一种酶催化级联反应制备D-赖氨酸盐酸盐的方法技术

本发明专利技术公开了一种酶催化级联反应制备D‑赖氨酸盐酸盐的方法，属于生物化学技术领域。以L‑赖氨酸盐酸盐为底物，先经过消旋酶进行消旋反应制备DL‑赖氨酸，随后在脱羧酶作用下将反应液中L‑赖氨酸脱羧生成戊二胺，最后提取得到D‑赖氨酸盐酸盐。反应液经提取纯化后得到高纯度D‑赖氨酸盐酸盐产物，脱羧酶对L‑赖氨酸的转化率达到99％以上。经脱色、旋蒸、醇洗和烘干后，检测D‑赖氨酸盐酸盐产品纯度＞99％，对映体过量值ee 100％，收率达到D‑赖氨酸盐酸盐理论值85％以上。本发明专利技术方法具有高转化率和高收率的特点，易于产业化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种酶催化级联反应制备d-赖氨酸盐酸盐的方法，属于生物化学。

技术介绍

1、d-赖氨酸盐酸盐，英文名称d-lysine hydrochloride，白色粉末，化学式c6h15cln2o2。cas：7274-88-6。分子量182.65。其是最重要的氨基酸之一，主要用于食品、医药等领域。

2、d-赖氨酸系非蛋白质氨基酸。将短肽中的一个或几个l-型氨基酸代之以d-型氨基酸，所得新短肽与原短肽的生物学功能差别很大或特性迥异；氨基酸类抗生素中杂以d-型氨基酸，因难以被细菌酶降解而不致产生抗药性；d-赖氨酸由于生物的手性识别，d-赖氨酸盐酸盐的制备难以用微生物发酵法，也不能用提取法，主要途径由l-赖氨酸盐酸盐外消旋、拆分得到。

3、外消旋体的光学拆分，最经济的办法是优先结晶法，因为该法不需要用其他物质，也不需要变换氨基酸脂的其他形式，但该法产品收率低，手性含量达不到手性化合物的质量要求。

4、采用化学手性酸拆分法是以手性酸为拆分剂，与dl-赖氨酸反应生成非对映体盐，根据二种非对映体盐的溶解度不同，分离d-赖氨酸非对映本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酶催化级联反应制备D-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于，包括如下步骤：以L-赖氨酸盐酸盐为原料，分别采用消旋酶和脱酸酶处理后，得到D-赖氨酸盐酸盐。

2.根据权利要求1所述酶催化级联反应制备D-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于：L-赖氨酸盐酸盐加碱游离后，采用消旋酶将其生成DL-赖氨酸，接着在脱羧酶存在下反应，加入盐酸处理后，得到D-赖氨酸盐酸盐。

3.根据权利要求1或2所述酶催化级联反应制备D-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于：所述消旋酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

4.根据权利要求3所述酶催化级联反应制备D-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在...

【技术特征摘要】

1.一种酶催化级联反应制备d-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于，包括如下步骤：以l-赖氨酸盐酸盐为原料，分别采用消旋酶和脱酸酶处理后，得到d-赖氨酸盐酸盐。

2.根据权利要求1所述酶催化级联反应制备d-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于：l-赖氨酸盐酸盐加碱游离后，采用消旋酶将其生成dl-赖氨酸，接着在脱羧酶存在下反应，加入盐酸处理后，得到d-赖氨酸盐酸盐。

3.根据权利要求1或2所述酶催化级联反应制备d-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于：所述消旋酶的氨基酸序列为seq id no.2。

4.根据权利要求3所述酶催化级联反应制备d-赖氨酸盐酸盐的方法，其特征在于：所述消旋酶表达工程菌的构建方法，将消旋酶lr氨基酸序列进行密码子优化合成，获得基因序列；采用引物lr-f/lr-r对消旋酶基因进行pcr扩增并插入到pet-28a(+)表达载体上ba...

【专利技术属性】
技术研发人员：马士忠，周航成，
申请(专利权)人：上海瀚鸿科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：