一种开放式发酵木质纤维素水解液生产甘油和脂质的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效发酵木质纤维素水解液生产甘油和脂质的工程菌构建方法，属于微生物技术领域。本发明专利技术提供了一种以耐高渗透压的Candida glycerinogenes为生产菌株发酵木质纤维素水解液生产甘油和脂质的方法。采用本发明专利技术构建的Candida glycerinogenes工程菌株Cg‑AAGD，可发酵未脱毒木质纤维素水解液(包含约175g/L的葡萄糖和25g/L的木糖)生产82.2g/L的甘油和7.3g/L的脂质。本发明专利技术选用木质纤维素水解液作为原料，达成了农业废弃物的深度资源化利用目标，所涉及的工艺操作流程相对简便，对生产设备的要求也易于实现。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物，具体涉及一种开放式发酵木质纤维素水解液生产甘油和脂质的方法。

技术介绍

1、在当今社会，可持续发展和资源循环利用备受关注。木质纤维素作为农业生产中的大量废弃物，富含纤维素、半纤维素等多糖成分。然而，目前多数木质纤维素未得到合理利用，不仅造成资源浪费，还带来一定的环境负担。

2、甘油(丙三醇)作为一种关键的平台化合物，广泛应用于食品、化妆品、医药等众多行业。脂质(甘油三酯)在生物能源、营养保健等领域也展现出巨大的应用潜力。传统的甘油和脂质生物生产方式多依赖高价底物，成本高昂且不符合环保与可持续发展要求。利用木质纤维素水解液生产甘油可以降低生产成本，甘油发酵后期菌体又可以积累脂质，发酵液和菌体得到了充分利用，更加节能环保。

3、产甘油假丝酵母(candida glycerinogenes)cctcc m 93018是一株能够耐受木质纤维素水解液毒性的耐高渗酵母，在高渗高毒性等恶劣环境下具备高产甘油的能力。高渗高毒性等恶劣环境也为开放式发酵提供了基础。此外，开放式发酵无需灭菌，可以减少灭菌设备和能源成本。生产甘油的同本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高效生产脂质的工程菌，其特征在于，所述工程菌以产甘油假丝酵母(Candidaglycerinogenes)CCTCC M 93018为宿主，整合有来源于产甘油假丝酵母(Candidaglycerinogenes)的乙酰辅酶A合成酶基因ACS1、乙酰辅酶A羧化酶基因ACC1、3-磷酸甘油脱氢酶基因GPD1，以及来源于解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的二酰基甘油酰基转移酶基因DGA1。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述乙酰辅酶A合成酶氨基酸序列如SEQID NO.1所示；所述乙酰辅酶A羧化酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述...

【技术特征摘要】

1.一种高效生产脂质的工程菌，其特征在于，所述工程菌以产甘油假丝酵母(candidaglycerinogenes)cctcc m 93018为宿主，整合有来源于产甘油假丝酵母(candidaglycerinogenes)的乙酰辅酶a合成酶基因acs1、乙酰辅酶a羧化酶基因acc1、3-磷酸甘油脱氢酶基因gpd1，以及来源于解脂耶氏酵母(yarrowia lipolytica)的二酰基甘油酰基转移酶基因dga1。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述乙酰辅酶a合成酶氨基酸序列如seqid no.1所示；所述乙酰辅酶a羧化酶氨基酸序列如seq id no.2所示；所述3-磷酸甘油脱氢酶氨基酸序列如seq id no.3所示，所述二酰基甘油酰基转移酶氨基酸序列如seq id no.4所示。

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述乙酰辅酶a合成酶acs1、所述乙酰辅酶a羧化酶基因acc1、所述3-磷酸甘油脱氢酶基因gpd1、所述二酰基甘油酰基转移酶基因dga1依次整合至产甘油假丝酵母cctcc m 93018的基因组上的5.8s rdna位点。

4.一种高效生产脂质的工程菌的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，编码所述乙酰辅酶a合成酶核苷酸序列如seq id no.5所示；编码所述乙酰辅酶a羧化酶核苷酸序列如...

【专利技术属性】
技术研发人员：诸葛斌，姜东琪，王梦萦，宗红，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：