用于哺乳动物的营养组合物的制造方法技术

本发明专利技术涉及含Ｌ－谷氨酰－Ｌ－谷氨酰胺的哺乳动物用营养组合物。（*该技术在2009年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于哺乳动物的营养组合物，更具体地说涉及一种含有L-谷氨酰基-L-谷氨酰胺的营养组合物。人类及其他哺乳动物为了维持生命活动，必须经常摄取蛋白质。蛋白质在消化系统被转变为氨基酸，从而在体内被用于生长、生育、繁殖及同化作用。但是，在使消化道机能变低的手术后以及由于厌食症、饥饿等造成的营养失调的情况下，补充营养是必要的，但通常的食物形式的养分往往难以吸收。另外，在激烈的体力劳动和运动过程中或之后，由于代谢机能旺盛，出汗造成的氮损耗非常多，所以也有必要补充营养。在这样情况下，必须以易吸收的形式摄取大量的蛋白质和氨基酸，以尽量减小消化器官负担。以往的营养补充方法，是用氨基酸静脉注射和点滴，以及将含有肉提取物、酪蛋白、蛋清等优质蛋白质或者氨基酸、肽等的营养组合物经口或经肠投与。但是，有些氨基酸由于其溶解度低及不稳定等原因，而限制了它们的使用。特别是L-谷氨酰胺更是如此，处于手术后非正常状态下的患者的肌肉中的L-谷氨酰胺显著变低，因而认为必须对此进行补充，但是由于L-谷氨酰胺在溶液状态下不稳定，且其热稳定性低，因此不能使加热灭菌调制的公知营养组合物中含有L-谷氨酰胺类物质。为了使在溶液状态下不稳定的L-谷氨酰胺作为哺乳动物用营养组合物来供给。已知的方法有将L-谷氨酰胺二肽化，使其以α-L-天冬氨酰-L-谷氨酰胺形式存在的营养组合物(特开昭62-151156)，以及以甘氨酰-L-谷氨酰胺形式存在的L-谷氨酰胺营养组合物(特开昭56-140923)等。另外，在(ClinicalScience)75，463(1988)上刊载了关于L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在血浆中的作用及向内脏器官中的渗透的报告。虽然含有α-L-天冬氨酰-L-谷氨酰胺及甘氨酰-L-谷氨酰胺的营养组合物对L-谷氨酰胺的不稳定性有了很大的改进，但是在灭菌条件下的稳定性及在生体内的吸收和用效率等方面还有许多必须改善的地方。另外，不是摄取L-谷氨酰胺，而是摄取含L-谷氨酰胺的二肽的情况下，在生物体内需将这些二肽水解为氨基酸。以往用的二肽，虽然改进了L-谷氨酰胺的热不稳定性，但是在生物体内吸收、利用效率方面还有待进一步改进。本专利技术人发现使用L-谷氨酰-L-谷氨酰胺来代替以往使用的含L-谷氨酰胺的二肽，与以往的营养组合物相比，改善了在生物体内的吸收、利用效率等，因此完成了本专利技术。本专利技术提供了一种含有L-谷氨酰-L-谷氨酰胺的营养组合物。以下将对本专利技术进行详细说明。含有L-谷氨酰-L-谷氨酰胺的营养组合物主要作为口服或内服营养给物来使用。在口服投与的情况下，为了获得营养平衡，可以配合易消化的碳水化合物、脂肪、维生素、矿物质等营养性添加物，另外为了改善口服用时的风味还可以配合加味料、增甜料、香料、色素等调味剂、除臭剂以及外观改善剂等。具体的营养性添加物的例子为淀粉、糊精、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、脱脂乳、卵黄粉末、卵黄油、麦芽抽出物、中等链长脂肪酸、维生素A、硫胺素、核黄素、维生素B6、菸酸、泛酸、维生素B12、L-抗坏血酸、维生素E、食盐、氯化钾、氯化钙、乳酸铁等。将以上各成分进行混合、加水、分散、并以液状、糊状密封在防湿性袋、瓶、缸中，加热灭菌后保存或流通使用。还可以将各成分进行充分混合，以粉末状保存、运输，使用时再加水分散。现在，由于L-谷氨酰-L-谷氨酰胺热稳定性高，且可以溶液状态下长期稳定存在，因此可以随便进行加热调理、灭菌等操作。对于补充谷氨酰胺，最好的营养组合物的一例是含有0.0005～30%(重)的L-谷氨酰-L-谷氨酰胺、并含有氨基酸或蛋白质的水解物及上述营养性添加物的组合物(如氨基酸输液、营养补充用口服营养剂、冻胶状的营养制剂等)。作为含有L-谷氨酰酰-L-谷氨酰胺的氨基酸输液的成分，可具体例举以下。单位为mg/dl。L-异亮氨酸160～1070L-亮氨酸180～1720L-赖氨酸盐酸盐180～2400L-苯基丙氨酸130～1400L-蛋氨酸50～1200L-苏氨酸80～720L-色氨酸30～350L-缬氨酸70～1130L-精氨酸盐酸盐120～1500L-组氨酸盐酸盐50～900谷氨酸200～2500L-丙氨酸70～1130L-天氨氨酸钠0～1300L-巯基丙氨酸0～150L-谷氨酸钠0～1300L-谷氨酰-L-谷氨酰胺1～5000L-脯氨酸90～1080L-丝氨酸60～820L-酪氨酸3～90L-谷氨酰-L-谷氨酰胺有α和γ型，但最好使用γ型。γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺与L-谷氨酰胺相比，不仅热稳定性高，而且是γ-谷氨酰-转移酶和γ-谷氨酰-环转移酶的有效的基质，所以可推测它在生物体内能被有效利用。将L-谷氨酰-L-谷氨酰胺作为营养组合物使用时，需在生物体内水解成氨基酸。Mattews.Adibi曾经指出，由二或三肽生成的氨基酸的吸收速度比同样组成的氨基酸混合物的吸收速度要快。如上所述，由于生物体内存在γ-谷氨酰-转移酶及γ-谷氨酰-环转移酶，且γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺是其有效基质所以可以认为它在生物体内易于被水解及吸收。因此，在需要急速营养补充的生理性或病理性状态下，例如激烈的体力劳动、运动后体力大量消耗的时候或者手术后等需要早期体力恢复的情况下，γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺就可以作为速效营养补充剂使用。下面，对γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺及各种含L-谷氨酰胺的二肽在人及鼠血浆中的消长(标准系)、在有γ-谷氨酰-转移酶(γ-GTP)存在下的稳定性、投给鼠时其在血中的消长及对内脏器官中的谷氨酰胺水平的影响进行说明。1.二肽在人血浆中的水解分别向由人体采出，调制的0.75ml血浆中，加入下述表1所示的二肽以便使其达到10mM，并使其在37℃下反应30分钟。反应终了后的二肽的残余率列于表1中。表1二肽残余率%γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺99L-丙氨酰-L-谷氨酰胺74L-天冬氨酰-L-谷氨酰胺58甘氨酰-L-谷氨酰胺84与先有技术采用的二肽相比，γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺在人血浆中几乎不分解，表示出高稳定性。2.由γ-GTP造成的二肽的水解在Tris-HCl缓冲液(50mMPH7.0)中分别将5mM的表1所列的二肽溶解，然后加入由猪肾制备的γ-GTP，在37℃下反应120分钟。γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺几乎是100%分解，而其它的二肽则完全没有分解。3.二肽在鼠血浆中的水解分别在从CH/He鼠(6周龄、雄性、体重20g)提取，制备的血浆中(0.05ml)加入表2所列的二肽，以便使其达到3.13mM，在37℃下分别反应2分钟、5分钟、10分钟、20分钟。反应终了后的二肽残余率列于表2。实验使用了5只鼠，结果为平均值。表2残余率(%)二肽251020分γ-L-谷氨酰-100100100100L-谷氨酰胺L-丙氨酰-L-87622411谷氨酰胺与先有技术的二肽相比，γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺在鼠血浆中完全不分解，表现出了高稳定性。4.投与鼠时，谷氨酰在血中的变化通过C3H/He鼠(6周龄，雄性，体重20g)的尾静脉投与γ-L-谷氨酰-L-谷氨酰胺或者L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(250μmol/1kg体重)，定时采血。将血中二肽及谷氨酰胺随时间的变化表示于附图说明图1中。另外，一组实验用了5只鼠，结果用平均值±平均标本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有Ｌ－谷氨酰－Ｌ－谷氨酰胺的营养组合物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：原孝博，古川忠康，
申请(专利权)人：协和发酵工业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]