甘蓝型油菜抗病相关基因BnWRERF50及制备方法和应用技术

技术编号:6483354 阅读:232 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种甘蓝型油菜抗病相关基因BnWRERF50及制备方法和应用,从甘蓝型油菜中获得一种分离的基因,其序列为SEQIDNo.1所示核苷酸序列;一种分离的多肽,其序列为SEQIDNo.2所示的氨基酸序列。油菜BnWRERF50基因的克隆:在液氮中将植物幼嫩叶片样品研磨,利用Trirol提取试剂盒进行RNA的提取。提取的总RNA溶于双蒸水中。去除残留的DNA。获得的RNA为模板进行逆转录。一种BnWRERF50基因在增强植物对腐生营养型真菌核盘菌和灰霉菌抗性中的应用。BnWRERF50基因增强植物对腐生营养型真菌核盘菌和灰霉菌的抗性。通过基因工程技术升高BnWRERF50基因的表达能够增强植物对腐生营养型真菌核盘菌和灰霉菌的抗性,作为抗性标记用于油菜抗病品种的选育,或者作为基因工程的候选基因用于分子育种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物基因工程和生物
具体涉及一种增强植物对菌核病抗性的BnWRERF50基因,同时还涉及一种增强植物对菌核病抗性的BnWRERF50基因的制备方法, 还涉及因在增强植物对核盘菌抗性、对灰霉菌抗性中的应用。
技术介绍
植物生长位置固定,本身不能迁移,依靠根系统固定在土壤中,获得营养和水分,因此缺乏任何可能的危险逃避机制,来防止来自生物如病原,咀嚼昆虫或更大的食草动物的侵害,和非生物例如风,雨和冰雹的伤害。为了生存,一些植物物种已经进化出了复杂的自然防御机制来避免受到侵害,从分化出生理屏障,包括角质层,木质, 荆棘禾口表皮毛(Levin, D. The role of trichomes in plant defense. Quarterly Review of Biology. 1973. 48:3-15),到产生毒性物质,如生物碱的(Baldwin, I. Mechanism of damage-induced alkaloid production in wild tobacco. Journal of Chemical Ecology. 1989. 15:1661-1680)和单宁(Scalbert, A. Antimicrobial properties of tannins. Phytochemistry. 1991. 30:3875-3883)。然而,一旦侵害发生,因为植物细胞被封闭在细胞壁中,不能移动,不可能像哺乳动物那样,聚集特殊的免疫细胞去愈合伤口,因此植物发展进化出使每一个细胞都有能力通过转录激活一系列抗性响应来抑制病原侵染,达到自我保护的目的(Feys,B. J.,and Parker, J. Ε. Interplay of signaling pathways in plant disease resistance. Trends Genet. 2000. 16:449-455. Glazebrookj J. Genes controlling expression of defense responses in Arabidopsis~2QQ\ status. Curr. Opin. Plant Biol. 2001. 4:301-308.) 对特异病原的识别启动了这些快速的细胞反应,激活了一个或者多个抗性信号传导途径,导致了一系列抗性基因的快速诱导表达(Bostock,R. Μ. Signal crosstalk md induced resistance: Straddling the line between cost and benefit. Annu. Rev. Phytopathol. 2005.43:545—580 Rojoj E., Solano, R., and Sanchez-Serrano, J. J. Interactions between signaling compounds involved in plant defense. J. Plmt Growth Regul. 2003.22:82-98)。这些抗性途径主要被水杨酸,茉莉酸,乙烯,和他们的衍生物所调节(Thatcher LFj Anderson JPj Singh KB Plant defense responses: What have we learnt from Arabidopsisj Funct Plant Biol 2005,31: 1-19)。他们与不同的病源抗性相关,大量研究表明,水杨酸在植物抵抗活体营养型病源的局部和系统获得性抗性中发挥着关键作用(Durrrnt W. E.,mid Dong, X. Systemic acquired resistance. Annu. Rev. Phytopathol. 2004. 42:185-209. Gaffney T., Friedrichj L.,Vernooi j,B.,Negrottoj D.,Nyej G.,Uknesj S.,Ward, Ε., Kessmannj H.,and Ryalsj J. Requirement of salicylic acid for the induction of systemic acquired resistance. Science 1993. 261:754-756);而诱导系统性抗性依赖于茉莉酸和乙烯信号途径,这两种激素信号途径对于植物抵抗腐生型病源,如灰3霄等,是很重要的(Thomma B. , Eggermont, K. , Penninckx, I. , Mauch-Mani, B., Vogelsang, R. , Cammue, B. , and Broekaert, W. Separate jasmonate—dependent and sal icylate-dependent defense-response pathways in Arabidopsis are essential for resistance to distinct microbial pathogens. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1998. 95:15107-15111. Thomma B. , Eggermont, K. , Tierens, K., and Broekaert, W. Requirement of functional ethylene—insensitive 2 gene for efficient resistance of Arabidopsis to infection by Botrytis cinerea. Plant Physiol. 1999. 121:1093-1102.)。然而,这种简单的二分法,把SA和MJ/ET信号割裂开来,即认为他们分别针对于活体营养型和腐生营养型病源的看法,可能过于简单;最近,水杨酸信号也被发现参与了对腐生营养型病源灰霉的局部抗性,用水杨酸处理后显著的抑制了灰霉的侵染(Ferrari S. , Plotnikova, J. Μ. , De, L. G. , and Ausube 1, F. Μ. Arabidopsis local resistance to Botrytis cinerea involves salicylic acid and camalexin and requires EDS4 and PAD2, but not SID2, EDS5 or PAD4. Plant J. 2003. 35:193-205.)。病源的侵染激活的不是一个单一的信号途径,而是一个复杂的相互作用的信号网络。植物的抗性调节是复杂的,牵涉进大量的转录因子家族(Singh KB, FoleyRCj OrT ate-Sa'nchez L (2002) Transcription factors in plant defense and stress responses. Curr Opin Plant Biol 5: 430 - 436),鉴定和利用关键的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的基因,其序列为SEQ ID No.1 所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种分离的基因,其序列为SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。2.一种分离的多肽,其序列为SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列。3.权利要求2所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘胜毅汪承刚周瑢董彩华黄军艳刘越英
申请(专利权)人:中国农业科学院油料作物研究所
类型:发明
国别省市:83

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