利用G*6976及其相关化合物进行肿瘤治疗制造技术

通过将Ｇ＊６９７６或其化学相似化合物给予哺乳动物来进行癌症治疗的癌症化疗方法。该化合物针对ＰＫＣ－α活性。实验表明，Ｇ＊６９７６及其相似化合物对于乳腺癌、白血病、肺癌、骨癌、皮肤癌、前列腺癌、肝癌、脑瘤、宫颈癌、以及包括胃癌、结直肠癌等在内的消化道肿瘤的治疗有效。Ｇ＊６９７６及其相似化合物可以单独用药，或与现有技术中的化疗药物联合用药，或与放射疗法结合使用。在一个优选实施方案中，将Ｇ＊６９７６作为一种预防性药物用于癌症治疗中，防止癌细胞形成。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本项专利技术与肿瘤治疗有关，尤其是与针对蛋白激酶Cα的肿瘤治疗相关。
技术介绍
研究人员发现，被称为蛋白激酶C的酶家族与多种肿瘤相关。该酶家族包括至少11种同功酶。该酶系家族中有一个特别成员，命名为蛋白激酶Cα，缩写为PKCα。研究表明，人类乳腺癌中PKCα活性升高(NG et al.，Science.2832085-2089)，在前列腺癌中PKCα的表达显著增加(Cornford et al.，Am.J.Pathol.154137-144)。还有研究表明，人类黑色素细胞瘤的转移需要PKCα(Dennis et al.，Cancer Lett.12865-70)，而且PKCα还与脑瘤的进行性增生有关(Shen et al.，Mol.Pharmacol.55396-402)。最近，Muller等人被授予专利U.S.Pat.No.5,744,460，其中公开了一项利用反义寡核苷酸技术、以PKCα为靶点、并结合化疗药物的肿瘤治疗方法。授予Bennett等人的美国专利Nos.5,882,927和5,885,970，也公开了以PKCα为靶点的反义寡核苷酸。可从Calbiochem公司和Alexis公司(两家公司均在加州圣地哥市设有办公机构)获得的化合物G6976是一种PKCα制剂。G6976可以写为C24H18N4O，其分子结构式见图1。本申请人在MolecularCellular Biology，173418-3428中报告，多个实验结果表明G6976可以阻止TPA诱导的PKCα下调，它是一种更加特异的PKCα抑制剂。需要有更好的癌症治疗方法。专利技术概述本专利技术提供了一种化疗性的癌症治疗方法，其中将G6976或在化学上与其相似的化合物施用于哺乳动物以进行肿瘤治疗。该化合物针对PKCα活性。实验表明，G6976及其相似化合物对于乳腺癌、白血病、肺癌、骨癌、皮肤癌、前列腺癌、肝癌、脑瘤、宫颈癌、以及包括胃癌、结直肠癌等在内的消化道肿瘤的治疗有效。G6976及其相似化合物可以单独用药，或与现有技术中的化疗药物联合用药，或与放射疗法结合使用。在一个优选实施方案中，将G6976作为一种预防性药物用于肿瘤治疗，阻止肿瘤细胞形成。 其中A，B，C，D，E，F和G各自是改性基团(modifying chemical)或化合物。所述改性基团或化合物可以是选自下组的基团或化合物氢，氧，甲基，乙基，丙基，或异丙基，羧甲基，2-羧乙基或3-羧丙基，具有1个到多个碳原子的直链或支链烷基，包含1个至多个碳原子的直链或支链叠氮烷基、羧基烷基、脒基硫代烷基、脒基烷基、(2-硝基胍)烷基；或--(CH2)2-CO-NX，其中X各自独立地是氢、含1个至多个碳原子的烷基或苯甲基。优选用于本专利技术的化合物有A)G6976C24H18N4O12-(2-氰乙基)-6，7，12，13-四氢-13-甲基-5-氧-5H-吲哚并吡咯并咔唑，B)C-o 002C23H22N412-(3-氨基丙基)-5，6，7，12，13-五氢吲哚并吡咯并咔唑，C)C-o 003C23H24N4Cl212-(3-氨基丙基)-5，6，7，12，13-五氢吲哚并吡咯并咔唑盐酸盐附图说明图1为G6976的化学结构式；图2-图8图表说明G6976治疗多种肿瘤细胞的结果；图9A、9B和9C表明了G6976及其它相似化合物的结构比较；图10图示了测试结果。 具体实施例方式本项专利技术可结合附图来进行说明。将几种不同的肿瘤细胞在实验室条件下培养，然后用G6976处理细胞，记录结果。具体实验及其结果如下。第一组实验如下进行第一组实验细胞培养细胞培养中使用下述肿瘤细胞，它们是由位于马里兰州Rockville的美国典型培养物保藏中心提供的。MDA-MB-468人类乳腺癌细胞；MDA-MB-453人类乳腺癌细胞；A431人类表皮样癌细胞；U-2 OS人类骨肉瘤细胞；过度表达表皮生长因子受体(EGFR)的3Y1大鼠成纤维细胞。上述细胞在加有10％牛血清的DMEM培养液中进行培养。小细胞型肺癌细胞(NCI-H1048)；非小细胞型肺癌细胞(NCI-H2342)；小细胞型肺癌细胞在含有2mM L-谷氨酰胺的RPMI 1640培养基中生长，调节培养基使其含有1.5g/L碳酸氢钠、4.5g/L葡萄糖、10mM HEPES、1.0mM丙酮酸钠和5％胎牛血清。非小细胞型肺癌细胞于RPMI 1640培养基中生长，培养基中补加了5％胎牛血清、5ug/ml胰岛素、10ug/ml转铁蛋白、30nM亚硒酸钠、10nM氢化可地松、10nMβ-雌二醇、10mM HEPES和2mM L-谷氨酰胺。HL60人类急性早幼粒细胞白血病细胞在含有10％热灭活胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基中培养。为使这些细胞能够在软琼脂上生长，将1×103个细胞悬浮于上层琼脂(含20％牛血清、0.38％琼脂，余下为DMEM)，然后铺于已经硬化的底层琼脂(DMEM，20％牛血清和0.7％琼脂)上。参见Sementchenko等人在Onocgen 172883-2888中所报告。实验材料G6976由Calbiochem公司提供。细胞活力测试将上述细胞接种24小时后，加入G6976进行处理或不做处理。然后定期收集细胞，并用台盼兰染料排斥法评估细胞活力，方法如CYChen等人在J.Biol.Chem.27316700-16709中所述。实验结果乳腺癌用G6976处理人类乳腺癌细胞(MDA-MB-468和MDA-MB-453)的结果如图2和图3所示。用0.0，0.5，1.0和2.0微摩尔G6976处理含有约5×105个细胞的培养物，第4天计数存活细胞。如图2所示，在用1微摩尔G6976处理后，细胞计数减至大约1×105，而用2微摩尔G6976处理后，细胞计数则减至0.3×105以下。在图3所示的单独实验中，乳腺癌细胞用2.0微摩尔G6976处理，以24小时为间隔进行计数，持续4天。存活细胞的浓度似乎每经过24小时就下降一半。在图2和图3中，误差为根据3次独立实验估计的标准误差。白血病用G6976处理HL60急性早幼粒细胞白血病细胞的结果如图4所示。在两份5×105个细胞的样本中，其中一份用2微摩尔G6976处理，4日后计数存活细胞。在第4天时，未经处理的样本中的细胞增长近10倍，几乎达到5×106个细胞，而经处理的样本中存活细胞数减至0.2×105以下。肺癌处理肺癌细胞的结果如图5所示。小细胞型肺癌和非小细胞型肺癌细胞各制备2份样本，每份5×105个细胞左右。两类细胞各取一份样本用G6976处理，第4日计数存活细胞。未经处理的样本中癌细胞增长了近10倍，而经处理的样本中细胞数减至原来细胞数的一半以下。骨癌处理骨肉瘤细胞的结果如图6所示。在两份约5×105个细胞的样本中，其中一份用2微摩尔G6976处理，4日后计数存活细胞。在第4日时，未经处理的样本中的细胞增长近8倍，几乎达到4×106，而经处理的样本中细胞数减至原来细胞数的一半以下。皮肤癌处理A431人类表皮样癌细胞的结果如图7所示。在两份备5×105个细胞的样本中，其中一份用2微摩尔G6976处理，每24小时计数存活细胞一次，连续4天。在第4日，未经处本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对患有癌症的哺乳动物进行治疗的方法，其中包括向所述哺乳动物给予靶向ＰＫＣ－α的化学药品和监测该哺乳动物以确定癌症状态的步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕志民，王可明，
申请(专利权)人：吕志民，王可明，
类型：发明
国别省市：US[美国]