一种稀有细胞的磁力-流式分选方法技术

本发明专利技术涉及一种稀有细胞的磁力‑流式分选方法，对于极稀有(小于0.1％)的细胞亚群的分选，适当的预富集有助于提高目的细胞群的圈门准确度；以Treg细胞为例，Treg细胞的磁力‑流式分选方法，对细胞匀浆液中的目标细胞先进行荧光素标记，再进行磁珠标记，将修饰后的细胞匀浆液通过特定的磁力分选装置进行预富集，所得预富集细胞溶液再经流式细胞仪分选，分选得到Treg细胞。本发明专利技术具有的有益效果是：磁力预富集，显著精确了样本选择范围，减少磁珠使用量，并且能够降低分选时长，既能够提高分选效率，降低分选成本，又能够保持分选细胞的生物活性；通过磁力分选方式避免了长时间的高速离心，减少了对细胞的切割力，利用保持细胞的完整性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞培养，涉及一种稀有细胞的磁力-流式分选方法，尤其适用于treg细胞的分选。

技术介绍

1、流式分选的纯度要保证在99％-100％，依赖于分群优秀且比例大的细胞群体可以实现；95％的分选纯度主要依赖于机器的性能稳定、参数合理、分选圈门准确。虽然bdairaiii分选机器的可行发生事件最高是10000events/s，但为了保证高纯度分选，实验人员会控制在2500-4000events/s。对于样本量大的稀有细胞，低速分选不利于实验时间的控制。对于稀有细胞(小于1％)和极稀有(小于0.1％)的细胞亚群的分选，虽然理论上可以进行分选，但为了纯度和得率的考虑，应进行合理的浓缩富集，从而保证分选的科学性，当的预富集有助于提高目的细胞群的圈门准确度。以treg细胞为例，treg细胞(cd4+cd25+foxp3+)是一种主在胸腺中发育成熟的免疫细胞，通过循环进入外周组织形成功能不同的t细胞亚型。有研究发现，在肿瘤微环境(tme)中存在多种分子信号如肿瘤抗原、细胞因子等，可诱导外周t细胞转化为treg细胞从而抑制抗肿瘤免疫反应，促进肿瘤发展。在肿瘤免疫本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种磁力分选装置，其特征在于：包括，

2.根据权利要求1所述的磁力分选装置，其特征在于：所述分选管能够嵌入所述磁力外壳中。

3.根据权利要求2所述的磁力分选装置，其特征在于：所述分选管为透明或半透明，所述磁力外壳上设有条状视窗，还包括填充块，所述填充块能够嵌入所述条状视窗。

4.一种稀有细胞的磁力-流式分选方法，其特征在于：对细胞匀浆液中的目标细胞先进行荧光素标记，再进行磁珠标记，将修饰后的细胞匀浆液通过权利要求1-3中任一所述的磁力分选装置进行预富集，所得预富集细胞溶液再经流式细胞仪分选，分选得到稀有细胞。

5.根据权利要求4所述的稀...

【技术特征摘要】

1.一种磁力分选装置，其特征在于：包括，

2.根据权利要求1所述的磁力分选装置，其特征在于：所述分选管能够嵌入所述磁力外壳中。

3.根据权利要求2所述的磁力分选装置，其特征在于：所述分选管为透明或半透明，所述磁力外壳上设有条状视窗，还包括填充块，所述填充块能够嵌入所述条状视窗。

4.一种稀有细胞的磁力-流式分选方法，其特征在于：对细胞匀浆液中的目标细胞先进行荧光素标记，再进行磁珠标记，将修饰后的细胞匀浆液通过权利要求1-3中任一所述的磁力分选装置进行预富集，所得预富集细胞溶液再经流式细胞仪分选，分选得到稀有细胞。

5.根据权利要求4所述的稀有细胞的磁力-流式分选方法，其特征在于：具体步骤如下：

6.根据权利要求5所述的稀有细胞的磁力-流式分选方法，其特征在于：磁力分选装置预富集过程具体如下：

7.根据权利要求4-6...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚远，白敬超，
申请(专利权)人：天津市肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：