基于化学衍生法检测217-磷酸化微管蛋白片段的方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种基于化学衍生法检测217‑磷酸化微管蛋白片段的方法及应用，所述方法包括以下步骤：S1、向p‑Tau 217溶液中加入TMPP‑Ac‑OSu、三乙胺溶液，混合后进行衍生化反应，再加入氨水溶液进行淬灭反应，得到样品溶液；S2、取样品溶液进行LC‑MS/MS检测。本发明专利技术创造性采用TMPP‑Ac‑OSu与p‑Tau 217进行特定的化学衍生化反应，使得生成的化学衍生化产物的信号得到明显提升，检测能力得到增加，可以在Vanquish UHPLC液相条件下，搭配性价比更高的TSQ Altis<supgt;TM</supgt; Triple Quadrupole仪器进行分析，极大降低了检测的成本；而且方法耗时短，可用于大量样本的快速提取。本发明专利技术的检测方法对阿尔茨海默病的早期检测具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，涉及一种基于化学衍生法检测217-磷酸化微管蛋白片段的方法及应用。

技术介绍

1、在阿尔茨海默病的诊断过程中，精确地检测血浆中阿尔茨海默病(ad)相关生物标志物——217-磷酸化微管蛋白片段(p-tau 217)的水平具有重要意义。然而，由于p-tau217在血浆中的浓度极低，常规质谱检测技术面临着灵敏度不足的挑战。阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病，其早期诊断对于疾病的管理和治疗至关重要。p-tau 217作为ad的一个重要生物标志物，在疾病的早期诊断和进展监测中扮演着重要角色。然而，目前的检测方法依赖于高性能但昂贵的质谱设备，并且需要长时间的色谱分离，增加了检测成本和复杂性。

2、传统p-tau 217检测方法如华盛顿大学圣路易斯分校开发的技术，该技术在样品处理过后，采用nanoacquity uplc系统进行液相分离，其中使用高端的fusiontmlumostmtribridtm质谱仪对p-tau 217进行分析；又例如哥登堡大学开发的lc-ms方法，样品处理完成后，采用dionex 3000系统进行nano lc液本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于化学衍生法检测217-磷酸化微管蛋白片段的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，所述p-Tau 217溶液的浓度为0.001-1000pg/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，p-Tau 217与TMPP-Ac-OSu的用量比为0.001-1000pg/mL：1-300ug。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，p-Tau 217、三乙胺溶液、氨水溶液的用量比为0.001-1000pg/mL：0.01-10μL：1.01-10μL。

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【技术特征摘要】

1.一种基于化学衍生法检测217-磷酸化微管蛋白片段的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中，所述p-tau 217溶液的浓度为0.001-1000pg/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中，p-tau 217与tmpp-ac-osu的用量比为0.001-1000pg/ml：1-300ug。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中，p-tau 217、三乙胺溶液、氨水溶液的用量比为0.001-1000pg/ml：0.01-10μl：1.01-10μl。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤s1中，所述氨水溶液的浓度为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：段立坤，李姝妹，翟立斐，谢晓磊，
申请(专利权)人：上海睿质科技有限公司，
类型：发明
国别省市：