抗鼻炎和鼻窦炎特异性IgY及其组合制剂制造技术

一种抗鼻炎和鼻窦炎特异性ＩｇＹ，其特征在于该抗鼻炎和鼻窦炎特异性ＩｇＹ的制备方法包括下列步骤： 筛选引致鼻炎和鼻窦炎的主要病原体；分别制备引致鼻炎和鼻窦炎的各种病原体抗原；制备免疫蛋；分别提取抗鼻炎和鼻窦炎各种致病病原体特异性ＩｇＹ粗提物；粗提物的纯化；制备抗某一种或多种特定鼻炎和鼻窦炎致病病原体的特异性ＩｇＹ。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗鼻炎和鼻窦炎病原体特异性IgY及其制备方法，特别是涉及用于防治因病毒、致病菌、以及过敏原引致的各种鼻腔和鼻窦炎症的多种组合的复合IgY及其制备方法和新型组合制剂。IgY(Immunoglobulin of YoIk)属IgG类免疫球蛋白，能与相应抗原发生特异性结合，从而抑制或改变了该抗原(为某些细菌或真菌或病毒)的状态或活性，并通过调理作用，促进分叶核细胞或巨噬细胞对细菌或真菌或者病毒的吞噬。由于IgY能够特异性与病原体结合并将其抑制，就可以克服抗生素和抗真菌药的一些缺点，从而达到有效治疗和预防相关病原体引发的鼻腔和鼻窦炎症的目的。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的1、优选引致鼻炎和鼻窦炎的主要致病病原体A、细菌；A簇B型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、卡他球菌、流感杆菌、草绿色链球菌、白色葡萄球菌等；B、真菌烟曲霉菌、黄曲霉菌、黑曲霉菌、米曲霉菌以及构巢曲霉菌和白色念珠菌等；C、病毒鼻病毒5型、14型、29型、冠状病毒229E型和0C43型等；2、分别制备各种病原体复合抗原A、细菌复合抗原购买市售的A簇B型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、卡他球菌、流感杆菌、草绿色链球菌、白色葡萄球菌等7种菌种，用细菌培养基分别在细菌培养箱中常规培养，将培养好的细菌按以下比例混合匀化肺炎双球菌 占20-5％A簇B型溶血性链球菌 占35-50％ 流感杆菌 占10-25％金黄色葡萄球菌占15-5％草绿色链球菌 占10-5％白色葡萄球菌 占5％左右卡他球菌 占5％左右然后加入福氏佐剂，再放进高速匀浆机中以10000-30000rpm转速高速粉碎匀化，则制得全菌和菌体成分混合的细菌复合抗原。B、制备真菌复合抗原购买市售的烟曲霉菌、黄曲霉菌、黑曲霉菌、米曲霉菌、构巢曲霉菌以及白色念珠菌、毛霉菌等6种真菌菌种，采用真菌培养基在培养箱中常规培养。将培养好的真菌按以下比例混合匀化烟曲霉菌占 35-15％黄曲霉菌占 20-10％黑曲霉菌占 30-15％米曲霉菌占 10-20％构巢曲霉菌 占 10-15％白色念珠菌 占 10％左右然后加入福氏佐剂，置入高速匀浆机中以10000-30000rpm转速高速粉碎匀化，则制得全菌和真菌菌体成分的复合抗原。C、、制备含病毒、细菌和真菌的综合性复合抗原优选引致急性鼻炎的有代表性的病原体鼻病毒5型、14型、29型三种(可根据情况变更优选的鼻病毒种类和数目)，冠状病毒229E型和0C43型两种(可根据情况变更优选的冠状病毒种类和数目)，再加上引致鼻炎和鼻窦炎的主要致病菌A簇B型溶血性链球菌、肺炎双球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌，另加1-3种引致鼻腔炎症的主要真菌烟曲霉菌、黑曲霉菌和白色念珠菌；先将5型、14型和29型鼻病毒和229E型、0C43型冠状病毒各自培养并灭活后混匀，然后把鼻病毒和冠状病毒按1-10∶1-10比例混合均匀，制成病毒抗原混合物；再将A簇B型溶血性链球菌、肺炎双球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌分别培养好后，按1-10∶1-10∶1-10∶1-10的比例混合均匀，制成致病菌抗原混合物；然后，将烟曲霉菌、黑曲霉菌和白色念珠菌培养好后按1-10∶1-10∶1-10的比例混匀，制成真菌抗原混合物；最后，将病毒抗原混合物、致病菌抗原混合物、真菌抗原混合物按1-10∶1-10∶1-10的比例混合搅拌均匀，再按1-10∶1-10的比例加入福氏佐剂，然后一道放进高速匀浆机中以10000-30000rpm转速高速粉碎匀化，则制得一种含病毒、细菌和真菌的综合性复合抗原；3、分别用以上制备的细菌复合抗原或真菌复合抗原或含病毒、细菌和真菌的综合性复合抗原，免疫优选的健康产蛋禽类，检取免疫后的产蛋禽类所生的免疫蛋，并按细菌复合抗原免疫蛋和真菌复合抗原免疫蛋以及抗病毒、细菌和真菌复合抗原免疫蛋的不同分别编码标记，以便区别；4、分别提取抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY和抗鼻真菌病特异性IgY以及抗病毒、细菌和真菌特异性IgY粗提物；5、采用过离子交换柱和凝胶交换柱对按以上工艺技术制取的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY和抗鼻真菌病特异性IgY以及抗病毒、细菌和真菌特异性IgY粗提物进行纯化，即得到各种纯IgY。将0.01-80％的本专利技术的抗鼻炎和鼻窦炎病原体特异性IgY及各种复合IgY配以99.99-20％的辅料，可制成临床可接受的各种剂型，包括鼻喷剂、滴鼻剂、鼻烟壶式的吸鼻剂等；将本专利技术的抗病毒、细菌和真菌特异性IgY和抗过敏特异性IgY按1-10∶1-10比例混合，就可制成一种抗多种病原体和致敏原的特异性复合IgY；将本专利技术的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY与抗感冒特异性IgY按1-10∶1-10的比例混合，可制成一种抗病毒性和细菌性感染鼻炎的复合IgY；将本专利技术的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY和抗感冒特异性IgY以及抗过敏特异性IgY按1-10∶1-10∶1-10的比例混合，可制成一种多重组合的特异性复合IgY。本专利技术的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY和抗鼻真菌病特异性IgY，以及抗病毒、细菌和真菌特异性IgY和多种抗病毒、细菌和过敏原的特异性复合IgY，都是从免疫后的产蛋禽类(母鸡、母鸭或火鸡、鸵鸟等)所产蛋的蛋黄中提取的生物制剂，使用十分安全，无任何毒付作用。采用本专利技术的方法制备的各种抗鼻炎和鼻窦炎特异性IgY和复合IgY，配以蒸馏水或各种溶剂，加上适量香精，制成各种制剂，直接施于病原体最集中的鼻腔部位，作用直接，见效快，使用又十分简便。本专利技术供防治用途，即使长期大量使用，也不会对鼻腔、鼻粘膜造成任何刺激或损伤。既不会像滴鼻净或麻黄碱等化学滴鼻药那样导致药物性鼻炎，也不会像丁卡因、利多卡因等药物那样破坏鼻粘膜粘液纤毛输送功能。特别是，由于本专利技术的特异性IgY只对引致各种鼻腔炎症的病原体或致敏原直接产生抑制作用，对鼻腔内的各种有益菌有很好的保护作用，不会像“抗生素”和其他化学药物那样，诱发产生“抗药菌株”，也不致造成“菌群失调”。更可贵的是，应用本专利技术的特异性IgY，还可以在鼻腔内构建一种不产生炎症、不易被病毒和细菌以及真菌感染的正常菌群生态，从而产生特殊的长效作用。试验例1应用SDS-PAGE电泳测定法，对采用本专利技术的方法制备的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY和抗真菌性鼻窦炎特异性IgY以及抗病毒、细菌和真菌特异性IgY粗提物进行检测，测得其中纯IgY含量为50％左右。试验例2应用常规“ELISA法”(酶联免疫实验法)分别检测按本专利技术的方法制备的三种特异型IgY的活性。检测结果为下表所示 从检测结果可以看出，采用本专利技术的方法所制得的抗鼻炎和鼻窦炎致病菌特异性IgY对引致鼻炎和鼻窦炎的常见致病菌的抗体结合效价都很高，显示有很强的抑制作用；所制得的抗鼻真菌病特异性IgY对引致鼻真菌病的常见真菌也有很好的抑制作用；同样，采用本专利技术的方法制备一种包含病毒、细菌和真菌综合性复合抗原，用其免疫生蛋禽类，所制备的抗病毒、细菌和真菌的特异性IgY无论对引致鼻腔炎症的常见的病毒，还是常见的致病菌，或者常见的几种真菌都有理想的抗体结合效价，提示都有一定的抑制效果。试验例3应用常规“ELISA法”(酶联免疫实验法)检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：包晟，
申请(专利权)人：雅臣药业集团远东有限公司，
类型：发明
国别省市：