一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法技术

技术编号:6849692 阅读:602 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供的一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法,在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本,接种于增菌培养液中,在37℃下恒温培养12-16小时;无菌条件下取需量的培养液,再次接种于同种增菌液中,振荡培养4-6小时;取1-2ml菌液离心,转速为5000转/min,5-6分钟得到菌体沉淀;用双蒸水洗涤菌体2-3遍后,加入100ul无菌双蒸水悬浮,在100℃下煮沸约10-12分钟,离心,转速为12000转/min,3-4分钟得上清液,即为菌粗制DNA,再进行后续的PCR分型检测即可。实验检测中作为阳性对照的标准(或参考)菌株均购自中国菌种保藏中心。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
1.一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法,其特征在于:在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本,接种于增菌培养液中,在37℃下恒温培养12-16小时;无菌条件下取需量的培养液,再次接种于同种增菌液中,振荡培养4-6小时;取1-2ml菌液离心,转速为5000转/min,5-6分钟得到菌体沉淀;用双蒸水洗涤菌体2-3遍后,加入100ul无菌双蒸水悬浮,在100℃下煮沸约10-12分钟,离心,转速为12000转/min,3-4分钟得上清液,即为菌粗制DNA,再进行后续的PCR分型检测即可。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:段新华王志才王登峰李建军杨学云
申请(专利权)人:新疆维吾尔自治区畜牧科学院
类型:发明
国别省市:65

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