制备质粒DNA的碱裂解系统及组合系统技术方案

本发明专利技术提供了一种制备质粒DNA的碱裂解系统及组合系统，制备质粒DNA的碱裂解系统包括：细菌悬液储罐；碱裂解液储罐；中空超滤柱，包括由超滤膜分开的第一腔体和第二腔体，碱裂解液储罐与第一腔体相连通，细菌悬液储罐与第二腔体相连通。本发明专利技术提供的制备质粒DNA的碱裂解系统通过采用中空超滤柱将细菌悬液和碱裂解液混合均匀，避免了局部pH值过高问题和由于使用搅拌等常规混合方法而带来的剪切力过大的问题，提供了一种稳定性好、效率高和可重复性强的质粒DNA的碱裂解系统。同时，采用本发明专利技术所提供的制备质粒DNA的碱裂解系统制得的质粒DNA中超螺旋DNA的含量较高，能达到90％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及碱裂解的
，具体而言，涉及一种制备质粒DNA的碱裂解系统及组合系统。
技术介绍
基因治疗正处于研究阶段，其可能成为一些重大疾病如肿瘤、动脉粥样硬化、骨质疏松症、关节炎等的治疗手段，而基因治疗的关键是携带治疗基因的载体能否有效地进入靶细胞。目前，应用基因治疗的载体大致可以分为两大类，一类是病毒载体，另一类是非病毒载体。目前，临床上腺病毒载体占对％，反转录病毒载体占21. 1%，质粒载体占18%。虽然病毒载体的转染率高，但存在一些安全隐患；而质粒DNA在靶细胞中的基因表达效率低、 持续时间短，但它在靶细胞中安全性高。国内外研究机构都非常重视基因治疗的可能性，在国外采用质粒HGF治疗心血管疾病已进入III期临床试验。在国内采用质粒HGF治疗局部肢体动脉缺血疾病已进入I期临床试验。为了保证基因治疗的研究，质粒DNA的大批量生产变得更为重要。碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其原理是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在PH值高达12. 6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种制备质粒ＤＮＡ的碱裂解系统，其特征在于，包括：细菌悬液储罐（１１）；碱裂解液储罐（１３）；中空超滤柱（１５），包括由超滤膜分开的第一腔体和第二腔体，所述碱裂解液储罐（１３）与所述第一腔体相连通，所述细菌悬液储罐（１１）与所述第二腔体相连通。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张庆林，胡春生，卢育新，程晓晨，吴祖泽，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所，
类型：发明
国别省市：11