油菜蜂花粉有效部位在预防酒精性肝损伤的新用途制造技术

本发明专利技术公开了油菜蜂花粉有效部位在预防酒精性肝损伤的新用途；同时公开了油菜蜂花粉有效部位的制备。本发明专利技术通过动物实验说明油菜蜂花粉有效部位对酒精引起的大鼠肝损伤具有保护作用，可用来制备预防酒精性肝损伤的保健品或药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然产物保健品和制药
，涉及油菜蜂花粉有效部位预防 酒精性肝损伤的新用途及其制备方法。
技术介绍
过量饮酒是当今世界范围内一个重要的社会问题，不但严重影响人们的身心 健康，而且对社会危害极大。长期大量饮酒可引起酒精性肝病，包括脂肪肝、 酒精性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌等。乙醇进入肝细胞后，经酶作用， 形成乙醛。乙醛对肝细胞有明显的毒性作用，使其代谢发生障碍，导致肝细胞 的变形和坏死。如果对嗜酒者及早采取预防和治疗，可避免酒精性肝损伤的发 生，减缓其发展速度。目前对酒精性肝损伤并无特效药，有些对脂肪肝有效的 西药本身对肝脏有一定的损害。因此从天然资源中寻找对酒精性肝损伤进行有 效保护的产品是科研工作者的迫切任务。油菜蜂花粉是天然产物；是自然界赋予人类的优良营养源，包含了自然界全 部营养素，含有黄酮类、氨基酸、多糖类、多肽类等生物活性物质，具有多种生理功能，如降血脂作用，增强免疫和防癌作用，防辐射作用，抑制前列腺疾 病的发生和发展等。有报道说，花粉有明显解酒作用和减轻酒后不适反应的作 用，具有保肝作用，使肝脏转换代谢酒精的能力增强。油菜蜂花粉来源于天然， 生产成本低，有望开发成具有竞争力的预防酒精性肝损伤的保健品和中药新药。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供油菜蜂花粉有效部位在预防酒精性肝损伤的新用途，本专利技术的另一个目的在于公开油菜蜂花粉有效部位的制备方法。本专利技术油菜蜂花粉有效部位的制备方法为破壁油菜蜂花粉用溶剂提取，合并提取液，浓縮，再进行纯化。经过破壁可 以提高油菜蜂花粉的提取率。提取溶剂使用水、醇类、或水与醇类的混合物。 优选的醇类包括甲醇、乙醇、正丁醇、异丁醇等，最优选的是乙醇，乙醇浓度为体积比40~95%。提取时溶剂量为原料重量的4~14倍。提取可以在静态或动 态下，优选在动态条件下。为了提高提取效率，可以使用超声波等。提取温度 从室温到溶剂回流温度的范围内，优选在3(TC 5(TC的温度下。提取可连续或间 歇进行，间歇提取时可重复2 5次，提取时间是4~24小时，优选为10~15小时。上步结束后，合并提取液，滤过，滤液在动态状态下，在常压或减压加热浓 缩，优选减压浓縮，浓縮到无醇味并呈一定的体积后，以水转移溶解，通过萃 取，得到有效部位。萃取剂为水和常用有机溶剂(如石油醚、乙醚、二氯甲垸、 氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等)；采用石油醚(60~90°C)脱脂，用乙酸乙酯和/或 正丁醇依次提取1~5次，合并乙酸乙酯和/或正丁醇的溶液，浓縮至干，即为本 专利技术有效部位。取本专利技术油菜蜂花粉有效部位，加上药学或食品常规辅料，按照常规工艺， 制成可接受的剂型，包括但不限于浓縮丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、 软胶囊剂、口服液体制剂等剂型。本专利技术油菜蜂花粉有效部位经临床药效学实验证实，具有预防酒精性肝损伤 的作用，可用于制备预防酒精性肝损伤的保健品。以下药理实验和实施例用于进一步说明但不限于本专利技术。药效学研究有效部位提取破壁油菜蜂花粉加入重量4倍量的石油醚进行浸提，共提取 3次，弃提取液。将提取后的残留物用4倍量乙酸乙酯浸提，共提取3次，合并 提取液，滤过，滤液回收溶剂后浓縮干燥为乙酸乙酯部位。将脂提后的残留物用4倍量正丁醇浸提，共提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收溶剂后浓縮干燥为正丁醇部位。试验材料受试物为上述分级提取物，实验动物为SPF级大鼠，雌雄各半， 体重150 250g。取大鼠80只，随机分8组，第一组为正常对照组灌胃10ml/kg 蒸馏水，第—组为模型组灌胃10ml/kg蒸馏水，第三组为油菜蜂花粉组灌胃 10g/kg，第四、五组为油菜蜂花粉乙酸乙酯和正丁醇提取部位，灌胃量相当于油 菜蜂花粉10g/kg，每日禁食12小时，自由饮水。除空白对照组外，均灌胃7ml/kg 40度牛栏山二锅头，空白组给予等体积无菌饮用水，每日两次，间隔6小时， 连续30天，试验前一天禁食16小时，自由饮水，试验当日给药1小时后眼眶 取血。测定血清中TG、 GST、 GSH含量，T检验比较组间差异。取同一部位肝 叶，放入10%甲醛中固定，作病理切片，进行肝脏病理组织学HE染色检查。结 果以光镜下病理损伤程度照片作为标准。表l油菜蜂花粉提取部位对酒精所致大鼠肝损伤血液生化指标的影响(I±SD)<table>table see original document page 5</column></row><table>注与空白对照组相比较▲ P<0.05 ▲▲ P<0.01; 与模型对照组相比较* P<0.05 ** P<0.01; (3)结果表l结果表明油菜蜂花粉乙酸乙酯部位和正丁醇部位可使酒精性肝损伤大鼠血中TG显著降低，显著提高酒精性肝损伤大鼠血中GST和GSH活性，为预 防酒精性肝损伤的有效部位。病理组织学观察暨附图说明图1正常组，肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐，肝窦正常。图2模型组，肝正常组织结构消失，肝细胞水样变，部分细胞可见脂肪变，肝细胞出现多处灶状坏死，单核、淋巴细胞浸润。图3花粉组，肝组织损伤明显减轻，出现多灶性肝细胞坏死伴炎症、再生。 图4乙酸乙酯部位，肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐，多数肝细胞结构清晰， 接近正常状态，没有明显的病理变化。图5正丁醇部位，肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐，多数肝细胞结构清晰， 接近正常状态，没有明显的病理变化。病理组织学结果表明油菜蜂花粉乙酸乙酯部位和正丁醇部位对酒精所致肝损伤大鼠肝脏有保护作用，是油菜蜂花粉预防酒精性肝损伤的有效部位。结论油菜蜂花粉有效部位对酒精所致的大鼠肝损伤有明显的保护作用。 下述实施例均能实现上述实验例的效果。 具体实施例方式实施例l:油菜蜂花粉有效部位的制备取油菜蜂花粉1000g，破壁，加95%乙醇1200ml，加热回流1小时，共提取3次，滤过。滤液减压至无醇味，加入蒸馏水至1000ml，置于分液漏斗中，以 石油醚(60~90°C) 400ml、 300ml和300ml依次萃取，再以乙酸乙酉旨(400ml、 300ml和300ml)和正丁醇(400ml、 300ml和300ml)依次萃取。乙酸乙酯层和 正丁醇层分别合并，减压回收溶剂至干，得到重19g浸膏和132g固体。此两部 分均为本专利的有效部位，保肝活性显著。 实施例2:油菜蜂花粉有效部位的制备取油菜蜂花粉lOOOg，破壁，加石油醚(60~90°C) 1200ml，加热回流1小时， 滤过。药渣以石油醚(60~90°C)同法再次提取2次，滤过。药渣挥干溶媒后， 以1200ml乙酸乙酯加热回流1小时，共提取3次。乙酸乙酯提取液合并，回收 溶媒至干，得浸膏21g。此浸膏为本专利的有效部位，保肝活性显著。实施例3:油菜蜂花粉有效部位的制备取油菜蜂花粉1000g，破壁，加蒸馏水3000ml、 1500ml和1500ml依次煮沸 1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓縮至约1000ml，置于分液漏斗中，以400ml、 300ml、 300ml石油醚萃取以除去低极性的物质后，以正丁醇(400ml、 300ml 和300ml)依次萃取3次。合并正丁醇层，减压回收溶剂至干，得到106g固体， 即为本专利的有效部位，保肝活性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种油菜蜂花粉预防酒精性肝损伤的有效部位，其特征在于该有效部位是由如下方法制成：破壁油菜蜂花粉以甲醇、乙醇、正丁醇、异丁醇等醇类，或这些醇类的水溶液或水，浸提或回流提取１～３次，合并提取液，滤过。滤液浓缩到无醇味或呈一定的体积后，以水转移溶解，采用石油醚、氯仿或乙醚脱脂后，用乙酸乙酯、正丁醇依次提取１～５次，合并乙酸乙酯和／或正丁醇的溶液，浓缩至干，即为本专利技术有效部位。

【技术特征摘要】
1. 一种油菜蜂花粉预防酒精性肝损伤的有效部位，其特征在于该有效部位是由如下方法制成破壁油菜蜂花粉以甲醇、乙醇、正丁醇、异丁醇等醇类，或这些醇类的水溶液或水，浸提或回流提取1～3次，合并提取液，滤过。滤液浓缩到无醇味或呈一定的体积后，以水转移溶解，采用石油醚、氯仿或乙醚脱脂后，用乙酸乙酯、正丁醇依次提取1～5次，合并乙酸乙酯和/或正丁醇的溶液，浓缩至干，即为本发明有效部位。2. 油菜蜂花粉有效部位在预防酒精性肝损伤的用途。3. 根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙丽萍，王大仟，张智武，侯晓明，廖磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]