一种腺病毒-壳聚糖纳米复合材料的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种腺病毒-壳聚糖纳米复合材料的制备方法，包括聚乙二醇-叶酸缩合物的合成，壳聚糖-聚乙二醇缩合物、壳聚糖-叶酸缩合物以及壳聚糖-聚乙二醇-叶酸的合成，腺病毒-壳聚糖纳米复合物的制备等步骤，制得腺病毒-壳聚糖纳米复合材料，通过对腺病毒进行化学修饰来减少其对肝脏的毒性，降低抗体对其的抵制；通过在腺病毒表面的离子交联壳聚糖或其与聚乙二醇以及叶酸的缩合物，提供了化学交联位点以及实现靶向的物质，维持了腺病毒的原始生物活性的同时，也延长了其在体内循环的时间，且不降低其生物活性和传染性，进一步地，还可提高靶向部位的局部浓度，治疗效果好且可实现大规模加工生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及靶向基因治疗的纳米复合材料的制备方法，更具体地，是一种腺病 毒-壳聚糖纳米结构复合材料的制备方法。
技术介绍
腺病毒(Ad)携带相关材料可用于转基因抗癌治疗，同时联合化疗、放疗来增强抗 癌效果。Ad有很多优势，如高传染性和基因治疗的可控制插入性等，但由于没有材料能够把 足够多的Ad输送到病灶部位，对肿瘤细胞进行充分的感染，因此，当前以Ad为媒介的治疗 主要局限于局部瘤内的监管。为了成功实现联合治疗，需要在目标肿瘤部位得到局部高浓 度的Ad。为了进行有效地基因治疗，需要一个可以被系统性监管的以Ad为媒介的肿瘤靶 向系统。然而，在进行全身Ad传送时会遇到多种困难，例如，Ad会被主体(人)的抗体抑 制，在体循环中存活周期短，而且会被肝脏吸收，在靶向疾病部位的浓度较低等。血液中的 Ad会很快被中和抗体识别，中和抗体可以钝化病毒表面纤维蛋白的识别能力，从而降低其 传染性，从而导致需要增加抗肿瘤治疗所需的有效病毒的剂量。由于Ad会被肝脏网状内皮 系统的肝细胞或库普费尔氏细胞吸收从而导致很高的肝脏毒性。此外，传统的Ad是通过增 加-弥散-滞留(EPR)机制被动地传输到肿瘤细胞的，这本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种腺病毒－壳聚糖纳米复合材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：　　（１）聚乙二醇－叶酸缩合物的合成：将叶酸、二环己基碳二亚胺、Ｎ－羟基丁二酰亚胺按照１∶１∶１～１∶５∶５的摩尔比溶于二甲基亚砜，在氮气保护下活化６～４８小时，过滤后得到活化的叶酸溶液，然后按照叶酸与聚乙二醇的摩尔比为２０∶１～１∶２的比例加入重均分子量为２０００～１００００的聚乙二醇，在氮气保护下反应１～２４小时，加入丙酮沉淀后离心除去多余叶酸，上清液用去离子水透析后冻干即得到聚乙二醇－叶酸缩合物；　　（２）壳聚糖－聚乙二醇缩合物、壳聚糖－叶酸缩合物以及壳聚糖－聚乙二醇－叶酸的合成：将低分子量的壳聚糖溶于蒸馏水，配制成质量...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：韩志超，许杉杉，李立藏，申孟芝，
申请(专利权)人：无锡中科光远生物材料有限公司，
类型：发明
国别省市：32