分离肝祖细胞的基质和方法技术

本发明专利技术提供了在一种或多种细胞外基质组分上体外分离和增殖肝祖细胞的方法，所述细胞外基质组分包括聚合形式的胶原。还提供了用于分离和增殖所述祖细胞的容器，该容器包括包含所公开的基质的培养皿和／或生物反应器。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及肝祖细胞的体外富集和/或分离和增殖。具体来说， 本专利技术涉及细胞外基质组分的识别和选择，所述细胞外基质组分能 够在体外增殖和/或分离肝祖细胞(包括肝干细胞)。
技术介绍
过去十年间，已经在临床研究中试验了原代肝细胞移植作为整 体器官移植替代的安全性和有效性，证明了其潜力。鉴于绝大部分 从未使用过的供体肝分离的肝细胞不具有增殖能力，植入有能力原 位形成肝组织的干细胞群的能力将是现有的基于细胞的疗法中 的重要进步。肝干细胞及其子代(例如，肝胚细胞和定向祖细胞 ) 具有相当的扩增潜力。为此，这些细胞群是细胞疗法(包括生物人 工肝或细胞移植)的理想候选物，并为患者提供了有吸引力的可选 治疗选择。但是尽管有此希望，但肝细胞疗法的全部潜力依然有待实现。 首先，肝干细胞的分离可能是费力费时的。这些细胞经常包括少于 5%的总肝细胞群，并且在许多情况下少于1%。目前方法通常包括使 用可识别标志物(例如，细胞表面蛋白抗体)正向选择耙细胞。这 些方法是昂贵且有时无效的。其次，肝干细胞及其子代的体外增殖已证明是有挑战性的。当 肝干细胞及其子代成功在体外增殖时，培养条件对于从实验台转向 临本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外分离肝祖细胞的方法，该方法包括：　（ａ）提供肝细胞的单细胞悬液；　（ｂ）在包含聚合形式的胶原的细胞外基质上培养所述肝细胞悬液以获得一群分离的肝祖细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2006-6-28 60/816,8621.一种体外分离肝祖细胞的方法，该方法包括(a)提供肝细胞的单细胞悬液；(b)在包含聚合形式的胶原的细胞外基质上培养所述肝细胞悬液以获得一群分离的肝祖细胞。2. 权利要求1的方法，其中所述胶原是I型胶原。3. 权利要求2的方法，其中所述基质包含超过约75%重量的I 型胶原。4. 权利要求3的方法，其中所述基质包含超过约90%重量的I 型胶原。5. 权利要求4的方法，其中所述基质包含超过约95%重量的I 型胶原。6. 权利要求5的方法，其中所述基质包含超过约97%重量的I 型胶原。7. 权利要求1的方法，其中所述基质进一步包含聚合形式的III 型胶原。8. 权利要求l的方法，其中所述肝祖细胞是肝干细胞。9. 权利要求l的方法，其进一步包括在无血清培养基中培养所 述肝细胞悬液。10. 权利要求1的方法，其中所述包含聚合形式的胶原的细胞 外基质是PUREC0L基质。11. 一种体外选择肝祖细胞的方法，该方法包括(a) 提供肝细胞的单细胞悬液；(b) 在包含胶原的细胞外基质上培养所述肝细胞悬液，所 述胶原是聚合形式，以获得一群分离的肝祖细胞。12. —种体外选择肝祖细胞的方法，该方法包括(a) 提供肝细胞的单细胞悬液；(b) 在包含胶原的细胞外基质上培养所述肝细胞悬液，所述胶原是聚合形式，以获得一群分离的肝祖...

【专利技术属性】
技术研发人员：JC鲁伊斯，SA舍伍德，JC克拉克，
申请(专利权)人：维斯塔治疗公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]