一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法技术

技术编号:45748891 阅读:11 留言:0更新日期:2025-07-08 21:41
本发明专利技术公开了一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,包括:选择适龄的免疫缺陷小鼠;注射人源CD34+造血干细胞进行免疫系统重建;检测外周血PBMC中的人CD45+免疫细胞;选择高表达脑胶质瘤标志基因的肿瘤组织,进行快速qPCR或靶向RNA‑seq免疫组化多重验证,筛选符合的肿瘤组织;将肿瘤组织进行物理切块并经预处理液处理后,消化成单细胞悬液,接种于小鼠颅内;向小鼠尾静脉注射携带特定免疫调控基因的AAV载体,调控脑胶质瘤免疫微环境;当观察到肿瘤组织稳定生长并具有免疫细胞浸润特征时,完成脑胶质瘤动物模型的构建。与现有模型相比,本发明专利技术提供了一种更稳定、更科学、更贴近人类免疫背景的脑胶质瘤模型,适用于相关免疫治疗药物筛选及机制研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤动物模型,尤其涉及一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法。


技术介绍

1、脑胶质瘤(glioblastoma,gbm)是一种高度侵袭性和恶性的大脑肿瘤,通常起源于大脑或脊髓的星形胶质细胞。gbm是最常见的成人原发性脑肿瘤,也是最为致命的脑肿瘤之一。该疾病的特征包括快速增殖、高度浸润性、对常规治疗(如放疗和化疗)的耐药性以及治疗后的复发率高。gbm的发病机制复杂,涉及多种分子通路和基因突变,且肿瘤微环境(如免疫逃逸机制、血脑屏障障碍等)对肿瘤进展有重要影响。因此,研究脑胶质瘤的发生发展机制以及优化现有治疗策略至关重要。

2、脑胶质瘤的研究依赖于多种实验模型,如体外细胞培养、皮下移植瘤模型、基因工程小鼠模型(gemm)和原位脑胶质瘤模型。尽管这些模型在研究中发挥了重要作用,但它们也存在技术局限性。体外细胞培养模型无法模拟肿瘤微环境(tme),缺乏免疫细胞和血管的相互作用,导致无法真实再现肿瘤的免疫逃逸机制和生长特性。皮下移植瘤模型虽然可用于药物筛选,但由于与脑组织的微环境差异,它无法反映脑胶质瘤的生长和药物反应。基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于:

3.根据权利要求2所述的一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,采用AAV9或AAV-PHP.eB血清型进行TGF-β1、IL10及CSF1基因的递送。

4.根据权利要求1所述的一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,所述AAV载体的注射剂量为1-5E+11 vg/mouse;

5.根据权利要求1所述的一种...

【技术特征摘要】

1.一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于:

3.根据权利要求2所述的一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,采用aav9或aav-php.eb血清型进行tgf-β1、il10及csf1基因的递送。

4.根据权利要求1所述的一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,所述aav载体的注射剂量为1-5e+11 vg/mouse;

5.根据权利要求1所述的一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,其特征在于,所述脑胶质瘤标志基因包括cd133蛋白、idh1 r132h突变、egfr扩增、mgmt启动子甲基化以及sox2蛋白。

6.根据权利要求1所述的一种基于aav介导免疫微环境的脑胶质瘤...

【专利技术属性】
技术研发人员:张忠亮方舒婷张本佳
申请(专利权)人:鼐济医药科技杭州有限公司
类型:发明
国别省市:

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