一种用于深部肿瘤局部治疗的药物组合物及其在制药中的应用制造技术

一种用于深部肿瘤局部治疗的药物组合物及其在制备用于深部肿瘤局部制疗药物中的应用，它由二硝基氯苯和丙酮组成。每毫升丙酮中含二硝基氯苯０．０４至４００毫克。本发明专利技术适合于对体内的实体性肿瘤作瘤内注射局部治疗，动物实验表明应用该制剂进行治疗可使肿瘤生长受到抑制，使已经形成结节的肿瘤逐步消退，直至完全消失，起效迅速，疗效确切。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及治疗肿瘤的药物，特别是用于恶性肿瘤的局部治疗的药物。肿瘤发病率越来越高，其中绝大多数为实体性肿瘤，目前对实体性肿瘤的治疗是以手术为主，但手术切除率不高，如肝癌的手术切除率不足20％。对于大量不能手术的深部肿瘤病人，主要是采用化疗和放疗，但毒副作用严重，且很多实体性肿瘤对化疗和放疗不敏感，疗效很低。发展新的方法使药物在肿瘤局部浓集或直接在肿瘤局部用药是提高疗效，降低毒副作用的根本途经。目前这方面的技术包括有(1)动脉给药化疗和栓塞；(2)单抗载药导向治疗；(3)脂质体载药。尽管这些方法的使用有一些报道，有一定的疗效，但要达到使肿瘤完全坏死消退并降低复发率还十分困难。为此，发展新的更为有效的药物，是提高医治肿瘤疗效的重要途经。本专利技术的目的是提供一种用于深部肿瘤治疗的药物组合物，它能直接引起肿瘤组织大块坏死，迅速而有效地减轻肿瘤负荷，具有能有效消除肿瘤组织并不具毒副作用等特点。本专利技术的实施方案是这种用于深部肿瘤治疗的药物组合物由二硝基氯苯(DNCB)和丙酮组成。丙酮可以通过细胞脱水，蛋白凝固，血管闭塞等作用直接引起肿瘤坏死，减低肿瘤负荷；DNCB可以在瘤体局部产生剧烈的免疫反应，从而产生继发的持久的抗肿瘤作用.二者相辅相成，产生强大的抗肿瘤效果。它可较广泛地用于多种实体瘤的局部免疫治疗。将DNCB和丙酮这两种不同作用机制的物质按一定比例配制成复方制剂。DNCB作为半抗原与瘤组织中的细胞和蛋白质结合形成完全抗原(事实上改变了瘤组织的抗原性。使其与荷瘤机体的免疫系统不相容)在瘤体局部诱发剧烈的免疫反应，引起瘤细胞死亡。丙酮具有细胞脱水，蛋白质凝固和血管栓塞作用，可在瘤体局部产生迅速而直接的大块肿瘤坏死，降低瘤荷，更有利于免疫机制发挥作用。DNCB是难溶性物质，而丙酮恰好是它的优良溶剂。下面是应用本专利技术药物组合物对小鼠肿瘤进行的治疗实验，即本专利技术的具体实施例及其实验应用。材料与方法一.动物正常Balb/c小鼠，4—6周龄，雌性，体重18—25g，由同济医科大学动物中心提供。二.肿瘤细胞株艾氏腹水癌细胞株由中国医学科学院药物研究所引进，同济医科大学药学院肿瘤研究室传代。三.动物肿瘤模型制作将含有5×10个艾氏腹水癌细胞的0.2ml细胞悬液注射液于小鼠右肩岬部皮下，7天时长出可触及的实体瘤结，成功率100％。四.试剂为本专利技术的DNCB丙铜溶液，临用时用丙酮溶解DNCB配制成浓度分别为40mg/ml、0.04mg/ml、400mg/ml的溶液。五.治疗作用观察取50只小鼠先进行DNCB致敏。接种艾氏实体瘤7天后随机分组，每组10只。1.400mg/mlDNCB丙酮溶液组2.0.4mg.mlDNCB丙酮溶液组3.40mg/mlDNCB丙酮溶液组分别给予瘤体内注射相应浓度的DNCB丙铜溶液，每只0.25ml，每周2次，共4次。4.丙酮组，给予瘤体内注射丙酮，方法同上。5.空白对照组，不作任何处理。每周用卡尺测量瘤体大小一次，测相互垂直的两个直径，记录平均直径。并记录每只动物瘤体表面及质地变化和存活时间。至70天时仍存活的动物在其左肩岬部皮下再次接种5×10个艾氏腹水癌细胞，并取10只正常小鼠同样接种作为对照，继续观察。所有动物均做系统剖检，取心肺肝肾脾组织做病理检查。六.瘤体病理检查取小鼠90只，先行DNCB致敏。接种肿瘤7天后随机分为三组。<1>组瘤体内注射DNCB溶液0.25ml/只，<2>组瘤体内注射丙酮0.25ml，<3>组为空白对照。于瘤体内注射后的5小时，1天，2天，7天，14天和21天，每组各取5只小鼠处死，取瘤体标本作石蜡切片，HE染色组织学观察。结果如下一.瘤体变化及生存情况 治疗组和对照组小鼠瘤体大小的变化见表1，生存情况见表2。1组小鼠接受400mg/mlDNCB丙酮溶液瘤内注射后于3周左右全部死亡。2组小鼠接受0.4mg/mlDNCB丙酮溶液瘤内注射后，短期瘤体生长减缓，3/10的小鼠排斥了肿瘤、长期存活。7/10的小鼠肿瘤进行性生长而死亡。3组小鼠接受40mg/mlDNCB丙酮溶液瘤体内注射后，瘤体及其周围呈现红肿，3周左右时瘤体生长停止，并出现坏死及表面结痂，7周左右瘤体完全脱落，留下创面很快愈合。本组小鼠在第一，二周各有一只死亡，70天时仍有8只存活，瘤体均已完全脱落。再次接种艾氏腹水癌细胞，均无肿瘤生长，而同时对照接种的10只正常小鼠均在7天时长出可触及的肿瘤结节。丙酮对照组在注射后短期内瘤体生长减缓，注射处出现坏死灶，但其周围的瘤组织仍继续生长。并于4周左右瘤体中心出现液化性坏死腔，第二周开始有动物死亡，至70天时仅存活2只荷巨大瘤结节的小鼠，再次接种肿瘤细胞，7天时长出皮下瘤结节。空白对照组的小鼠肿瘤进行性生长，第一周开始有动物死亡，至5周左右全部小鼠死亡。空白对照组的小鼠瘤体切片在早期显示为生长活跃的肿瘤组织，瘤周有少量淋巴细胞。从第8天开始，由于肿瘤生长过快，血供相对不足，出现中心性坏死。此后的标本中，坏死区逐步扩大并形成液化腔，瘤体周围部分的瘤组织则继续生长。瘤周组织中的淋巴细胞消失。NCB溶液组在瘤体内注射后5小时的瘤体标本中即可见大片肿瘤组织坏死，瘤周组织中出现较多淋巴细胞浸润。此后的标本中，坏死区逐渐扩大，瘤体内和瘤周浸润的淋巴细胞密集，并见淋巴细胞和纤维细胞组成的反应带分隔包围肿瘤细胞团块。丙酮对照组标本表现为与DNCB组相似的坏死，但程度较轻，坏死区周围的组织中无明显的淋巴细胞浸润。瘤体中心坏死，而瘤周的肿瘤组织则继续生长。以上实验结果说明，一定浓度的DNCB丙酮溶液瘤体内注射可有效地消除动物已经长大的瘤结节，并使动物产生抵抗再次接种同种肿瘤的特异免疫力，以40mg/ml左右浓度疗效较好，当浓度低于0.4mg/ml时，因无法激发免疫反应，疗效降低。当浓度高于400mg/ml时，因过量使毒性增加，致动物死亡。本专利技术适合于对体内的实体性肿瘤作瘤内注射局部治疗，动物实验表明应用该制剂进行治疗可使肿瘤生长受到抑制，使已经形成结节的肿瘤逐步消退，直至完全消失，起效迅速，疗效确切。本专利技术还可用于生产制备用于深部肿瘤局部治疗的药物。表1各组小鼠瘤体平均瘤径大小(CM)的变化时间(周) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10①40％DNCB丙酮溶液组 0.65 1.08 1.51 - - - - - - -②0.04％DNCB丙酮溶液组 0.63 1.01 1.14 1.55 1.88 2.09 2.25 2.51 2.54 2.55③4％DNCB丙酮溶液组0.64 1.04 1.05 1.03 1.03 1.03 0.79 0.38 0 0④丙酮组 0.63 0.99 1.15 1.60 1.99 2.20 2.24 2.50 2.53 2.53⑤空白对照组 0.63 1.06 1.85 2.46 2.67 - - - - -t检验①⑤P＞0.05②⑤从第三周开始P＜0.05①④P＞0.05③⑤从第三周开始P＜0.01②④P＞0.05④⑤从第三周开始P＜0.01③④从第四周开始P＜0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于深部肿瘤局部治疗的药物组合物，其特征在于它由二硝基氯苯和丙酮组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：杜广辉，章咏裳，
申请(专利权)人：同济医科大学，
类型：发明
国别省市：42[中国|湖北]