两头尖中两种单体化合物的分离纯化方法技术

本发明专利技术涉及天然药物化学技术领域，具体设计一种从两头尖中分离纯化高纯度的单体化合物竹节香附素Ａ和两头尖皂苷Ｄ的方法。国内外多采用硅胶柱层析等传统方法来分离纯化，但分离效果均不理想。本发明专利技术先用甲醇水溶液回流或冷浸法得到两头尖粗提液，浓缩至总体积的１／１０－６／１０，低温放置，高速离心，将离心所得沉淀物用高速逆流色谱分配溶剂溶解，收集分离物，将不同成分分别收集、浓缩，乙酸乙酯－乙醇重结晶，干燥得到９８％以上的竹节香附素Ａ和两头尖皂苷Ｄ。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然植物提取
，设计一种从两头尖中用高速逆流色谱法同时 分离纯化竹节香附素A和两头尖皂苷D。
技术介绍
两头尖系毛茛科(Ranunculaceae)多被银莲花Anemone raddeana Regel的根茎。 产于东北地区及山东等地，以吉林省产量最大。该药首载于明朝刘文泰所著《本草品汇精 要》中，临床上有“祛风除湿，消痈肿”的作用，用于“风寒湿痹、四肢拘挛、骨节疼痛、疮痈溃烂”等症。竹节香附素A(Anemodeanin A)和两头尖皂苷D (raddeanosede D)是两头尖的主 要有效成分，均为三萜苷类化合物。具有较强的生理活性。林小钦等将不同质量浓度的竹 节香附素A与H印G2细胞共同培养，采用MTT比色法及细胞集落形成法检测竹节香附素A 对H印G2细胞生长、增殖的影响。结果竹节香附素A各剂量的作用与未处理组相比，在各时 间点均有显著差异，从而得到结论竹节香附素A对IfepG2细胞增殖有明显抑制作用，在一 定范围内随着试药质量浓度的升高和作用时间的延长而增强。两头尖皂苷D具有较强的抗 癌活性。总皂苷能抑制癌的形成。皂苷D、F、H对人体致病的乙型链球菌、绿本文档来自技高网...

【技术保护点】
两头尖中两种单体化合物的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：１）取两头尖根茎，粉碎后用甲醇水溶液回流或冷浸提取，合并提取液，浓缩至总体积的１／１０－６／１０，低温放置，高速离心；２）将离心所得沉淀物采用高速逆流色谱仪，色谱仪分离系统由二氯甲烷、甲醇、正丙醇和水组成，其体积比为７－１０∶１２－１５∶０．５－２∶４－８；３）将溶剂系统置于分液漏斗中，充分振摇后静置分层，取上相作为固定相，下相作为流动相，将步骤１）所得沉淀物溶于上下相的混合溶剂中，再使色谱柱中充满固定相，使主机转动，泵入流动相，由进样阀进样，根据检测器谱图接收目标成分。４）将两个目标成分分别合并，浓缩、用乙酸乙酯－乙醇（２∶１）混...

【技术特征摘要】
1.两头尖中两种单体化合物的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤1)取两头尖根茎，粉碎后用甲醇水溶液回流或冷浸提取，合并提取液，浓缩至总体积的 1/10-6/10，低温放置，高速离心；2)将离心所得沉淀物采用高速逆流色谱仪，色谱仪分离系统由二氯甲烷、甲醇、正丙醇 和水组成，其体积比为7-10 12-15 0.5-2 4-8 ；3)将溶剂系统置于分液漏斗中，充分振摇后静置分层，取上相作为固定相，下相作为流 动相，将步骤1)所得沉淀物溶于上下相的混合溶剂中，再使色谱柱中充满固定相，使主...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏刘花，
申请(专利权)人：南京泽朗农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]