一种缺失色氨酸酶的大肠杆菌Nissle1917菌株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种缺失色氨酸酶的益生菌大肠杆菌Nissle1917及其制备方法和应用，所述菌株的染色体上编码色氨酸酶的tnaA基因被缺失，命名为△tnaA EcN菌株。通过敲除EcN的tnaA基因，降低其毒力，提高临床应用安全性，并在降低毒力的同时，提升EcN对病原菌的拮抗能力。和野生株(WT)相比，该缺失株不仅产生吲哚减少；运动能力减少；荚膜含量减少；对细胞毒性减少；对小鼠毒力降低，对宿主组织的致炎能力降低。更重要的是，和野生株(WT)相比，该缺失株产生微菌素的能力增加，抑制病原菌的能力增加。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，特别涉及一种缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株及其制备方法和应用。

技术介绍

1、革兰氏阴性大肠杆菌nissle 1917(escherichia coli nissle 1917，ecn)是一种益生菌，相较于革兰氏阳性益生菌，ecn不容易因机械冲刷作用，而从体内排出更易定植在肠道。ecn治疗多种肠道功能障碍，如急慢性腹泻、便秘和肠易激综合征，用于缓解炎症性肠病，与美沙拉嗪一样有效。

2、肠道功能障碍常伴有肠道菌群失衡，导致粘膜屏障功能破坏，致病性肠道细菌侵入黏膜下层，使宿主免疫系统失衡，进而激活炎症细胞分泌炎性细胞因子。益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，当摄入足够数量后能在宿主中定植，并维持宿主肠道微生态平衡。

3、ecn的基因组显示与泌尿致病性大肠杆菌cft073菌株基因组呈高度相关型，它们具有许多相同的因子，包括产生肠黏附素、荚膜、铁摄取系统、大肠杆菌毒素，以及微菌素h47和微菌素m，这些因子使ecn具有潜在的致病性。有研究显示ecn腹腔注射小鼠会导致其死亡；同时也有婴幼儿口服ecn导致患本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种缺失色氨酸酶的大肠杆菌Nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的染色体上编码色氨酸酶的tnaA基因被缺失，命名为△tnaA EcN菌株。

2.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌Nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株在LB培养基中产生吲哚的能力显著降低。

3.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌Nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的鞭毛合成相关基因fliA和fliZ的mRNA表达水平降低，运动能力减弱。

4.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌Nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的荚膜多糖合成...

【技术特征摘要】

1.一种缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的染色体上编码色氨酸酶的tnaa基因被缺失，命名为△tnaa ecn菌株。

2.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株在lb培养基中产生吲哚的能力显著降低。

3.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的鞭毛合成相关基因flia和fliz的mrna表达水平降低，运动能力减弱。

4.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株的荚膜多糖合成基因kfia的mrna表达水平降低，荚膜多糖含量减少。

5.根据权利要求1所述的缺失色氨酸酶的大肠杆菌nissle1917菌株，其特征在于：所述菌株...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐泽炎，张若兰，高大庆，施瑞华，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：