一种dsRNA干扰序列组合及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种dsRNA干扰序列组合及其制备方法和应用，属于水产动物生理调控技术领域。本发明专利技术根据基因序列信息选择合适的干扰位点设计并合成dsRNA，将合成的dsRNA注射至罗氏沼虾体内进行RNA干扰，分析在RNA干扰处理前后罗氏沼虾体重增长和蜕皮频率指标，结果表明：相对于空白对照和dsGFP干扰组，使用MIHa dsRNA具有明显的优势，例如，褪壳频率提高明显，生长速率提升显著，表明通过RNA干扰技术，降低MIHa基因的转录水平，可以在一定程度上降低其对生长蜕皮的抑制作用，从而使罗氏沼虾生长速率得到提升。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及水产动物生理调控，特别是涉及一种dsrna干扰序列组合及其制备方法和应用。

技术介绍

1、罗氏沼虾是重要的淡水养殖经济虾，提高生长速度有利于缩短养殖周期、减少人力物力投入；现有的提升生长速度的方法有：(1)传统的家系选育或blup育种方法，可根据每一个家系后代的生长情况，选育生长速度快的家系或品系。(2)基于全基因组重测序技术，通过筛选出的与生长相关联的snp位点，并根据所得位点开发芯片，用于检测具有生长优势个体，以进行下一轮繁育工作。

2、但是上述内容目前都存在一定问题，例如方法(1)采用传统的选育或blup育种技术，需要大规模的家系构建，成本高，周期较长，且每一轮选育后，生长速率提升有限。方法(2)需要进行大规模基因组重测序，开发芯片，前期投入十分高。两种方法都属于遗传育种，受限于种质资源，取决于已有的种虾的质量。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种dsrna干扰序列组合及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，通过rna干扰技术，负调控生长抑制相关的基因，达到本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种调控罗氏沼虾MIHa基因的dsRNA干扰序列组合，其特征在于，该组合包含dsRNA1、dsRNA2和dsRNA3三个dsRNA干扰序列；

2.根据权利要求1所述的dsRNA干扰序列组合，其特征在于，所述组合由dsRNA1、dsRNA2和dsRNA3按1-3：1-3：1-3比例混合即得。

3.一种权利要求1-2任一项所述dsRNA干扰序列组合的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：根据罗氏沼虾MIHa基因的CDS核苷酸序列筛选三个dsRNA靶位点，针对每个靶位点设计并合成两对四条Oligos，经退火、体外转录、酶解、纯化获得dsRNA1、dsRNA2和dsRN...

【技术特征摘要】

1.一种调控罗氏沼虾miha基因的dsrna干扰序列组合，其特征在于，该组合包含dsrna1、dsrna2和dsrna3三个dsrna干扰序列；

2.根据权利要求1所述的dsrna干扰序列组合，其特征在于，所述组合由dsrna1、dsrna2和dsrna3按1-3：1-3：1-3比例混合即得。

3.一种权利要求1-2任一项所述dsrna干扰序列组合的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：根据罗氏沼虾miha基因的cds核苷酸序列筛选三个dsrna靶位点，针对每个靶位点设计并合成两对四条oligos，经退火、体外转录、酶解、纯化获得dsrna1、dsrna2和dsrna3，将dsrna1、dsrna2和dsrna3按1-3：1-3：1-3比例混合即得...

【专利技术属性】
技术研发人员：范云鹏，张海琪，高强，程海华，李喜莲，徐洋，原虎威，彭菲，
申请(专利权)人：浙江省淡水水产研究所浙江省淡水渔业环境监测站，
类型：发明
国别省市：