一种重组CNTN2蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种重组CNTN2蛋白及其制备方法和应用。本发明专利技术利用哺乳动物细胞分泌型表达载体，并结合瞬时转染技术，在哺乳动物细胞表达系统中，实现了重组CNTN2蛋白的高效、稳定和快速表达，能够满足在真核生物中大量表达含有跨膜结构域的免疫蛋白的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种重组cntn2蛋白及其制备方法和应用。

技术介绍

1、接触蛋白2(contactin-2，cntn2)是免疫球蛋白细胞黏附分子(ig superfami lycell adhesion molecules，igcams)家族的一员，具有六个n端免疫球蛋白(ig)重复结构域、四个纤维连接蛋白iii(fniii)重复结构域、以及一个用于将其锚定在神经细胞膜上的c端糖基化磷脂酰肌醇(gpi)锚定结构。作为一种神经特异性糖蛋白，cntn2在轴突连接形成中起着关键作用，特别是对髓鞘轴突的完整性和功能具有重要影响。为进一步理解cntn2在神经元连接和信号传导中的具体作用机制，需要对cntn2的表达情况进行深入研究。

2、目前，现有研究主要采用原核表达系统或昆虫细胞表达系统来获取cntn2的部分结构域蛋白。其中，基于原核表达系统的方法是将编码cntn2部分结构域的目标基因插入质粒载体中，然后转化到大肠杆菌等原核生物中进行重组蛋白质的表达。这种方法能够快速且大规模地生产蛋白质，适合高通量实验需求。然而，原核表达系统缺乏天然的翻译本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组CNTN2蛋白的制备方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的重组CNTN2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，采用引物获取所述CNTN2胞外段全长基因，

3.根据权利要求1所述的重组CNTN2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述哺乳细胞分泌型表达载体包括pSecTag2B载体。

4.根据权利要求1所述的重组CNTN2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述哺乳动物细胞包括HEK293F细胞。

5.根据权利要求4所述的重组CNTN2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述瞬时转染所采用...

【技术特征摘要】

1.一种重组cntn2蛋白的制备方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的重组cntn2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，采用引物获取所述cntn2胞外段全长基因，

3.根据权利要求1所述的重组cntn2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中，所述哺乳细胞分泌型表达载体包括psectag2b载体。

4.根据权利要求1所述的重组cntn2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中，所述哺乳动物细胞包括hek293f细胞。

5.根据权利要求4所述的重组cntn2蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中，所述瞬时转染所采用的转染试剂包括聚乙烯亚胺。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的重组cntn2蛋白的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张珍珍，潘璠，李芳芳，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：