酵母双杂交质粒的构建方法技术

技术编号:5294838 阅读:375 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种生物工程技术领域的酵母双杂交质粒的构建方法,以戊型肝炎病毒基因组RNA为模板设计引物并采用RT-nPCR方法扩增;将扩增产物进行双酶切,将双酶切得到的如Seq ID No.1所示的DNA片段插入pSOS质粒得到重组载体;制备酵母感受态细胞,在酵母感受态细胞中加入重组载体以及肝cDNA文库质粒DNA,经培养后筛选阳性酵母克隆;提取阳性酵母克隆中的质粒并转入大肠杆菌感受态细胞,筛选文库质粒后得到酵母双杂交质粒。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种酵母双杂交质粒的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,以戊型肝炎病毒基因组RNA为模板设计引物并采用RT-nPCR方法扩增;步骤二,将步骤一所得扩增产物进行双酶切,将双酶切得到的如Seq ID No.1所示的DNA片段插入pSOS质粒得到重组载体;步骤三,制备酵母感受态细胞,在酵母感受态细胞中加入步骤二所得重组载体以及肝cDNA文库质粒DNA,经培养后筛选阳性酵母克隆;步骤四,提取阳性酵母克隆中的质粒并转入大肠杆菌感受态细胞,筛选文库质粒后得到酵母双杂交质粒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:华修国沈权崔立张文
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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