一种提取细胞外泌体eccDNA的方法技术

本发明专利技术提出了一种提取细胞外泌体eccDNA的方法。所述的方法包括细胞外泌体提取、细胞外泌体DNA提取、外泌体eccDNA分离与纯化以及外泌体eccDNA扩增的步骤。本发明专利技术成功建立了提取细胞外泌体eccDNA的流程，并对获得的外泌体eccDNA进行了分子特征分析。通过测序分析表明，外泌体eccDNA的分子大小、GC含量等特征与已报道的eccDNA相关特征相吻合，并且三次实验之间具有较好的重复性，证明其分子结构符合经典eccDNA的分子特征，同时外泌体eccDNA具有一定的特异性。本发明专利技术的提出为开展外泌体eccDNA相关的结构特征、潜在功能、潜在生物标志物开发等研究提供了技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提取eccdna的方法，特别涉及一种提取细胞外泌体eccdna的方法。本专利技术属于生物。

技术介绍

1、染色体外环状dna(extrachromosomal circar dnas,eccdnas)是指位于染色体外的单链或双链闭合环状dna结构。根据已有报道，eccdna广泛存在各种真核生物中，并且在细胞中、组织中、外周血(血清、血浆)、以及其它体液如尿液中等均有报道。

2、外泌体是由活细胞所分泌的具有双层膜结构的细胞外小囊泡，外泌体广泛存在于外周血等体液中以及体外细胞培养的培养基中。外泌体可以携带rna、dna以及蛋白质等物质。eccdna是位于染色体外的环状dna，广泛存在于细胞以及细胞外成分中，可与各种生理或病理状态存在关联，是潜在的疾病诊断或预后判断的生物标志物。eccdna可能对基因表达具有调控功能。外泌体中的eccdna可能具有重要的调控活性，值得研究者对其特征和潜在功能进行研究。然而外泌体中是否存在eccdna还没有报道。

3、根据目前研究结果，eccdna具有一些独特的分子结构的特征，比如eccd本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提取细胞外泌体eccDNA的方法，其特征在于，所述的方法包括细胞外泌体提取、细胞外泌体DNA提取、外泌体eccDNA分离与纯化以及外泌体eccDNA扩增的步骤。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(一)包括以下步骤：

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的细胞为人结肠癌细胞系SW620或前列腺癌细胞系du145。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(二)包括以下步骤：

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(四)包括以下步...

【技术特征摘要】

1.一种提取细胞外泌体eccdna的方法，其特征在于，所述的方法包括细胞外泌体提取、细胞外泌体dna提取、外泌体eccdna分离与纯化以及外泌体eccdna扩增的步骤。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱静，郭志涛，孟祥宁，孙文靖，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：