检测稀有循环细胞内多种信号转导分子的基于抗体的阵列制造技术

技术编号:5478697 阅读:261 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了用于检测稀有循环细胞内众多信号转导分子的活化状态和/或总量的基于抗体的阵列以及使用该阵列来帮助癌症预后和诊断及设计个性化、定向治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】检测稀有循环细胞内多种信号转导分子的基于抗体的阵列 相关申请的交叉引用0001本申请要求2006/9/21提交的美国专利申请号U/525,598(该申请已变 为美国临时专利申请No. 一)和2007/8/20提交的美国临时申请号60/913,087的 优先权,出于所有目的将它们的内容通过引用全文纳入本文。
技术介绍
经常在癌症不同早期阶段的患者血液内发现"微小转移"肿瘤细胞(散 布肿瘤细胞),在转移癌中也有发现。血液中肿瘤细胞的数目取决于肿瘤的阶段 和类型。肿瘤是极其异质性的。因此,单个部位的活检样品可能无法代表肿瘤群 的异质性。活检样品通常从原发性肿瘤上获得;然而,无法对大多数转移瘤进行 活检,从而更难于对肿瘤样品进行分子分析。图9显示了在微阵列ELISA中用抗EGFR胞外域的单克隆抗体作为 捕获抗体和抗磷酸化EGFR的单克隆抗体作为检测抗体检测A431细胞中的磷酸 化EGFR。 (a)基于细胞数的捕获抗体稀释曲线。微阵列ELISA具有宽动态范围, 可用稀释系列中各种捕获抗体浓度检测约I-IO,OOO个细胞内的磷酸化EGFR。 (b) 基于捕获抗体浓度稀释系列的细胞滴定曲线,显示可从一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种进行具有高动态范围的多重、高通量免疫测定的方法,该方法包括: (a)将细胞提取物与该细胞提取物中一种或多种分析物的特异性捕获抗体的众多稀释系列一起培育以形成众多捕获分析物,其中所述捕获抗体局限在固相支持体上; (b)将所述众 多捕获的分析物与相应分析物的特异性检测抗体一起培育以形成众多可检测的捕获分析物,其中所述检测抗体包含: (1)众多用易化部分标记的活化状态非依赖性抗体,和 (2)众多用信号放大对的第一成员标记的活化状态依赖性抗体, 其中所 述易化部分产生导向信号放大对的第一成员并与其反应的氧化剂; (c)将众多可检测的捕获分析物...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:J哈维S辛格P金X刘R巴罕姆L刘
申请(专利权)人:普罗米修斯实验室股份有限公司
类型:发明
国别省市:US[美国]

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