一种采用HPLC-ESI-MS/MS技术检测尿草酸的方法技术

本发明专利技术提供了一种采用HPLC‑ESI‑MS/MS技术检测尿草酸的方法，包括以下步骤：S1、取采集样本，加入草酸‑1，2‑<supgt;13</supgt;C作为草酸的内标，将内标溶液与采集样本按照2:1的比例混合，涡旋5 min后，4000 rpm离心5 min，得到尿液样品；S2、利用液相色谱串联质谱仪进行样品检测；S3、采用稳定同位素标记的草酸‑1，2‑<supgt;13</supgt;C作为草酸的内标，通过制备一系列不同浓度的标准品，制作标准曲线，以草酸工作标准溶液的浓度为X轴，读取结果的标准和内标峰面积比值为Y轴，进行线性回归分析，经“1/x<supgt;2</supgt;”权重得到回归方程；将样品中草酸与其内标峰面积比代入标准曲线方程，计算尿液样品中的草酸浓度。本发明专利技术无需进行衍生化、固相萃取、酸化等操作，大大简化了分析技术，缩短检测时间，提高了样本的稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物化学，具体涉及一种采用hplc-esi-ms/ms技术检测尿草酸的方法。

技术介绍

1、草酸是较强极性的小分子酸性物质，从技术角度看尿草酸（uox）的测定是具有挑战性的。在国际上，尿草酸浓度分析技术也一直是临床化学领域的热点之一。一种可靠的分析方法是实施有价值的尿草酸浓度监测的必要条件。

2、近年来，报道了各种检测尿草酸的方法，包括酶法、hplc、lc-ms/ms、gc-ms、离子色谱、比色法、荧光法、电化学方法等。然而，这些方法存在一些缺点，如酶免免疫分析法特异性低，试剂盒昂贵；气相色谱实用性差，耗时长，需要复杂的柱前衍生化；而一些其他方法存在需要冗繁的样品前处理（如需要进行酸化）、液液萃取和固相萃取效率低，生物样品消耗量大（≥100 μl），以及准确性低的问题。此外，这些方法测定的尿样多为24小时尿样，不适用于24小时尿样采集不方便或困难的患者。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种采用hplc-esi-ms/ms技术检测尿草酸的方法。

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【技术保护点】

1.一种采用HPLC-ESI-MS/MS技术检测尿草酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种采用HPLC-ESI-MS/MS技术检测尿草酸的方法，其特征在于，所述步骤S1中质谱条件包括草酸及其同位素草酸-1，2-13C的电参条件，具体如下：

3.根据权利要求1所述的一种采用HPLC-ESI-MS/MS技术检测尿草酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中相关试剂的组分及其含量为：

【技术特征摘要】

1.一种采用hplc-esi-ms/ms技术检测尿草酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种采用hplc-esi-ms/ms技术检测尿草酸的方法，其特征在于，所述步骤s1中质谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈峰，王洁，郭宏丽，徐进，赵非，
申请(专利权)人：南京市儿童医院，
类型：发明
国别省市：

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