展缓慢，科技含量较低，有必要借助分子生物学的手段辅助提升鸭育种的技术水平和加快育种进展。建立完整准确的系谱记录是鸭育种工作的基础，对于提升我国鸭育种水平，提高育种效率有着重要作用和意义。利用STR技术建立鸭群的系谱记录可以在不改变目前鸭地面散养、自由交配的饲养模式前提下准确的建立起两代鸭群间的系谱记录，而且准确快速， 有利于加快鸭的选育进展。该技术建立推广后将会对其他水禽的育种工作产生非常大的促进作用。随着畜牧业科技的进步，现代畜牧养殖业和育种业都已广泛采用人工授精技术， 极大地提高了经济效益并且加快了育种进程。在禽类的人工授精技术研究中鸡的人工授精技术研究开展的比较早，技术成熟，而且笼养鸡非常适合推广人工授精技术，该技术在鸡的育种和生产中有普遍应用。人工授精技术有效地解决了笼养鸡的配种问题，大大提高了公母比例，减少了公鸡的饲养量，节省了费用；在水禽育种中，由于育种技术相对比较落后，人工授精技术还不成熟，同时也受限于水禽的饲养特点，导致水禽笼养技术难度较大，目前大多采用地面散养；种水禽禽舍通常还有洗浴池，以利于提高受精率，这种饲养方式也制约了人工授精技术在鸭育种中的应用。目前我国绝大部分水禽育种场在水禽育种中多采用小群体内随机交配繁殖后代，造成系谱记录工作非常繁琐，需要充足的人员和场地提供支持，而且很容易出错，严重影响选育效果。目前常用的配种方法是将1只公鸭和5只母鸭放在一个小圈舍中，公母鸭均戴上肩号或者翅号，让其自由交配，每天晚上母鸭产蛋前由饲养员逐一检查，将要产蛋的母鸭分别放到封闭的笼子里，第二天下蛋后再由饲养员逐一记录每只种蛋的亲本编号，在孵化后完成两代间的系谱记录。这种方法一方面要占用大量的场地设施，每天还要占用大量的劳动力，而且很容易出现记录错误等问题；另一方面这种选配方法中公鸭的性能对受精率的影响很大，而且由于公母鸭组合相对固定，会使一些优秀个体遗传基因不能结合，影响选育的进展。采用大群体随机交配可以使所有公母鸭都有交配的机会，大大提升了群体的遗传多样性，有利于优良性状的表现，而且性能优秀的公母鸭会繁殖较多的后代，可以加快选育的速度。但是大群体随机交配时使用人工记录系谱是无法实现的，而利用STR标记进行亲子鉴定就可以重建亲本和子代间的系谱记录，保证育种工作的连续性。采用亲子鉴定技术建立选育群体的系谱记录，不但可以降低育种中的工作量，而且准确性可以大大提高，从而提高选种的准确性，加快水禽的育种进展。亲子鉴定(parentage identification)又称亲权鉴定、个体识别等，它是利用生物学、分子遗传学及医学的理论和技术，从子代和亲代的形态构造或生理机能、遗传的物质基础等方面的相似特点，分析遗传特征，判断亲代与子代是否有亲缘关系的方法(钱林东等，2010)。亲子鉴定技术在日常法医检验以及畜牧业生产中有重要的应用价值，亲子鉴定方法有多种，早期的有血型测试法、白细胞抗原鉴定法和染色体多态性鉴定法等；随着分子遗传学研究的深入，多种基因组水平的分子遗传标记检测技术已应用到亲子鉴定中来，这些DNA分子标记技术是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接反映。DNA分子标记具有诸多优点，其中最适合用于亲子鉴定的DNA 分子标记有线粒体DNA标记、DNA指纹标记、小卫星变异重复序列标记、微卫星标记STR等 (Hill 等，~~Ot al. 2008)。微卫星标记(microsatellite marker)又称简单重复序列(simple sequence repeats, SSR)、短串联重复(short tandem repeat, STR)等，已被广泛应用于连锁图谱的构建、个体识别、亲子鉴定、基因定位、遗传多样性分析、疾病诊断等领域。利用微卫星标记进行亲子鉴定在人类法医学上已有广泛应用，在动植物中也有大量报道。利用DNA微卫星标记和SNP位点对未知系谱的动物群体进行亲缘关系鉴定在国际上已有成功应用。1996年国际动物遗传学会(ISAG，International Society of Animal Genetics,http://www. isag. org)年会上提出了牛、猪、马、狗等几种家畜亲子鉴定中使用的微卫星标记建议。张亚平等 1995年分离了 10个大熊猫微卫星标记可用于大熊猫的亲子鉴定，张于光等在2003年将微卫星标记应用于东北虎的亲子鉴定，都取得了很好的效果，具有很高的准确度；叶俊华等 (2005)采用多重PCR和基因组扫描技术检测了公安部直属四家警犬基地进口种犬和准繁犬7个品种共269头样本10个微卫星DNA多态性，结果发现该10个微卫星位点的非父排除率为99. 7287%、个体识别率为99. 999%，建立了警犬STR-DNA亲子鉴定方法；Ellegren等 (199 用5个马科的微卫星标记判定马的亲权关系可使排除率达98 %以上，10个标记排除率达99. 99%;Glowatzki-Mullis等(1995)利用不同染色体上的6个多态STR标记检测了 238头牛的等位基因频率，成功解决了用传统的血型鉴定方法无法确定的35头牛的亲权确认问题；Ozkan等Q009)利用12个微卫星标记对荷斯坦奶牛群体进行了亲子鉴定分析，其中包括了由ISAG推荐的9个位点，结果表明这12个标记的排除概率至少为99. 9%，大部分 (95. 3% )的亲权关系得到了确认fteVanOVicK2009，2010)等利用11个微卫星标记分别在不同的西门塔尔牛群体中进行亲子鉴定，结果表明其排除概率可以达到99.9%。目前STR标记在禽类中进行亲子鉴定的研究极少，多用于遗传多样性分析以及遗传基因的流动等(Qui，Otal. 2006 ；Berthouly^,Ot al, 2008,2009)；在水禽中利用 STR标记进行亲子鉴定的研究极少，Reichart等Q010)利用蛋白质指纹技术和10个微卫星标记鉴定了棕硬尾鸭间的亲缘关系。以上研究结果表明鸭的微卫星DNA标记研究已经取得了重要进展并有了很好的应用，如何进一步在鸭的育种工作中发挥更大的作用是一个非常值得研究的领域
技术实现思路
为了解决鸭育种中存在的大群随机交配群体无法建立系谱关系的问题，加快育种进展，本专利技术研制了一种利用20个STR标记对未知亲缘关系的鸭亲本与子代间进行亲子鉴定的技术方法，并提供了该技术的操作方法。本专利技术涉及一种，将亲本的公母鸭大群体圈养并进行编号，收集种蛋并入孵，对孵化后的子代雏鸭进行编号，其包括如下步骤对亲本和子代鸭提取DNA， 按照表1合成荧光引物；表1多重PCR扩增的引物组合以及微卫星标记信息权利要求1. 一种，将亲本的公母鸭大群体圈本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种鸭子的育种方法，将亲本的公母鸭大群体圈养并进行编号，收集种蛋并入孵，对孵化后的子代雏鸭进行编号，其特征在于包括如下步骤：对亲本和子代鸭提取ＤＮＡ，按照下表合成荧光引物；使用表中的引物对提取的ＤＮＡ进行多重ＰＣＲ扩增，并进行荧光电泳检测，对电泳结果进行分析得到所有个体的基因型数据，对亲本和子代进行亲缘关系分析，计算每个子代其最可能的父母亲个体，根据分析结果分别选取置信度最高的一个公鸭和母鸭为亲本进行育种。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘伟，詹凯，杨宁，徐桂云，李俊营，
申请(专利权)人：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：34