【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于组织芯片制作
,涉及一种制作一次成型组织芯片的方法及应用于该方法中的模具。
技术介绍
组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray,TMA),是将数十至上千个小组织整齐地排列在一张载玻片上而制成的组织切片。它是继基因芯片、蛋白质芯片之后出现的又一种重要的生物芯片,主要用于研究同一种基因或蛋白质分子在不同细胞或组织中表达的情况,具有高通量、大样本、省时快速等优点。自1998年Kononen等提出组织芯片的明确概念并证实其作用以来,组织芯片技术发展迅速。该技术已应用于人类基因组研究、医学诊断和基础研究,尤其是在肿瘤基因筛选、肿瘤抗原筛选及寻找与肿瘤发生、发展及预后相关的标记物等方面显示了巨大的潜能。组织芯片具有以下优点:(1)组织芯片是一种高通量、大样本技术,一次实验操作可以完成传统实验方法的几十次甚至上千次的操作,显著提高病理组织学研究的效率,省时快速;(2)耗材少,所需费用是传统病理学方法的1/10~1/100;(3)含生物学信息量大,有助于进行大样本的回顾性研究。(3)组织芯片实验条件比较一致,有利于设计实验对照组;(4)可以减少传统实验方法中批内和批间误差;(6)组织芯片的图像数据可以采用自动化分析方法,便于数据采集、储存和检索;(7)一块组织芯片蜡块含有几十种甚至上千种组织标本的信息,便于存档蜡块的保存。组织芯片应用范围广,可用于医学基础研究及临床研究,还可用于分子诊断、治疗靶点定位、抗体或新药筛选以及基因或蛋白表达的原位分析等。组织芯片在肿瘤学研究中应用广泛。组织芯片的应用前景非常广阔, ...
【技术保护点】
一种制作一次成型组织芯片的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)、组装模具:将预先设计的模具部件--阵列孔铜板(1)、阵列针铜板(2)和L形铜垫片(3)组装起来,阵列孔铜板(1)上的阵列通孔(4)形成阵列模腔(7);(2)、取芯和填充:用取样器在预先制作的石蜡包埋组织标记部位打孔取出组织芯,并按预先准备的组织芯片设计表一一对应填入阵列模腔(7)中;(3)、预热和注蜡:将模具中的承蜡槽(6)放在阵列孔铜板(1)上,使阵列模腔(7)位于承蜡槽(6)内,再将模具整体放入温箱预热,预热后取出模具,马上注入68~72℃的石蜡,注入的量不超过塑料包埋盒的承托面,在石蜡微凝时顶起组织芯,再放入塑料包埋盒,再注满68~72℃的石蜡;(4)、拆卸:将石蜡快速冷却,在完全冷却后,在烤片台上加热底座和四周即可取下模具,至此,组织芯片蜡块即可制作完成;(5)、切片与染色:将制成的组织芯片石蜡块置于零下20℃冰箱内16~24分钟,取出后切成4μm厚组织芯片。
【技术特征摘要】
1.一种制作一次成型组织芯片的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)、组装模具:将预先设计的模具部件——阵列孔铜板(1)、阵列针铜板(2)和L形铜垫片(3)组装起来,阵列孔铜板(1)上的阵列通孔(4)形成阵列模腔(7);(2)、取芯和填充:用取样器在预先制作的石蜡包埋组织标记部位打孔取出组织芯,并按预先准备的组织芯片设计表一一对应填入阵列模腔(7)中;(3)、预热和注蜡:将模具中的承蜡槽(6)放在阵列孔铜板(1)上,使阵列模腔(7)位于承蜡槽(6)内,再将模具整体放入温箱预热,预热后取出模具,马上注入68~72℃的石蜡,注入的量不超过塑料包埋盒的承托面,在石蜡微凝时顶起组织芯,再放入塑料包埋盒,再注满68~72℃的石蜡;(4)、拆卸:将石蜡快速冷却,在完全冷却后,在烤片台上加热底座和四周即可取下模具,至此,组织芯片蜡块即可制作完成;(5)、切片与染色:将制成的组织芯片石蜡块置于零下20℃冰箱内16~24分钟,取出后切成4μm厚组织芯片。2.根据权利要求1所述的制作一次成型组织芯片的方法,其特征在于,在所述的步骤(3)中,模具放入温箱预热直至蜡柱微微熔化——表面发亮即可;将模具自温箱取出,马上注入68~72℃石蜡后,观察蜡柱周围开始凝固——泛白,就可取出两块L形铜垫片(3),将列阵孔铜板均匀下压,即将组织芯均匀顶起,待承蜡槽(6)内石蜡凝固不再透明后就可放入塑料包埋盒。3.根据权利要求1所述的制作一次成型组织芯片的方法,其特征在于,在所述的步骤(3)中,准备1mm厚的L形铜垫片(3)和0.2mm厚的L形铜垫片(3),在填充好组织芯后撤去的1mm厚的L形铜垫片(3),换以0.2mm的L形铜垫片(3),再将模具整体放入温箱预热,直至蜡柱微微熔化——表面发亮即可;将模具自温箱取出,马上注入68~72℃的石蜡,在注蜡后不等石蜡凝固,马上均匀用力按下阵列孔铜板(1),顶起组织芯,待承蜡槽(6)内石蜡凝固不再透明后,放入塑料包埋盒。4.根据权利要求1所述的制作一次成型组织芯片的方法,其特征在于,在所述的步骤(3)中,准备1mm厚的L形铜垫片(3)和0.2mm厚...
【专利技术属性】
技术研发人员:林爱芬,包卫光,颜卫华,
申请(专利权)人:浙江省台州医院,
类型:发明
国别省市:33[中国|浙江]
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