一种应用于猪、鸡养殖的制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种应用于猪、鸡养殖的制剂，具体是由粘膜乳杆菌制成的制剂在促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种应用于猪、鸡养殖的制剂，具体是由粘膜乳杆菌制成的制剂在促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率中的应用。
技术介绍
2006年底在全国爆发的大菱鲆药残事件给我们敲响了警钟。欧盟已于2006年全面禁止抗菌药作为饲料添加剂在动物养殖中的应用。为保证食品安全，美国等发达国家对肉类、海产品等抗菌药残留进行检测。随着中国加入世贸组织，名优产品出口被普遍看好。 但由于国内养殖不科学使用抗生素等有害药物的现象严重，大大限制了产品的出口。抗菌药替代产品是猪和鸡养殖业中迫切需要的。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率的制剂，该制剂由粘膜乳杆菌制成。本专利技术的制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以采取可能含粘膜乳杆菌的样本，然后将样品置于灭菌厌氧瓶内，吹入氮气同时充分混合，迅速从中取一定量的样品加入18mL灭菌的稀释液中，吹入氮气同时充分混勻，在无菌操作台内，进行10—1、10_2、10_3、ΙΟ"4, ΙΟ"5, ΙΟ"6, ΙΟ"7梯度稀释，取 ΙΟ"5, ΙΟ"6, ΙΟ"7三个稀释梯度，分别涂布于粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于厌氧罐内，厌氧37°C下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于液体扩增培养基中，置于厌氧罐内，厌氧37°C下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16S rRNA序列对比分析进行粘膜乳杆菌鉴定和毒性试验，将无毒性的粘膜乳杆菌干燥菌粉按需要比例添加辅料制成片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，或制成兽药和饲料添加剂，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于纯化水IOOOmL,胰蛋白胨10g，酵母浸膏5g，三水醋酸钠晶体5g，檬酸三铵2g，MgSO4. 7H20 0. 2g，琼脂15g，肉浸膏 10g，葡萄糖 20g,吐温-80 lmL，磷酸氢二钾 2g, MnSO4. 2H20 0. 05g。调 ρΗ6· 2-6. 3，121 °C 高压灭菌15min。粘膜乳杆菌液体扩增培养基优选但不局限于纯化水lOOOmL，胰蛋白胨10g，酵母浸膏5g，三水醋酸钠晶体5g，檬酸三铵2g，MgSO4. 7H20 0. 2g，肉浸膏10g，葡萄糖20g,吐温-80 lmL，磷酸氢二钾 2g，MnSO4. 2H20 0. 05g。调 pH6. 2-6. 3，121°C 高压灭菌 15min。为进一步具体说明本专利技术，专利技术人利用上述方法通过粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的粘膜乳杆菌，本专利技术所述粘膜乳杆菌并不局限于为说明本专利技术所述的菌株，只要无毒性的粘膜乳杆菌均是本专利技术所述，均在本专利技术的保护范围内。本专利技术所述粘膜乳杆菌优选但不限于粘膜乳杆菌DH103保藏编号CGMCC3766、粘膜乳杆菌DH105保藏编号CGMCC3765或粘膜乳杆菌DH106保藏编号CGMCC3763。本专利技术实施说明中优选使用的粘膜乳杆菌的细菌学性质1、为说明本专利技术，本专利技术利用上述方法分离的粘膜乳杆菌分别为粘膜乳杆菌 DH103保藏编号CGMCC3766、粘膜乳杆菌DH105保藏编号CGMCC3765或粘膜乳杆菌DH106保藏编号 CGMCC3763。2、菌落形态显微镜观察杆菌，革兰氏染色阳性。平板形态菌落呈乳白色、表面光滑、圆润、凸出于培养基表面、大小l_2mm。3、生理生化鉴定明胶液化_ ；过氧化氢酶_ ；硫化氢_ ；硝酸盐还原_ ；是否需氧厌氧性。4、糖酵解实验鉴定葡萄糖+ ；核糖+ ；麦芽糖+ ；蔴糖+ ；葡糖酸+ ；D-木糖+ ；蜜二糖+ ；D-棉子糖+ ；D-果糖_ ；丙三醇_ ；赤藓糖醇_ ；L-木糖-；侧金盏花醇_ ；肌醇_ ；山梨醇_ ； 纤维二糖_ ；海藻糖_ ；松三糖_ ；甘露醇_ ；菊粉_。5、分离菌株进行16S rRNA基因测序，测得序列用BLAST与GenBank和RDP数据库中的基因序列进行相似性分析，确定分离菌株均为粘膜乳杆菌。本专利技术所述的粘膜乳杆菌指活生物个体。本专利技术是以有效剂量的上述粘膜乳杆菌作为主要药物活性成份，按照一定的制剂工艺，加入常规的赋形剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、黏合剂、溶剂、增稠剂、 增溶剂等辅料，制成任何一种适合于使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂、 粉剂等剂型。本专利技术所述以有效剂量的上述粘膜乳杆菌作为主要药物活性成份制成活菌制剂， 也可以是上述粘膜乳杆菌与双歧杆菌、链球菌、枯草芽孢杆菌等益生菌中的一种或几种或其他活性成份组合制成活菌制剂，以起到协同作用，提高效果。本专利技术所指有效剂量是指以上述粘膜乳杆菌根据上面所述单独或组合作为主要药物活性成份制成的固体活菌制剂包含的总活菌数不能低于lX106CFU/g，一般在 1 X 109CFU/g 以上，最高可达至Ij 1 X 10"CFU/g 或 1 X 10"CFU/g 以上。本专利技术所指有效剂量是指以上述粘膜乳杆菌根据上面所述单独或组合作为主要药物活性成份制成的液体活菌制剂包含的总活菌数不能低于lX106CFU/mL，一般在 1 X 109CFU/mL 以上，最高可达到 1 X 10nCFU/mL 或 1 X 10nCFU/mL 以上。由于本专利技术首次公开了粘膜乳杆菌作为主要活性成份制成制剂在猪、鸡养殖中的应用，因此含上述粘膜乳杆菌的制剂在猪、鸡养殖中的应用均属于本专利技术的保护范围。本专利技术所述的粘膜乳杆菌在制成任何一种剂型时，均具有促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率的作用。任何剂型，如果其组份中含有上述粘膜乳杆菌成份制备成制剂，在其包装或说明书等标识上或者在其他任何宣传品上只要注明或提示具有促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率的作用，则落入本专利技术的保护范围之内。本专利技术所述的粘膜乳杆菌可以制成兽药或饲料添加剂。将上述粘膜乳杆菌制成的兽药或饲料添加剂应用于促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率等猪、鸡养殖中，则落入本专利技术的保护范围之内。 具体实施例方式制备例说明上述已经对粘膜乳杆菌制剂的制备进行说明，这里通过粘膜乳杆菌 DH103保藏编号CGMCC3766、粘膜乳杆菌DH105保藏编号CGMCC3765或粘膜乳杆菌DH106保藏编号CGMCC3763粉剂为例进行具体说明，其他粘膜乳杆菌菌种制剂的制备方法本领域技术人员通过本实施例很容易掌握，其他剂型的制备方法本领域技术人员通过本实施很容易掌握，在此不再一一叙述说明。制备方法并不局限于本专利技术实施例所述，公知的能够达到制备目的的方法均可以，实施例的制备说明只是对本专利技术的说明，并不是对本专利技术保护范围的限制。制备实施例1粘膜乳杆菌粉剂的制备1菌粉的制备和菌种的鉴定采取小猪、鸡或牛等动物的粪便，然后将粪便置于灭菌厌氧瓶内，吹入氮气同时充分混合，迅速从中取2克粪便加入ISmL灭菌的稀释液中，吹入氮气同时充分混勻，在无菌操作台内，进行IO-1UO-2UO-3UO-4, ΙΟ"5, ΙΟ"6,10_7梯度稀释，取ΙΟ"本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种应用于猪、鸡养殖的制剂，其特征在于该制剂由粘膜乳杆菌制成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：崔云龙，李洪福，
申请(专利权)人：青岛东海药业有限公司，
类型：发明
国别省市：95