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一种虫草金属硫蛋白的生产方法技术

技术编号:6641906 阅读:549 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种虫草金属硫蛋白的生产方法,其具体步骤为:虫草菌→液体培养(添加硫酸锌诱导)→菌丝体过滤→富含金属硫蛋白的菌丝体→加缓冲液、研磨破碎细胞→加有机变性、搅拌,杂蛋白变性→离心去除杂蛋白→清夜加热变性→离心去除变性蛋白→迅速冷却至室温→超滤浓缩→浓缩液→G-50层析→巯基试剂法监测收集MT洗脱液→MT洗脱液真空冷冻干燥→MT冻干粉,本发明专利技术操作简单,生产周期短,菌丝体或子实体中MT产率高,可以进行工厂化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及,具体的说涉及一种诱导虫草属真菌大量产生金属硫蛋白,以虫草属真菌菌丝体为原料大量生产金属硫蛋白的方法。
技术介绍
1957年Margoshes和Vallee在马的肾脏里发现一种富含CcUZn的低分子量蛋白质,随后Kagl和Vallee将其提纯,并命名为金属硫蛋白(Metallothionein,MT)。MT广泛存在于生物界里,动物体内的MT主要在肝脏中合成,在血液、肾脏中存在。金属硫蛋白是一种分子量较小(6000 7000)、富含半胱氨酸的非酶蛋白质,其内含有Cd、Cu、Zn、Hg、Au等元素,不含芳香族氨基酸及组氨酸残基。具有以下特征分子量低;含30%半胱氨酸且无芳香族氨基酸;巯基与金属比例为3 1或2 1、4 1 ;金属含量高,每mol含6个金属原子。近年来研究发现,金属硫蛋白有许多生物功能,如可以清除体内自由基,其清除自由基的能力是SOD和谷胱甘肽(GSH)的10000倍;能解除重金属毒素,可以与铅、砷、汞等有毒金属紧密结合,解除重金属毒素,是目前临床最理想的生物解毒剂;能抗辐射和紫外线照射,MT含量丰富的细胞组织,可抵抗离辐射或紫外线引起的细胞组织损伤;本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种虫草金属硫蛋白的生产方法,其特征在于其具体步骤为:(1)培养虫草属真菌菌丝体:将虫草属真菌进行试管斜面菌种培养(活化)、三角瓶液体种子培养、种子罐培养及发酵罐培养,发酵罐培养步骤的培养基为:每升培养液中葡萄糖10-50g,蛋白胨5-10g,酵母提取物1-10g,硫酸锌5-20g,pH值为5.0-7.0;发酵罐投料体积60%-80%,接种重量5-10%,温度20~30℃,通气1∶0.3~0.8,搅拌转速80~150rpm,培养至菌丝体收得率大于等于1.2%,培养基还原糖含量小于等于0.2%时,放罐收获菌丝体;(2)板框过滤:将培养好的虫草属真菌菌丝体以板框过滤机过滤,经过板框过滤后取出菌...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:程显好张聪聪马天云李维焕董洪新刘宇
申请(专利权)人:鲁东大学
类型:发明
国别省市:37

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