去唾液酸干扰素和肝癌的治疗制造技术

本发明专利技术涉及一种制备和利用去唾液酸干扰素，包括去唾液酸干扰素－α，去唾液酸干扰素－α２ａ，去唾液酸干扰素－α２ｂ，去唾液酸干扰素－β，去唾液酸干扰素－β１ａ，去唾液酸基干扰素－β１ｂ和去唾液酸干扰素－γ治疗肝癌的方法。去唾液酸干扰素治疗可以单独进行或与其它抗肿瘤治疗联合进行。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肝癌的治疗。
技术介绍
原发性肝癌发生于当异常的肝细胞不受控制的生长时。与许多其他类型的癌症相比较，患上肝癌并因此死亡的人数在增加。许多患有慢性肝脏疾病，包括肝硬化和肝炎的病人，更有可能发展成肝癌。1975-1995年之间，美国原发性肝癌的发生率增加了75％，诊断患有肝癌的患者人数每年持续增长。在2002年，美国癌症学会估计美国将确诊16,600例原发性肝癌和胆管癌的新增病例，并且14,100美国人将因此死亡。儿童和成年人中最普遍的原发性肝癌的形式是肝细胞癌，占全部肝癌的80-90％。肝细胞癌有几种不同的临床类型，包括弥散型肝细胞癌，发热型肝细胞癌和胆汁阻塞型肝细胞癌。肝母细胞瘤是另一种形式的肝癌，它相对罕见并通常影响幼儿。大多数肝癌病例预后很差。目前的疗法对于治疗肝癌疗效有限。虽然干扰素已被成功的用于治疗其他类型的癌症，例如毛细胞性白血病，慢性髓细胞性白血病和黑色素瘤，但是肝脏实体瘤对于干扰素的治疗较不敏感，这可能是由于干扰素从血液中的快速清除。另外，在癌症治疗所需的剂量水平上，干扰素疗法常常导致不良副作用和毒性；因此，需要研制预防或治疗肝癌的治疗试剂。专利技术概述一方面，本专利技术描述了一种治疗肝癌病人的方法，该方法是通过给予有效量的含有哺乳动物去唾液酸干扰素(asialo-interferon)的药物组合物。一个优选实施例中，肝癌表达无唾液酸-糖蛋白受体(asialo-glycoproteinreceptor)。一个更优选实施例中，肝脏过度表达无唾液酸-糖蛋白受体。另一方面，本专利技术描述了一种治疗表达无唾液酸-糖蛋白受体的肝癌病人的方法，该方法通过(a)检测肝癌中无唾液酸-糖蛋白受体的表达，和(b)给予病人有效量的含有哺乳动物去唾液酸干扰素的组合物。一个实施例中，通过活组织检查，对从患者获得的组织样本进行肝癌的检测。另一个实施例中，无唾液酸-糖蛋白受体过度表达，肝癌的检测采用非侵入性显像技术。可以用前述任意一种方法治疗的肝癌包括，例如弥散型肝细胞癌，发热型肝细胞癌和胆汁阻塞型肝细胞癌，肝母细胞瘤，肝样腺癌和灶性结节性增生。这些方法的一个优选实例中，去唾液酸干扰素是人去唾液酸干扰素。适用的去唾液酸干扰素包括去唾液酸干扰素-α，-β和-γ。另一些实施例中，所述方法进一步包括第二种抗肿瘤治疗(anti-neoplastic therapy)。适用的抗肿瘤治疗包括，例如，外科手术(即，肿瘤切除)，化疗和放疗。本专利技术的治疗方法也可用于治疗转移性肝癌。适用于该治疗方法的转移性肝癌包括，例如转移性前列腺癌，转移性结肠直肠癌，转移性乳腺癌，转移性肺癌，转移性胰腺癌，转移性黑色素瘤和转移性白血病和淋巴瘤。“干扰素”是指具有高度同源种属特异性的干扰素蛋白家族，它抑制病毒复制和细胞增殖，调节免疫反应，与干扰素-α，-β或-γ或其生物活性片段基本相同。评价干扰素生物活性的方法是公知的(例如，Monkarsh et al.，Anal.Biochem.247434-440，1997；Grace et al.，Bioconj.Chem.12195-202，2001；Pepinsky et al.，J.Pharmacol.Exp.Therap.2971059-66，2001)。人干扰素根据它们的细胞来源和分子结构分为三类干扰素-α(白细胞)，干扰素-β(成纤维细胞)和干扰素-γ(淋巴细胞)。“干扰素-α”是指含有与干扰素-α2的成熟多肽(登录号P01563的24-188位氨基酸；SEQ ID NO1)或其生物活性片段基本相同的氨基酸序列的蛋白质。因此，干扰素-α包括干扰素-α2前体多肽(登录号P01563；SEQ ID NO1)和保留了成熟干扰素-α生物活性(例如，抗增殖活性)的片段。该定义还包括干扰素-α2的变体，包括例如，干扰素-α2b(SEQ ID NO1的R46K突变)和干扰素-α2c(SEQ ID NO1的R57H突变)。干扰素-α2b是一个O-连接糖蛋白。干扰素-α14c是一个N-连接糖蛋白，在72位Asn处糖基化。天然干扰素可由商业途径获得，商品名是Wellferon(Glaxo-SmithKline)，Alferon(Interferon)，Sumiferon(Sumitomo)和Multiferon(Viragen)。非糖基化干扰素-α也可从商业途径获得，包括例如，重组干扰素-α2a，商品名Roferon-A(Roche)，重组干扰素-α2b，商品名Intron-A(Schering Plough)，和重组干扰素-α2c，商品名Berofor α2(Boehringer Ingelheim)。重组共有干扰素-con1可以以Infergen(Amgen)的商品名获得。当然，在用于本专利技术的组合物和方法之前，任何非糖基化的干扰素必需用带有末端半乳糖残基的寡糖糖基化。“干扰素-β”是指含有与成熟干扰素-β多肽(登录号P01574的22-187位氨基酸；SEQ ID NO2)或其生物活性片段基本相同的氨基酸序列的蛋白质。因此，除了不含信号肽的成熟干扰素-β蛋白之外，干扰素-β还包括，包含信号肽的干扰素-β前体多肽(登录号P01574；SEQ ID NO2)及具有干扰素-β生物活性(例如，抗增殖活性)的片段。干扰素-β是糖蛋白，在成熟干扰素-β蛋白的80位Asn处糖基化。已经研制了重组形式的干扰素-β，并且可从商业途径获得。干扰素-β1a可以以Avonex(Biogen)和Rebif(Serono)的商品名获得。干扰素-β1b可以以Betaseron(Berlex)的商品名获得。“干扰素-γ”是指含有与成熟干扰素-γ多肽(登录号P01579的21-166位氨基酸；SEQ ID NO3)或其生物活性片段基本相同的氨基酸序列的蛋白质。因此，除了不含信号肽的成熟干扰素-γ多肽之外，干扰素-γ蛋白还包括，含有信号肽的干扰素-γ前体蛋白(登录号P01579；SEQ ID NO3)及具有干扰素-γ生物活性(例如，抗增殖活性)的片段。干扰素-γ在48位Asn处糖基化，二聚体中，还在120位Asn处糖基化。干扰素-γ可以以Actimmune(InterMune)的商品名获得。“去唾液酸干扰素”是指存在于天然糖基化干扰素中的、缺少末端唾液酸基团的糖基化干扰素。除去末端唾液酸残基暴露出下面的半乳糖部分。这个末端半乳糖被无唾液酸糖蛋白受体识别。优选，去唾液酸干扰素包含天然干扰素的碳水化合物部分的至少50％，70％，80％，90％，或甚至95％。更优选，去唾液酸干扰素只缺失末端唾液酸残基。通过从糖基化干扰素，例如干扰素-α，-β和-γ，除去一个或多个唾液酸基团，制备去唾液酸干扰素。可通过下述方法除去唾液酸，例如温和的酸水解，或用纯化的神经氨酸酶处理天然的糖基化干扰素，例如干扰素-α，-β或-γ。对于含有一条以上糖链的干扰素，可利用特异性神经氨酸酶(唾液酸酶)实现选择性去唾液酸化。该定义特别排除了完全去糖基化干扰素，包括典型的原核细胞制备的干扰素以及真核细胞制备并经酶法或化学法去糖基化的干扰素。当然，因为除去唾液酸残基的目的是要产生在其寡糖链上带有至少一个末端半乳糖残基的糖基化干扰素，末端半乳糖残基可通过任何其它适本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗肝癌病人的方法，所述方法包括给予所述病人有效量的含有哺乳动物去唾液酸干扰素的药物组合物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：尼古拉斯P巴克，丹尼尔K波多尔斯基，
申请(专利权)人：通用医疗公司，GI公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]