蝇蛆提取物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种蝇蛆提取物，其主要成分为水溶性蛋白质，所述的蝇蛆提取物中水溶性蛋白质的质量百分含量为５０％－７０％；所述的水溶性蛋白质的分子量为２－１６ＫＤａ。该蝇蛆提取物不仅在体外对人原髓细胞白血病ＨＬ－６０细胞、人红白血病Ｋ５６２细胞、人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１、小鼠白血病Ｐ３８８细胞、人肺腺癌Ａ５４９细胞、人鼻咽癌ＣＮＥ细胞、人前列腺癌ＰＣ３细胞、人宫颈癌ＨｅＬａ具有明显的抑制作用；而且对小鼠Ｓ１８０肉瘤和小鼠Ｈｅｐｓ肝癌实体瘤有显著抑制作用，同时它还具有增强机体体液免疫作用。本发明专利技术还公开了蝇蛆提取物的制备方法，该方法操作简便、易于控制、成本低，适于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药用提取物领域，具体涉及一种蝇蛆提取物及其制备方法和用途。
技术介绍
家蝇幼虫，为丽蝇科大头金蝇(Chrysomiamegac印hala，Fab.)。作为药用，明朝李 时珍的《本草纲目》中就有记载“蛆，又称‘五谷虫’、‘罗仙子’、‘水仙子’，可治小儿疳热、为 治疳疾之良药。，，蝇蛆性寒无毒，是一种优质的动物蛋白源，不但蛋白质含量丰富，而且蛋白 质中氨基酸的组分也非常合理俱全，蝇蛆干粉中蛋白质的质量百分含量一般在62%左右， 脂肪的质量百分含量一般在10% -15%。据报道，任何种类的病原菌，在蝇蛆体内的存活时 间都不超过七天。因此，科学家认为，它极可能具有一种抵御病原菌感染的独特的免疫防疫 机制。恶性肿瘤是严重威胁人民生命和健康的多发病及常见病，全世界每年有700万人 发生肿瘤，500万人被肿瘤夺去生命，现肿瘤患者在1000万人以上。目前估计全国每年肿瘤 发病人数约160万，全国每年死于肿瘤病的人数已达130万人，并且仍有上升趋势，恶性肿 瘤疾病正在超过心血管疾病而成为人口死亡的第一原因。另外，肿瘤对病人造成的痛苦、对 家庭带来的精神及经济负担、对社会生产力造成的影响更是难以估计。因此，各国都高度重 视肿瘤的防治研究。当今，手术治疗、放射治疗、化学药物治疗仍然是治疗肿瘤疾病最常用最重要的三 大治疗手段，其中化学药物治疗虽然发展历史较短，却在肿瘤的综合治疗上发挥越来越重 要的作用。但是化学药物治疗存在着很大的缺点，这主要是现有的抗肿瘤药物对肿瘤细胞 的选择性抑制不强、全身用药毒性较大且大部分具有免疫抑制作用，这在一定程度上限制 了它的使用。随着我国加入WT0，西药将面临着严峻的挑战，因受知识产权的保护，西药仿制 将受到限制，而研究开发拥有自主知识产权的中药产品将是我国医药产品发展的关键。同 时，研究开发高效低毒的天然抗肿瘤药物也是紧迫而重要的全球性课题。2003年集美大学邱晓燕等研究了舍蝇抗菌肽的提取及其对肿瘤细胞生长的抑制 作用，表明提取的舍蝇抗菌肽能有效地抑制人胃癌细胞MGC80-3和BGC-823、人乳腺癌细胞 MCF-7及人肺癌细胞SPC-A-I的体外增殖，并且呈浓度依赖关系(中华卫生杀虫药械，2003， 9(1) :13-16)。2006年天津科技大学曹小红等对工程蝇蛆体内活性物质及体外抗肿瘤作用进行 了研究，结果表明工程蝇蛆体内活性物质在体外对K562细胞具有抑制生长的作用(中国食 品学报，2006，6(1) :316-319)。2008年浙江省医学科学院徐水祥等研究了大头金蝇蛆提取物对白血病和肺癌细 胞的抑制作用。对大头金蝇蛆干粉提取物不饱和脂肪酸、粗脂肪分别作体外抑瘤试验，观察 到了不饱和脂肪酸、粗脂肪对人原髓细胞白血病HL-60有明显的增殖抑制作用(药物生物 技术，2008，15(4) :284-286)。以上文献对蝇蛆提取物的研究均停留在体外细胞水平，且大多是提取蝇蛆中的抗菌肽、脂肪酸等，未对蝇蛆中的其他成分进行进一步的研究。
技术实现思路
本专利技术提供了一种对多种癌细胞具有显著抑制作用的蝇蛆提取物。本专利技术还提供了一种蝇蛆提取物的制备方法，该方法操作简单、易于控制、成本 低，适于工业化生产。一种蝇蛆提取物，其主要成分为水溶性蛋白质，所述的蝇蛆提取物中水溶性蛋白 质的质量百分含量为50% -70% ；所述的水溶性蛋白质的分子量为2-16千道尔顿(KDa)。为了达到更好的专利技术效果，优选所述的水溶性蛋白质主要由如下质量百分比的氨基酸组成天门冬氨酸 6. 3% -7. 2%、苏氨酸 3. 6% -4. 0%、丝氨酸 3. 6% -3. 9%、谷氨酸 14. 5% -15. 5%、甘氨酸 5. 5% -6.0%、丙氨酸 17.8% -19. 6%、胱氨酸 1.6% -1. 8%、缬氨酸 5. 6% -6.5%、甲硫氨 酸 2. 3% _2.4%、异亮氨酸 3. -3.8%、亮氨酸 4. 2% -5. 2%、酪氨酸 2. 5% -2. 7%、苯丙 氨酸2.6% -3. 1%、赖氨酸8.4% -8.9%、组氨酸3. 4% _3.8%、精氨酸1. 1% -1. 3%和脯 氨酸 4. 2% -4.8%。所述的蝇蛆提取物中糖的质量百分含量为0. 5-2. 0%。所述的蝇蛆提取物的制备方法，包括步骤(1)粉碎将蝇蛆漂洗干净后干燥、粉碎成蝇蛆粉；(2)脱脂向步骤(1)得到的蝇蛆粉中加入蝇蛆粉1-5倍体积量的石油醚，室温浸 泡6-12小时，除去石油醚，得到脱脂后的蝇蛆粉；(3)超声水提向步骤(2)得到的脱脂后的蝇蛆粉中加入脱脂后的蝇蛆粉5-10倍 体积量的水超声提取1-3次，每次超声10-30分钟，过滤；滤渣再用滤渣4-8倍体积量的水 超声提取1-3次，每次超声10-30分钟，过滤；合并二次滤液；经离心、超滤和冷冻干燥，得 到蝇蛆提取物。所述的蝇蛆提取物可用于制备治疗白血病、肝癌、肺腺癌、鼻咽癌、前列腺癌、宫颈 癌等中的一种或多种的药物，如可制备用于抑制人原髓细胞白血病HL-60细胞、人红白血 病K562细胞、人肝癌SMMC-7721细胞、小鼠白血病P388细胞、人肺腺癌A549细胞、人鼻咽 癌CNE细胞、人前列腺癌PC3细胞、人宫颈癌HeLa细胞、小鼠S18tl肉瘤和小鼠Ifeps肝癌实 体瘤等中的一种或多种的药物。所述的药物的剂型优选为注射剂，给药途径最佳为静脉注 射。所述的蝇蛆提取物还可以制备用于增强机体体液免疫作用的药物。所述的药物的 剂型优选为注射剂，给药途径最佳为静脉注射。所述的蝇蛆提取物还可以用于制备含有蝇蛆提取物的药物组合物。所述的药物组 合物的剂型优选为注射剂，给药途径最佳为静脉注射。本专利技术所述的蝇蛆一般可选用采用中国专利技术专利ZL200510060277. 4中具有抗肿 瘤生物活性蝇蛆的养殖方法养殖的蝇蛆。与现有技术相比，本专利技术的优点在于本专利技术的蝇蛆提取物，具有高效低毒、抗肿瘤、增强机体体液免疫的作用。这种 蝇蛆提取物不仅在体外对人原髓细胞白血病HL-60细胞、人红白血病K562细胞、人肝癌4SMMC-7721、小鼠白血病P388细胞、人肺腺癌A549细胞、人鼻咽癌CNE细胞、人前列腺癌PC3 细胞、人宫颈癌HeLa具有明显的抑制作用；而且对小鼠S180肉瘤和小鼠Ifeps肝癌实体瘤 有显著抑制作用，同时它还能够增强机体体液免疫作用。本专利技术制备方法操作简便、易于控制、成本低，适于工业化生产，提取得到的蝇蛆 提取物高效无毒，可用于治疗肿瘤患者，极具开发潜力。附图说明图1为实施例1制备的蝇蛆提取物、蝇蛆粉以及蛋白分子量标准品(Mark)的分子 量的SDS-PAGE电泳图；图2为光学显微镜观察不同浓度实施例1制备的蝇蛆提取物引起人原髓细胞白血 病HL-60细胞凋亡形态学变化；其中，A表示对照组细胞；B表示蝇蛆提取物0. 056mg/ml处 理组细胞；C表示蝇蛆提取物0. 167mg/ml处理组细胞；D表示蝇蛆提取物0. 500mg/ml处理 组细胞；标尺(Bar) = 50 μ m ；图3为光学显微镜观察不同浓度实施例1制备的蝇蛆提取物引起人肝癌 SMMC-7721细胞凋亡形态学变化；其中，A表示对照组细胞；B表示蝇蛆提取物0. 056mg/ml 处理组细胞；C表示蝇蛆提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蝇蛆提取物，其特征在于，所述的蝇蛆提取物的主要成分为水溶性蛋白质，所述的蝇蛆提取物中水溶性蛋白质的质量百分含量为５０％－７０％；所述的水溶性蛋白质的分子量为２－１６千道尔顿。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：彭小英，马臻，郑晓亮，屠凌岚，颜冬梅，洪艳，沈正荣，陈建平，
申请(专利权)人：浙江省医学科学院，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]