通过把抗原与一附加的组分一起掺入到一脂质体中，可以提高靶抗原的抗体反应，所述组分含有至少一个Ｔ辅助淋巴细胞识别部位。所述脂质体包括各种类脂材料。所述抗原和含有上述组分的Ｔ辅助淋巴细胞识别部位二者通过疏水相互作用或共价键附着到一个类脂上而与脂质体缔合。（*该技术在2011年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及通过把靶抗原与一附加组分一起掺入一脂质体，从而提高对靶抗原的抗体反应，其中该组分至少含有一T辅助淋巴细胞识别部位。一个疫苗抗原通过诱导生物产生免疫反应来使该生物具有对感染的免疫性，因此，抗原作用的大小取决于它们诱导的免疫反应强度的高低。现有强度可变的固有的强和弱的抗原。此外，抗原可以分类为胸腺(“T”)相关或T独立抗原，这基于它们是否能够从T细胞引发出辅助活力。这种T细胞活力与IgG和IgA类抗体的产生有关;T独立抗原诱导IgM抗体的产生，但不诱导B细胞，以控制IgG或IgA抗体的合成与否。产生IgM类免疫球蛋白在实验动物和人类中是暂时的反应，仅持续几个月;但是产生IgG和IgA类抗体通常持续几年。因此，引出对特殊抗原的T相关反应是有益的。糖类或多糖类基抗原是T独立抗原，并且仅限于用作儿童疫苗。同样许多表示抗体识别部位的多肽是T独立抗原，因此，同样也不能产生对一种疫苗所希望的IgG和IgA抗体反应。人们已经知道，通过把抗原接合(共价附着)到一个提高免疫反应的辅助蛋白质上，一个较强的抗体反应可能引出一弱抗原。例如美国专利4761283表明，通过把该抗原接合到一细菌辅助蛋白上，对特定的细菌胶囊状聚合物的弱的产生免疫性的反应被提高，细菌辅助蛋白本身诱导一抗原反应。用一毒素作辅助蛋白是人所共知的，例如，用白喉类毒素。但是，用这样一个有毒的辅助蛋白会引起一个问题，因为该辅助蛋白的内源毒性可能限制抗原-辅助蛋白接合体的剂量，从而限制了它的有效性。生物对引起抗原决定部位抑制效应的辅助蛋白的早期免疫接种作用会抑制对靶抗原的免疫反应，这也是众所周知的。当宿主生物准备对辅助蛋白反应时，该生物将在它可能开始对靶抗原免疫反应前清除该靶抗原-辅助蛋白接合体。这些以前应用的接合体是通过把抗原共价连接到载体辅助蛋白上来形成的。免疫反应的提高对T独立抗原是特别重要的，T独立抗原可以接合到一包含至少一个T辅助细胞识别部位的肽上，从而得到一个对T独立抗原的T相关反应。但是，现在应用的共价连接接合体效果有限，这是由于共价结合过程中带来的结构性的限制(即构象变化，结合部位潜在的不可及度，以及无法改变这些组分比率)。此外，这些接合体可能存在剂量上的限制以及抗原决定部位抑制效应。脂质体是由类脂分散在水介质中形成的膜状的泡。制备脂质体的方法对该领域的普通技术人员来说是公知的，并且作为例子在作为参考文献列出的下述专利(而不限于这些专利)中被加以说明美国专利4565696和4235871。脂质体具有对一活体内载体所需的几个性质，如低毒性，低免疫原性，并具有生物降解能力。它还表明在实验动物中脂质体可提高对抗原的抗体反应。抗原或者被俘获在脂质体的水溶性的部分，或者与双层相缔合。例如，美国专利4565696描述了对把免疫原共价连接到脂质体的表面双层上，并因此加强该免疫反应的步骤。本专利技术涉及提供通过把该抗原与至少一个辅助肽(如至少包含一T细胞识别部位的辅助肽)一起掺进一种脂质体制剂中去，从而提高对一靶抗原的抗原反应。本专利技术可用于提高所引出的对任何抗原的抗原反应;包括(但不限于)聚多糖类抗原，如流感嗜血杆菌(Hemophilus influenza)、脑膜炎双球菌(Meningococci)、肺炎双球菌(Pneumocicci)和链球菌(Streptococci)，以及肽类，如肝炎B表面蛋白，HIV表面蛋白，流行性感冒病毒蛋白，副流行感冒病毒肽类或血球凝集素，以及霍乱表面糖蛋白。通过把靶抗原附着到包含一活性官能度的许多种不同的类脂材料之一上来，可以把靶抗原(人们希望提高对它的免疫反应)掺入到脂质体泡中去。这些类脂材料包括磷脂酰醚或磷脂酰酯(例如磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱)、甘油酯类、脑苷脂类、神经节苷脂类、神经鞘磷脂类、以及类固醇类(例如，胆固醇)等等。美国专利4565696和4235871公开了用于制备脂质体的其它类脂材料。另一方面，如果靶抗原带有一亲脂基团的话，该靶抗原可以通过疏水力掺入到脂质体泡中去，见美国专利4448765，或者，一疏水基团可附着到该抗原上。也可用共价相互作用或疏水相互作用使肽掺入进去，例如，流行性感冒病毒的血球凝集素(HA)蛋白是由两个多肽链(HA1和HA2)组成。HA2多肽链包含一个靠近该多肽羧基末端的疏水氨基酸的序列，并至少包含一个T辅助细胞识别部位。这样，HA2多肽链可以通过贯通膜疏水区域掺入到脂质体中去。美国专利4448765描述了流行性感冒病毒亚单位掺入到脂质体中去，该专利在此列入以供参考。为了促进与脂质体膜的缔合，疏水组分可以交替地加到该辅助肽中去，或者该辅助肽可以直接共价地附着到包含一活性官能度的类脂材料上。本专利技术与以前所用的抗原载体接合体(例如在美国专利4761283中所述的接合体)相比，有几个优点。在共价结合的接合体中，由于共价键的作用，在载体蛋白构象中的变更和在抗原构象中的变更都是可能的。在本专利技术中这个缺点可以克服，在此，靶抗原和辅助肽与脂质体缔合。本专利技术克服了与已有技术中存在的毒性和抗原决定部位抑制效应。本专利技术使用的是无毒类脂，并且最好用离析出来的、无毒的含肽的T辅助部位。本专利技术比以前所用的接合体的优越之处还在于它考虑到了对抗原密度以及对靶抗原对辅助肽的比的改善，并且允许多于一个携带辅助肽的T辅助细胞识别部位的掺入。这些因素可能影响对靶抗原所产生的特定抗体的数量。当接合体由合成法制成时，因为两种组分一定是由共价键结合，这些因素不容易控制，导致对因素的数目和类型的实际限制，当保持靠近识别部位时，这些因素结合在一起。此外，本专利技术相对于接合体有优点，因为现已表明抗原掺入到脂质体中可以提高抗体的产量。这样，本专利技术用脂质体的这个性质附带地增进了对一给定抗原(并且特别是对不能产生足够抗体的弱抗原)抗体的产量。本专利技术的脂质体泡提供了一种设计合成疫苗的新方法。靶抗原和辅助肽(或肽)的多重复制可通过一个快速简便的方法来实现。除了能有效地提高对靶抗原的免疫接种效果之外，这个方法还易于试验抗原和辅助肽。例如，本专利技术提供了一简单的载体，用于比较各种T辅助肽增进对一给定抗原的免疫原反应的能力。这样，本专利技术也提供了一个用于探测免疫反应机理的有用载体。根据下面本专利技术的现在优选的实施例的说明，其它和进一步的实施例、特点和优点将是明显的。本专利技术的疫苗组成可以用于增进对任何靶抗原，特别适于T独立抗原的免疫反应。本专利技术以DNP-CapPE为例，它作为T独立抗原，对之人们已进行了充分的研究。但是，对本领域普通技术人员来说，本专利技术对任何抗都显然适用。在本专利技术优选的实施例中，一合成的疫苗被合成，它诱导对一T相关抗原的T相关免疫反应。靶抗原与包含一T细胞识别部位的一个辅助肽或多个肽一起掺入到脂质体的制剂中。含有一T细胞识别部位的任何肽都可以用作辅助肽，例如，天然的或已解毒的来处类毒素(如流感、破伤风、白喉绿浓杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、百日咳和大肠杆菌)的肽。可以用一个简单的试验来确定一候选肽是否包含一T细胞识别部位。这个肽与一种仅包含一B细胞抗决定部位的抗原(如DNP-CapPE抗原)一起被掺入到脂质体制剂中。在宿主生物中如有对所得到的脂质体制剂的IgG反应，那么这个肽就有T细胞识别部位，并可用作本专利技术的辅助肽。流感血球本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于抗原的脂质体免疫原载体，包括：类脂、靶抗原和至少一个具有至少一个Ｔ辅助细胞识别部位的辅助肽。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：霍华德R西克斯，纳塔莉加肯，
申请(专利权)人：研究发展基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。