甘蓝型油菜ＢｎＧＬＡＢＲＡ２启动子及制备方法和应用技术

技术编号：6024289 阅读：414 留言：0更新日期：2012-04-11 18:40

本发明专利技术公开了一种甘蓝型油菜ＢｎＧＬＡＢＲＡ２启动子及制备方法和应用，其步骤是：Ａ、基因组步移克隆启动子序列：利用ＳＤＳ裂解法提取基因组ＤＮＡ，进行基因组步移，每次步移扩增两轮ＰＣＲ克隆油菜。Ｂ、启动子序列生物信息学分析：将所克隆序列用ＢＬＡＳＴＮ进行同源比对。启动子核心元件和上游顺式作用元件用启动子预测软件，得到启动子序列和上游启动子元件；Ｃ、全长启动子、缺失启动子的扩增以及ｐＭＤ１８－Ｔ－ＧＰ载体的构建：以基因组ＤＮＡ为模板，根据前期得到的启动子序列，设计扩增各缺失片段的引物进行ＰＣＲ扩增。一种甘蓝型油菜ＢｎＧＬ２基因全长启动子ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１在叶片表皮毛、种子、根部、整个叶脉、中柱叶脉中的应用，操作简单，结果稳定可靠。具有生物安全性和开发应用价值。