一种靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞及构建方法和应用，基于CXCL9和CCL5的T细胞招募因子基序以及GM‑CSF巨噬细胞极化因子基序设计构建了靶向实体瘤肿瘤微环境肿瘤血管的T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞，能够精准地靶向到小鼠的肿瘤位置，显著性抑制肿瘤微环境中肿瘤血管的生长，能够自分泌T细胞招募因子招募及活化T细胞至肿瘤微环境，并分泌GM‑CSF调控肿瘤微环境M2型巨噬细胞极化逆转，促进免疫细胞抗肿瘤反应，结合CAR‑M自身抗肿瘤特性，实现显著抑制肿瘤生长，延长生存期，系统提高治疗效果；本发明专利技术设计并实施了一种针对实体瘤肿瘤微环境的CAR单核/巨噬细胞技术平台，适用于今后各类型CAR‑M治疗无特异靶点实体肿瘤的应用及延伸设计。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及一种靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的t细胞招募型car单核/巨噬细胞及构建方法和应用。

技术介绍

1、肿瘤细胞免疫疗法因其独特的“活药”特性显示出特有的肿瘤治疗临床应用潜力。当前细胞过继免疫治疗技术多针对肿瘤特定靶点开展设计，其主要基于肿瘤针对高表达的抗原靶点推动肿瘤的发展机制。然而，并不是所有的实体瘤都会有高表达的特异性抗原靶点，缺少特异性抗原靶点的实体肿瘤往往形成高度异质性的肿瘤微环境从而增加了肿瘤的恶性程度，具体表现为：实体肿瘤部位新生血管大量增生、实体瘤存在肿瘤相关巨噬细胞等高度浸润免疫抑制性细胞、肿瘤微环境导致的t细胞匮乏及耗竭等问题，针对其高度异质性微环境的复杂特性，因缺乏高表达的特异性抗原，导致该类实体肿瘤无法设计靶向药物或疗法而复发难治，因此，开发有效和针对性的治疗策略对治疗缺少特异性抗原靶点的实体肿瘤意义重大。

2、针对上述问题，传统单抗疗法单抗存在如下不足：被批准用于治疗癌症的vegf靶向药物-贝伐珠单抗、针对vegfr2的单克隆抗体-雷莫西尤单抗、多激酶抑制剂-舒尼替尼、索拉非尼和帕唑帕本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞，其特征在于，所述T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞为嵌合抗原受体与单核/巨噬细胞的复合结构，其中，所述嵌合抗原受体包含胞外域、跨膜域和胞内域；

2.根据权利要求1所述靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的T细胞招募型CAR单核/巨噬细胞，其特征在于，所述T细胞招募因子包括CCL5、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL14、CCL2、CCL3、CCL4、CCL20、CCL22。

3.根据权利要求2所述靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的T细胞招募型CAR单...

【技术特征摘要】

1.一种靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的t细胞招募型car单核/巨噬细胞，其特征在于，所述t细胞招募型car单核/巨噬细胞为嵌合抗原受体与单核/巨噬细胞的复合结构，其中，所述嵌合抗原受体包含胞外域、跨膜域和胞内域；

2.根据权利要求1所述靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的t细胞招募型car单核/巨噬细胞，其特征在于，所述t细胞招募因子包括ccl5、cxcl8、cxcl9、cxcl10、cxcl11、cxcl12、cxcl14、ccl2、ccl3、ccl4、ccl20、ccl22。

3.根据权利要求2所述靶向实体瘤肿瘤微环境抗肿瘤血管生成的t细胞招募型car单核/巨噬细胞，其特征在于，所述t细胞招募型car单核/巨噬细胞的嵌合抗原受体由包含抗vegfr2 scfv分子的胞外域、α1β1tm、α1β1与fcγrⅰ共刺激域、可分泌型细胞因子gm-csf、cxcl9和ccl5作为t细胞招募因子组成，所述嵌合抗原受体的核苷酸序列如seq id no.1所示。

4.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含胞外域、跨膜域和胞内域；

5.根据权利要求4所述嵌合抗原受体，其特征在于，所述t细胞招募因子包括ccl5、cxcl8...

【专利技术属性】
技术研发人员：宁蓬勃，杜付玉，龚春梅，杨鹏，王希楠，饶志萍，
申请(专利权)人：西安电子科技大学，
类型：发明
国别省市：