【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及污水处理生化反应器中活性污泥DNA的提取方法,具体是一种厌氧反应器中活性污泥DNA的提取方法。
技术介绍
厌氧生物处理反应器是目前污水处理领域研究的热门,研究厌氧生物处理反应器的微生物对于揭示厌氧处理的反应机理具有重要意思,传统的微生物分离纯培养技术很难全面客观的研究其中的厌氧微生物,目前实验室中可培养的微生物还不到自然界中微生物总数的1%,厌氧微生物更少,而且还有很多因无法培养而未被人们所认识的微生物。分子生物学技术的引入对于这个难题有了根本的解决办法,使人们摆脱了对培养技术的依赖, 从分子角度研究微生物的特性,大大促进了厌氧技术的发展。从环境样品中提取高质量的总DNA,是做好PCR、DGGE等的前提条件,DNA提取的质量对于菌群多样性的分析起着至关重要的作用。从环境样品中提取的DNA要求必须能够代表该样品中遗传多样性的实际情况,PCR、DGGE等对DNA都有很高的要求,因此有针对性的选择合适的DNA提取方法并提取出高质量的DNA是十分重要的。由于厌氧反应器污泥中的厌氧微生物较为复杂,并且难以破壁,普通的DNA提取方法往往得率较少,而且由于厌氧反 ...
【技术保护点】
;(12)沉淀用70%的乙醇洗涤3次,室温干燥后加入灭菌蒸馏水溶解沉淀,所得即为DNA。氯仿/异戊醇,苯酚/氯仿/异戊醇体积比为25∶24∶1,混匀,在室温下,12000转/分钟离心5分钟,吸取上清液至另一的离心管中;(11)加入0.6倍上清液体积的异丙醇混匀,室温放置2小时,在室温下,12000转/分钟离心10分钟,弃上清液μL浓度为20mg/mL的RNA水解酶,混合后置于37℃水浴中放置1小时;(9)加入与混合液等体积Tris-饱和酚,混匀,在室温下,12000转/分钟离心5分钟,将上清液转入另一离心管中;(10)加入与上清液等体积混合液,混合液组成为苯酚/热30分钟, ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:林英姿,李庆亮,王蕾,辛明,
申请(专利权)人:吉林建筑工程学院,林英姿,李庆亮,
类型:发明
国别省市:82
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