脱细胞小肠粘膜下层生物材料的制备方法技术

一种脱细胞小肠粘膜下层生物材料的制备方法，本发明专利技术的步骤包括，前置处理、脱细胞处理、酶处理、膜状产品和微粒产品的制备；与现有产品相比，本发明专利技术具有较高的生物活性和生物相容性，无明显免疫排斥反应，对细胞无毒性；具有一定的机械强度和韧性，其形状大小及厚度易于改变，便于临床缝合固定；同时制备方法具有原料来源不受限制，无细胞成分残留，能有效灭活病毒，不产生伦理道德问题的优点。所制备的产品适用于修复机体组织缺损、作为组织充填材料、用于颜面部凹陷畸形的修复、充当组织加强物替代筋膜、修复膜性缺损和营养不良及感染创面、做为生物支架材料、作为可注射用的充填材料等生物医学工程领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于组织工程的生物材料
，具体涉及一种脱细胞小肠粘 膜下层生物材料的制备方法。
技术介绍
细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)是各种组织器官的主要组织成 分，构成了各种组织器官的三维结构和营养物质的储存，是细胞赖以生存、 活动和变化的场所，在多种组织器官的修复中发挥着重要的作用。小肠粘膜 下层(Small intestinal submucosa， SIS)来源于小肠，是一种天然的细胞外 基质生物材料，主要由I、 III型纤维胶原蛋白构成，含有少量的IV、 V型胶 原蛋白，还包含有氨基葡聚糖和糖蛋白等，所含的氨基葡聚糖主要包括透明 质酸、肝素、硫酸乙酸肝素、硫酸软骨素A和硫酸皮肤素。由于SIS为天然结 締组织复杂的成分结构，作为异体移植物植入体内，不会引起明显的免疫排 斥反应，是一种理想的生物支架材料。把SIS用作支架材料已有较为广泛的研究，其在体内能引导和支持宿主细胞生长，逐渐完全降解，适合作为组织工程的支架材料；已在神经、膀胱、 血管、肌腱、腹壁等组织缺损的修复中，表现出独特的优势。SIS中还含有多种生长因子，在创伤愈合的早期阶段可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脱细胞小肠粘膜下层生物材料的制备方法，其特征在于，是按以下步骤操作：　１）．前置处理：将动物空肠用水冲洗干净，切成片段，置于含有过氧乙酸和乙醇的水溶液中浸泡不低于１小时，用磷酸盐缓冲液漂洗；刮除小肠粘膜、肌层和浆膜，用ＰＢＳ漂洗干净，获得粘膜下层；　２）．　脱细胞处理：将前置处理后的粘膜下层置入０．１Ｍ～１Ｍ的ＮａＯＨ溶液中于２～８℃条件下浸泡８分钟以上，用ＰＢＳ漂洗至中性；　３）．酶处理：将脱细胞后的粘膜下层置入含有ＤＮＡ酶和α－半乳糖苷酶的混合溶液中，于３６±２℃条件下浸泡２５分钟以上，用ＰＢＳ漂洗干净；　４）．脱细胞小肠粘膜下层膜状产品的制备：将酶处理后的粘膜下层于冷冻保护液中浸泡２...

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞小肠粘膜下层生物材料的制备方法，其特征在于，是按以下步骤操作1). 前置处理将动物空肠用水冲洗干净，切成片段，置于含有过氧乙酸和乙醇的水溶液中浸泡不低于1小时，用磷酸盐缓冲液漂洗；刮除小肠粘膜、肌层和浆膜，用PBS漂洗干净，获得粘膜下层；2). 脱细胞处理将前置处理后的粘膜下层置入0.1M～1M的NaOH溶液中于2～8℃条件下浸泡8分钟以上，用PBS漂洗至中性；3). 酶处理将脱细胞后的粘膜下层置入含有DNA酶和α-半乳糖苷酶的混合溶液中，于36±2℃条件下浸泡25分钟以上，用PBS漂洗干净；4). 脱细胞小肠粘膜下层膜状产品的制备将酶处理后的粘膜下层于冷冻保护液中浸泡25分钟以上，再铺展后经冷冻干燥形成脱细胞小肠粘膜下层生物材料的膜状产品...

【专利技术属性】
技术研发人员：王爱军，
申请(专利权)人：陕西瑞盛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]