一种高纯度丹酚酸A的制备方法技术

本发明专利技术涉及的一种高纯度丹酚酸A的制备方法，其特征在于：它以紫草为原料，通过水加热提取及酸调转化、树脂吸附洗脱分离和纯化浓缩工序获得高纯度丹酚酸A。通过选用紫草作为制备丹酚酸A的原材料，不仅拓展药用原材料的来源，节省了原来的丹参用材，而且也可大大降低原材料的使用成本；同时这种紫草为原料的丹酚酸A的制备方法，工艺过程简单，制备的丹酚酸A收率及纯度高、成本低，适合大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物药物领域，特别是涉及一种高纯度丹酚酸A的制备方法。
技术介绍
丹参是唇形科鼠尾草属植物，作为我国常用中药材已有悠久的临床应用历史，在心血管疾病的治疗中具有重要的地位，其显著的疗效已得到临床上的广泛认可。丹参的有效化学成分主要有两大类脂溶性丹参酮类化合物和水溶性丹酚酸类化合物。丹酚酸具有广泛的抗脂质过氧化和清除自由基等作用，在已知酚类化合物中丹参酚酸类化合物的抗氧化活性最强，其中又以丹参酚酸A(简称丹酚酸A)抗氧化活性最强。丹酚酸A具有良好的脂溶和透膜能力，与丹参中大部分酚酸类物质相比，其细胞渗透能力更强，生物利用度更高。因此，丹酚酸A具有很高的药用开发价值。但是，在丹参中的丹酚酸A的天然含量极低(约为丹参药材的0. 01 0. 06% )， 从丹参中提取丹酚酸A不仅原药材成本过高，分离纯化难度也大，严重制约着该产品的研究和开发，成为其产业化的瓶颈。近年来为解决丹酚酸A的来源问题，人们尝试从丹参中对丹酚酸A进行转化，发现通过丹酚酸B的降解可以得到一定量的丹酚酸A，而丹酚酸B也是丹参中重要的有效成分。如中国专利200710001055. 4公开了一种丹参丹酚酸A的制备方法，是通过对丹酚酸B 降解处理而获得丹酚酸A。由于丹参中还含有重要的脂溶性有效成分如丹参酮IIA、隐丹参酮等，显然，以牺牲丹参众多的有效成分而仅仅获得丹酚酸A的做法不符合科学合理、充分利用资源的理念。此外，丹参这味药材用途很多，很多中成药如丹参注射液、复方丹参片、复方丹参滴丸等均需用丹参提取，需要消耗大量的丹参药材。此外，在相关学科学者的研究中指出丹参的栽培并不很容易，丹参喜生长在气候温和、阳光充足、空气湿润的地方，生长最适温度为20 ^°C，最适空气相对湿度为80%。其根系发达，怕旱又忌涝。丹参种植时宜选择土层深厚、疏松肥沃、地势较高、排水良好的砂质壤土地块种植。平地要作排水沟；山地、岭地宜选向阳的低山坡，坡度不宜太大，1(Γ30度较好，土壤PH值为6. 5 7. 5之间。而且丹参不宜连作，通过对广4年不同连作年限地块丹参生长发育情况调查发现，连作严重危害丹参生长，主要表现在6 9月份生长期枯苗率大幅度上升，地上、地下部生长量下降，根系数量、直径和长度减小，产量降低，根系外观畸形， 有效成分含量降低，这也在一定程度上影响了丹参的产量。因此，丹参的栽培状况以及其众多的用途注定会使丹参供不应求，近年来丹参的价格飙升已经证明了这一点。要使得丹酚酸A的制备水平达到产业化，必须寻找新的资源来解决丹酚酸A的来源问题。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种能够获取丹酚酸A新来源，以及从中获得高纯度丹酚酸A的制备方法；既解决丹酚酸A的来源问题，同时也提供一种收率高、成本低、制备工艺过程简单，利于产业化生产高纯度丹酚酸A的工艺方法。这种高纯度丹酚酸A的制备方法，其特征在于它以紫草为原料，通过水加热提取及酸调转化、树脂吸附、洗脱分离和纯化浓缩工序获得高纯度丹酚酸A。具体制备方法，包括如下步骤(1)提取、(2)转化，(3)分离，(4)纯化；(1)提取将药材紫草根及根茎的切片在温度为7(T10(TC的水中加热至少提取二次， 合并过滤后获得提取液；(2)转化将提取液适度浓缩，并以浓度为0.r2mol/L的无机酸调节pH值至1_6，在 100°C下回流反应；或将浓缩液置于高压釜中加热反应，获得含有高浓度丹酚酸A的转化液；(3)分离将转化液用填充了非极性、弱极性或中极性大孔吸附树脂的吸附柱进行吸附，待吸附平衡后，用水进行洗脱除去杂质，然后以水/醇溶剂系统洗脱分离，收集3 5个柱体积后即获得含丹酚酸A的洗脱液；(4)纯化将此洗脱液经浓缩后上聚酰胺、葡聚糖凝胶kphadexLH-20、MCI GEL CHP20P、C4、C8或C18键合相硅胶柱制备，以水/醇溶剂系统洗脱，或以液滴逆流色谱纯化， 收集含有高纯度丹酚酸A的流份，经浓缩干燥后得到高纯度丹酚酸A产品。所述步骤(2)中采用的无机酸为盐酸、硫酸、硝酸、磷酸中的任一种酸；回流状态下反应时间为214小时；在高压釜中的加热反应条件为温度10广152°C，压力 0. Γ0. 5Mpa,反应时间为0. 5 12h。所述步骤(3)中采用的非极性、弱极性或中极性大孔吸附树脂，为天津海光化工厂生产的AB-8，D101、DM301吸附树脂中的一种，或山东鲁抗树脂厂生产的330、CAD45、DMl 30、 860021、DM-18、D312型吸附树脂中的一种。所述步骤(3)、(4)中水/醇溶剂系统按水醇=95 :5 5 95配置。所述步骤(4)中的干燥方法包括冷冻干燥、喷雾干燥或真空干燥。根据以上方法提出的该种高纯度丹酚酸A的制备方法，通过选用药材紫草作为制备丹酚酸A的原材料，不仅拓展药用原材料的来源，节省了原来的丹参用材，而且也可大大降低原材料的使用成本；同时这种紫草为原料的丹酚酸A的制备方法，工艺过程简单，制备的丹酚酸A收率及纯度高、成本低，适合大规模生产。附图说明图1为本专利技术所采用的紫草中紫草酸的分子结构式； 图2为本专利技术所述的丹酚酸A的分子结构式；图3为紫草酸分子转化为丹酚酸A分子的转化机理图； 图4为紫草经水溶液提取获得的液相色谱图； 图5为紫草提取液经转化获得的液相色谱图。具体实施例方式本专利技术提出的利用中药材紫草提取高纯度丹酚酸A的方法，解决了目前只能从丹参提取丹酚酸A存在的资源短缺和资源价高的困境，为大规模工业化获得高纯度丹酚酸A 提出了资源发展途径。该技术方案利用紫草中含量丰富属于咖啡酸聚合物的紫草总酚酸(主要是紫草酸)，在一定工艺条件下高效地转化成丹酚酸Α。这种转化是利用无机酸在一定工艺条件下实现的，其转化的机理由以下分子结构式表示在上述表达式中，上部的左式为紫草酸分子结构式，下部左式为丹酚酸A的分子结构式，上部的右式为紫草酸分子结构在无机酸处理过程中产生结构变化的示意图。其变化的过程为紫草酸分子在酸性条件下加热，其中的呋喃环遇酸不稳定，环中的醚键易于水解开环，发生加成反应，使呋喃环上的氧原子加成后分别生成一个脂羟基和一个酚羟基，继而在酸性高温条件下脂羟基与邻位的氢发生消除反应，脱去一分子水，同时原呋喃环上的羧基解离后脱去一分子二氧化碳，生成丹酚酸A分子。在专利技术人多年研究中，发现紫草ilithospermum erythrorhizon)中含有丰富的酚酸成分，其中以紫草酸的含量最高，可达4 7%，而且紫草总酚酸属于咖啡酸聚合物，在一定条件下，可将紫草总酚酸(主要是紫草酸)高效地转化成丹酚酸A。由于紫草对自然条件适应能力较强，一般土壤均能生长，耐寒，怕涝，多生于山地草丛和干燥的石质山坡、山谷及灌木林下，对土壤要求不甚严格，发芽最适温度为13 17°C，发芽率可达80%以上，较易栽培。 从紫草中提取转化丹酚酸A，收率可达m左右，较好地解决了丹酚酸A的来源问题。这种利用中药材紫草获得高纯度丹酚酸A的方法，其具体步骤为(1)提取、(2)转化，(3)分离，(4)纯化四步。(1)提取将药材紫草根及根茎的切片在温度为7(T10(TC的水中加热至少提取二次，合并过滤后获得提取液；(2)转化将提取液适度浓缩，并以浓度为0.r2mol/L的无机酸调节pH值至1_6，在 100°C下回流反应；或将浓缩液置于高压本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种高纯度丹酚酸Ａ的制备方法，其特征在于：它以紫草为原料，通过水加热提取及酸调转化、树脂吸附、洗脱分离处理和纯化浓缩工序获得高纯度丹酚酸Ａ。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度丹酚酸A的制备方法，其特征在于它以紫草为原料，通过水加热提取及酸调转化、树脂吸附、洗脱分离处理和纯化浓缩工序获得高纯度丹酚酸A。2.如权利要求1所述的一种高纯度丹酚酸A的制备方法，具体制备方法，包括如下步骤(1)提取、(2)转化，(3)分离，(4)纯化；(1)提取将药材紫草根及根茎的切片在温度为7(T10(TC的水中加热至少提取二次， 合并过滤后获得提取液；(2)转化将提取液适度浓缩，并以浓度为0.r2mol/L的无机酸调节pH值至1_6，在 100°C下回流反应；或将浓缩液置于高压釜中加热反应，获得含有高浓度丹酚酸A的转化液；(3)分离将转化液用填充了非极性、弱极性或中极性大孔吸附树脂的吸附柱进行吸附，待吸附平衡后，用水进行洗脱除去杂质，然后以水/醇溶剂系统洗脱分离，收集3 5个柱体积后即获得含丹酚酸A的洗脱液；(4)纯化将此洗脱液经浓缩后上聚酰胺、葡聚糖凝胶kphadexLH-20、MCI GEL CHP20P、C4、C8或C18键合相硅胶柱制备，以水/醇溶剂系统洗脱，或以...

【专利技术属性】
技术研发人员：周长新，甘礼社，朱志彬，
申请(专利权)人：上海朗萨医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31