治疗自身免疫性疾病的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了治疗自身免疫性疾病，尤其是类风湿性关节炎的组合物和方法。显示作为Ｔｏｌｌ样受体２拮抗剂起作用的化合物抑制导致自身免疫性疾病发病和发展的免疫应答。尤其是，公开了对Ｔｏｌｌ样受体２具有结合特异性的单克隆抗体被应用于治疗和／或预防自身免疫性疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及治疗关节炎的组合物和方法。尤其是，提供了治疗和预防类风湿性关节炎的方法，其通过抑制Toll样受体2的功能和/或表达来发挥作用。
技术介绍
关节炎是渐进性、炎性自身免疫性疾病。关节炎最普遍的形式是类风湿性关节炎， 一种以关节的炎症为特征的慢性炎性病变。虽然，类风湿性关节炎很少导致死亡，类风湿性 关节炎的相关症状(其最通常包括关节机动性的丧失)会造成个体生活质量显著降低。类风湿性关节炎(RA) —般是多关节的，即其影响许多关节。一旦被触发，其造成 滑膜炎，引起水肿、血管舒张和CD4+T细胞的激活。疾病发展的早期和中期标志包括细胞因 子的表达；肿瘤坏死因子α、IL-U IL-6、IL_8和IL-15以及转化生长因子(TGF)。一旦发 生关节的炎症，滑膜加厚，而软骨(cartridge)破裂。这一系列事件导致关节受损和关节机 动性的丧失。用于治疗RA的疗法一般针对于炎症介质(mediators)。尤其是，肿瘤坏死因子已 被广泛地用于存在这种情况的受体。其它的疗法涉及抗CD20抗体、白细胞介素-1 (IL-I) 阻断剂，以及T细胞激活阻断剂。Toll样受体(TLR)形成了模式识别受体家族，其在激活先天免疫应答中起关键作 用。至今，已经在人体中鉴定了 11个Toll样受体。TLR族成员是高度保守的，大多数哺乳 动物种类具有10至15个TLR。每个TLR识别特异性的病原相关分子信号。Toll样受体 2(TLR2、⑶282、TLR-2)被肽聚糖、脂蛋白和脂磷壁酸激活。已知Toll样受体形成同源二聚 体或异源二聚体，其中每个二聚体具有不同的配体特异性。TLR2与TLRl或TLR6以及可能 还具有作为膜结合受体的TLR10形成异源二聚体。此外，在循环系统和乳汁中，TLR2的胞 外域与⑶14形成可溶的异源二聚体。结合TLR2的配体产生通过与如MyD88和Mal (MyD88_接头样蛋白)，也已知为 TIRAP(包含接头蛋白的Toll-白细胞介素-1受体域)的胞质接头蛋白相互作用介导的下 游信号。TLR2和TLR2诱导的信号的参与以及免疫系统的激活已表明TLR2是炎症和疾病发 展中的重要的介质。因此已产生了与TLR2信号途径调节相关的显著的治疗上的兴趣。认 识到确定TLR2介导的免疫信号在炎症和疾病中具有重要作用已经产生了数种正在设计中 的疗法，其用于阻断或抑制TLR2的功能活性。本专利技术者令人惊奇地发现TLR-2介导的IL_8(白细胞介素8)细胞因子的产生，其 作为重要的早期炎症介质，参与了类风湿性关节炎的发展。不希望被理论所束缚，本专利技术 人预测具有类风湿性关节炎的受体的关节液中存在的化合物造成Toll样受体(TLR2)的 活化，这相应地产生Toll样受体2介导的胞内信号，这造成如早期炎症细胞因子的介质的 表达，其造成早期炎症反应。尤其是，对于类风湿性关节炎的发病和进程，本专利技术者已显示 Toll样受体2的激活产生胞内信号，其导致早期炎症细胞因子IL-8的产生，和相关的早期 炎症免疫应答的发展。因此，本专利技术者确定阻断Toll样受体2的激活或抑制其功能或胞内功能会相应地 导致IL-8的产生下降，这进而造成受体中的类风湿性关节炎发展表征的异常免疫应答的 下调。
技术实现思路
根据本专利技术的第一方面，提供了治疗和/或预防风湿性关节炎的方法，该方法包 含下列步骤-提供治疗有效量的调节Toll样受体2功能的药剂，和-将所述的化合物(药剂)给药于需要这样的治疗的受体。如本文所定义，术语“调节功能”表示该药剂调节Toll样受体2的一种或多种生 物功能活性。在某些实施方式中，Toll样受体2功能的调节涉及抑制Toll样受体2的激 活和/或抑制由Toll样受体2介导的下游胞内信号。调节还可延伸到Toll样受体2的表 达的抑制。如本文所定义，调节TLR2的“药剂”是抑制或阻断Toll样受体2的激活或功能的 化合物。该“药剂”可以为抑制或阻断配体或结合化合物结合到Toll样受体2的拮抗剂化 合物。例如，该“药剂”可以为Toll样受体的结合抗原，其结合到Toll样受体2的胞外域 域，所述的药剂抑制TLR2特异性激活配体的结合。此外，该“药剂”可以为抑制在配体结合 后和/或Toll受体2激活后由Toll样受体2介导的胞内信号。该“药剂”还可调节Toll 样受体的表达。在某些实施方式中，该“药剂”可为对Toll样受体2具有结合特异性的结合化合 物。在某些实施方式中，该结合化合物选自，但是不限定于包含蛋白质、肽、模拟肽、核酸、 多核苷酸、多糖、寡肽、糖、脂质、小分子化合物和自然产生的化合物，如来源于植物的化合 物的组。在某些实施方式中，药剂是在配体结合位点之外的位点结合到Toll样受体2的结 合化合物，并且当其结合时，造成Toll样受体2的确认的改变，其导致对Toll样受体2激 动剂结合的抑制。根据一个实施方式，TLR2调节剂，包括如TLR2拮抗剂的TLR2结合剂，其以高亲和 力结合到TLR2，例如以至少约IO7M4的亲和力常数，典型地约IO8M4,更典型地，约Ι ΛΤ1至 IO10M-1或更强；并且调节，例如降低和/或抑制TLR2反应细胞和/或组织中的一种或多种 TLR2生物活性。在某些实施方式中，TLR2调节剂针对于在细胞或包含滑膜或局限于受体的关节区 的结缔组织的组织上表达的Toll样受体2。发炎的滑膜造成相关关节的损伤以及软骨和骨 的分解。可使用本专利技术的方法和组合物调节的，例如抑制或降低的，示例TLR2活性包括但 是不限定于以下一种或多种(i)抑制或阻遏TLR2表达，(ii)抑制TLR2配体结合，和(iii) 抑制或阻遏由TLR2介导的胞内信号。因此，在其它方面，本专利技术提供了调节(例如，调节一种或多种TLR2生物活性) TLR2反应细胞或组织中(例如，如内膜或内膜下层的滑膜的细胞，)功能的方法。该方法包 括将TLR2反应细胞和/或TLR2反应组织与TLR2调节剂接触，例如TLR2结合剂(例如人 TLR2活性或表达的拮抗剂)，以足够调节TLR2反应细胞或组织的功能(或该细胞或组织中的TLR2生物活性)的量。在一个实施方式中，接触步骤可以体外实现，例如在细胞裂解物 中或在重组系统中。或者，该受体方法可以在培养的细胞上进行，例如体外或离体。例如， 可体外培养细胞(例如，纯化的或重组细胞)，通过将TLR2调节剂添加到培养基来实现接 触步骤。一般，TLR2反应细胞是哺乳动物细胞，例如人细胞。在某些实施方式中，TLR2反 应细胞是滑膜细胞，例如内膜或内膜下层的细胞，或与其相关的细胞群。在其它的实施方式 中，可在受体中存在的细胞上进行该方法，例如作为体外实验方案的部分，或在动物受体中 (包括，例如人受体，或体外的动物样本)。体外实验方案可以是治疗性的或预防性的，炎症 样本可以为，例如EAE模型(样本)，或遗传改造样本(例如具有过量表达的TLR2或在TLR 受体中具有突变或缺失的动物样本)。对于体外方法，TLR2调节剂可以单独或与其它药剂 组合被给药于遭受如类风湿性关节炎的 自身免疫性疾病的受体，以足够调节受体中的一种 或多种TLR2介导的活性或功能的量。在一些实施方式中，可以在给药之前通过体外或离体 试验改变，例如降低或抑制一种或多种TLR2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降低涉及自身免疫性关节炎的发病或发展的Ｔｏｌｌ样受体２（ＴＬＲ２）表达的细胞或组织中的ＴＬＲ２的一种或多种生物活性的方法，所述方法包括：－将所述细胞或组织与ＴＬＲ２活性或表达的拮抗剂接触，以足够降低所述细胞或组织中的ＴＬＲ２的一种或多种生物活性的量。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】IE 2007-6-28 2007/0468;IE 2008-3-20 2008/0209;US 2一种降低涉及自身免疫性关节炎的发病或发展的Toll样受体2(TLR2)表达的细胞或组织中的TLR2的一种或多种生物活性的方法，所述方法包括-将所述细胞或组织与TLR2活性或表达的拮抗剂接触，以足够降低所述细胞或组织中的TLR2的一种或多种生物活性的量。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2表达细胞或组织是滑膜的细胞或组织。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述接触步骤发生在细胞裂解液、重组系统或培 养的细胞中。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述接触步骤发生在受体的细胞上。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述受体是具有自身免疫性关节炎或具有自身免 疫性关节炎风险的人类患者。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述自身免疫性关节炎是急性的或慢性的。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2是人或鼠TLR2。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂结合人TLR2。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂选自蛋白质、肽、模拟肽、核酸、 糖、脂质和小分子化合物组成的组。10.根据权利要求8所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂是对人TLR2具有结合特异性的 抗体分子。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗体分子是人的、人源化的、嵌合的、骆驼 的，或体外产生的人TLR2抗体。12.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体或人抗 体组成的组。13.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗体分子包括两个完整的重链，和两个完 整的轻链，或它们的抗原结合片断。14.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂结合到人TLR2的胞外域。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂结合到包含SEQID NO :2的 19至39，或538至549的氨基酸残基的TLR2上的抗原决定基。16.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂抑制编码TLR2蛋白的核酸的表达。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂选自反义分子、核酶、RNAi和 三螺旋分子组成的组。18.一种治疗和/或预防自身免疫性关节炎的方法，所述方法包括下列步骤-提供治疗有效量的调节Toll样受体2功能的药剂，和-将所述化合物给药于需要这种治疗的受体。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述调节TLR2功能的药剂是TLR2拮抗剂。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述TLR2拮抗剂结合到包含SEQID NO :2的 19至39，或538至549的氨基酸残基的TLR2上的抗原决定基。21.根据权利要求18至20中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效量给药于受体以 降低或抑制滑膜的TLR2表达细胞或组织中的一种或多种TLR2生物活性，从而治疗所述病22.根据权利要求18至21中任一项所述的方法，其中所述自身免疫性关节炎是急性的 或慢性的。23.根据权利要求19所述的方法，其中所述TLR2拮抗节结合到人TLR2的胞外域。24.根据权利要求18所述的方法，其中所述TLR2调节剂是选自蛋白质、肽、模拟肽、核 酸、糖、脂质和小分子化合物组成的组的结合化合物。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述结合化合物是抗体或来源于其的结合片断。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体或人抗 体组成的组。27.根据权利要求9所述的方法，其中所述的抗体分子是人的、骆驼的、或体外产生的 人TLR2抗体。28.根据权利要求25所述的方法，其中所述抗体选自以下组成的组(a)嵌合抗体或其片段；(b)合成抗体或其片段；(c)人源化抗体或其片段；(d)Fab 片段。29.根据权利要求25所述的方法，其中所述抗体是选自IgG、IgA、IgM和Ig...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克赫弗南，卢克奥尼尔，彼得麦古克，布瑞基欧，克里斯托弗劳克尔，
申请(专利权)人：奥普索纳医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：IE[爱尔兰]