治疗玻璃体内出血的酶学方法与组合物技术

一种加速从哺乳动物眼睛的玻璃液出血清除血液的方法，所述方法包括步骤： 用所述玻璃液与一定量的酶接触，该酶有加速从玻璃液出血清除血液的活性。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般涉及用于人类或其他哺乳动物眼睛治疗用药的酶制剂，并特别涉及a)利用一种或多种酶加速从哺乳动物眼睛玻璃体出血清除血液的方法和b)用于眼科给药的一种改进的透明酯酸酶。
技术介绍
i.人类眼睛的解剖在人类，眼睛的解剖包括位于晶状体之后几乎占眼球腔五分之四的“玻璃体”。该玻璃体由凝胶状物质，即所谓的玻璃液形成。一般说，正常人眼睛的玻璃液含约99％的水和1％的大分子物质包括胶原，透明酯酸，可溶性糖蛋白，糖和其他低分子量代谢物。视网膜基本上是眼球后表面内侧形成的一层神经组织。视网膜由称做脉络膜的一层细胞所包绕。视网膜可被分成a)参与视觉机制的光学部分和b)不参与视觉机制的非光学部分。视网膜的光学部分含视杆和视锥，它们是视觉效应器。许多动脉和静脉在视网膜的中心进入视网膜，并向外展开以提供血液循环到视网膜。玻璃体的后部直接与视网膜相接触。原纤维束网络从视网膜延伸并分布或深入玻璃体以至使玻璃体与视网膜相接。ii.玻璃体内出血的病因，治疗及临床后遗症糖尿病视网膜病变，创伤和其他眼科疾病有时导致视网膜血管破坏或渗漏结果出血到眼睛的玻璃液中(即“玻璃体内出血”)。这种玻璃体内出血一般表现为玻璃液浑浊或不透明。玻璃体内出血有时但不总是伴随视网膜的撕裂或分离。在玻璃体内出血伴随视网膜撕裂或分离的情况，重要的是应该对这种视网膜撕裂或分离做及时诊断和手术修复。未能及时诊断和修复视网膜撕裂或分离则可使该撕裂或分离区域的视网膜光感受器细胞形成坏死。这种视网膜光感受器细胞的坏死可导致视觉丧失。而且，视网膜分离持续未修复状态一段时间可导致进一步玻璃体内出血并/或在出血部位形成纤维组织。这种纤维组织形成可导致玻璃体与视网膜间的不良粘连。修复视网膜撕裂或分离所使用的一般手术方法要求外科医师能透过玻璃液观察，以显现视网膜受损区(即“视网膜经玻璃体检查”)。当发生玻璃体内出血时，玻璃体内存在的出血血液会使玻璃体变浑浊以至妨碍外科医师透过玻璃体观察视网膜。这种玻璃体出血性浑浊可能需要6-12个月或更长的时间才变清澈到足以进行视网膜的经玻璃体检查。然而由于对视网膜撕裂或分离的延误诊断或治疗可产生潜在并发症，等待发生如此出血血液的自然清除一般是不期望的。而且，甚至在无视网膜撕裂或分离相伴随的玻璃体内出血时，通常难以确认并未发生视网膜撕裂或分离，因为玻璃体出血性浑浊使医生不能进行视网膜常规眼底镜检查。而且，玻璃体内存在出血可明显损伤患者受累眼睛的视力，并且这种出血造成的损害会持续到所述出血血液被基本或完全清除。。因此，玻璃体内存在出血血液会引起多种临床问题，包括a)不能肉眼检查和诊断出血部位和/或视网膜的任何相应撕裂或分离，b)受累眼睛的视力全部或部分损害和c)不利和妨碍进行一般为修复出血部位和/或修复任何伴随的视网膜撕裂或分离所应用的那类经玻璃体外科手术。在玻璃体内出血已导致视网膜大量浑浊或不透明的病历中，治疗医师可选择进行所谓的玻璃体切除术，在手术中从眼睛内侧除去全部(或部分)玻璃体，并用清澈的液体代替。进行这种玻璃体切除术手术是为使医师观察视网膜足以进行必要的视网膜检查和/或对出血以及任何伴随的视网膜撕裂或分离的手术修复。然而，这种玻璃体切除术方法是高度技术密集的，并伴有一些明显的缺点，风险和并发症。这些缺点，风险和并发症是潜在的以至去除玻璃体的操作会引起视网膜进一步分离或撕裂和/或引起本已脆弱的视网膜血管进一步出血。iii.透明酯酸酶及其他酶的早期应用为致力于使进行玻璃体切除术期间引起的视网膜进一步分离或撕裂的可能性减到最小，以前在美国专利号5,292,509(Hageman)中曾提出过向玻璃体内注射一些无蛋白酶的糖胺聚糖酶，使玻璃体从视网膜分开(uncouple)或“游离”(disinsert)，然后除去玻璃体。这种玻璃体游离或分开旨在使除去玻璃体时会发生的视网膜进一步撕裂或分离的可能性减到最小。旨在可用于产生这种玻璃体游离的专一性无蛋白酶糖胺聚糖酶的实例包括；软骨素酶ABC，软骨素酶AC，软骨素酶B，软骨素4-硫酸酯酶，软骨素6-硫酸酯酶，透明酯酸酶和β葡糖苷酸酶。虽然已知透明酯酸酶可用于各种眼科用途，包括在美国专利5,292,509(Hageman)中描述的玻璃体切除术附属应用，发表过的研究已经表明透明酯酸酶本身对视网膜和/或眼睛的其他解剖学结构可能是有毒的。参见，玻璃体内透明酯酸酶的安全性；Gottleib，J.L.；Antoszyk，A.N.，Hatchell，D.L.和Soloupis，P.，Invest Ophthalmol Vis Sci3111，2345-52(1990)。有些透明酯酸酶制剂的眼科毒性已由其他研究者所证实，他们建议在动物模型中用这类透明酯酸酶制剂做为一种毒性刺激剂以引起眼睛的实验诱导性新血管形成。参见，兔视网膜前新血管形成的实验动物模型；Antoszyk，A.N.，Gottleib，J.L.，Casey，R.C.，Hatchel，D.L.andMachemer，R.，Invest Ophthalmol Vis Sci 321，46-51(1991)。遗憾的是，以前不知道所报道的透明酯酸酶的治疗活性和毒性是否普遍适用于所有的透明酯酸酶制剂，或是否这种功效和/或毒性仅适用于含某些赋形剂物质的透明酯酸酶制剂或仅适用于特殊来源的透明酯酸酶。这是一项重要的考虑，因为前述工作中使用的各种透明酯酸酶制剂随透明酯酸酶的来源以及透明酯酸酶所结合的溶剂和/或其他制剂成分而可能有纯度和特征(例如分子量分布)的不同。iv.早期用于眼科给药的透明酯酸酶制剂之纯度及特征术语“透明酯酸酶”通常用于描述一组内切-β葡糖苷酸酶，该酶解聚某些粘多糖，如透明酯酸。Myer，K.等.，酶；第四卷，第二版447页，科学出版公司.，纽约(一九六零年)。透明酯酸酶引起透明酯酸和硫酸软骨素A和C的内切-N-乙酰基己糖胺键水解，主要水解成四糖残基。明显证据表明不同来源的透明酯酸酶在酶的分子量分布和特异酶活性上都不相同。鉴于透明酯酸酶可分离自各种来源，包括牛睾丸，绵羊(ovine)睾丸，某些细菌如链霉菌和某些非脊椎动物如水蛭，这种分子量分布和比酶活性的差异是值得考虑的。据报道Wydase透明酯酸酶制剂以前已经为各种临床和实验应用给哺乳动物眼睛用药，包括治疗青光眼和在从眼睛除去玻璃体的玻璃体切除术手术期间促进玻璃体液化。尽管已报道有些透明酯酸酶制剂在给眼睛注射或局部用药时表现出符合要求的治疗效果，透明酯酸酶和/或乙基汞硫代水杨酸钠防腐剂的潜在毒性仍是有关眼内注射制剂常规临床给药安全性的虑及原因。因此，在本领域存在一种组合和开发新的透明酯酸酶制剂的需求，该制剂可依足以产生最理想的治疗效果又不引起眼睛的毒性的剂量水平给眼睛用药。因此，鉴于上述讨论的有关从玻璃体自然出血清除血液缓慢的问题，本领域存在一种阐明和开展用于加速从眼睛玻璃体出血清除血液的新方法和手术的需要，以至可对眼睛后部，包括视网膜做经玻璃体检查，而无须除去玻璃体(即全部或部分玻璃体切除术)。专利技术概述本专利技术提供一种加速从哺乳动物眼睛的玻璃液出血清除血液的方法，其中该方法包括用所述玻璃液与一定量的酶接触，该酶有加速从所述玻璃液出血清除血液的活性。可施用特殊的酶以产生本专利技术的出血清除效果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：H·L·卡拉格奥兹安，V·H·卡拉格奥兹安，M·C·肯尼，J·L·G·弗罗雷斯，G·A·C·阿拉贡，A·B·内斯布恩，
申请(专利权)人：伊斯塔药品公司，
类型：发明
国别省市：