一种苯丙氨酸羟化酶突变体、重组菌株和制备5-羟基色氨酸的方法技术

技术编号:43286827 阅读:12 留言:0更新日期:2024-11-12 16:08
本发明专利技术涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种苯丙氨酸羟化酶突变体、重组菌株和制备5‑羟基色氨酸的方法。苯丙氨酸羟化酶突变体由苯丙氨酸羟化酶中一个或多个点突变得到,所述点突变的突变位置包括:K58G、Q117K、K230R和C265S;所述苯丙氨酸羟化酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明专利技术提供的苯丙氨酸羟化酶突变体提高了色氨酸的转化率,将其制备成固定化酶,采用固定化酶催化色氨酸生产5‑HTP,具有反应时间短,副产物少,易于产物5‑HTP的分离纯化,色氨酸的转化率达到95%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程,特别是涉及一种苯丙氨酸羟化酶突变体、重组菌株和制备5-羟基色氨酸的方法


技术介绍

1、5-htp作为非处方药,在欧美等发达国家己被普遍应用于精神调节药物和减肥营养品中,欧美市场对精神卫生方面的重视程度决定了5-htp的市场需求量巨大。目前以5-htp为主要成分的保健药已开发了40多种制剂品种,在全球20个国家上市,以100-150mg含量的胶囊为主,也有片剂、粉剂和缓释剂的形式。

2、色氨酸是人体必需氨基酸之一,在生物体内可被苯丙氨酸羟化酶(pah)催化,转变成5-羟基色氨酸(5-hydroxytryptophan,5-htp)。5-htp是一种氨基酸类物质,化学名为5-羟基-3-吲哚基-α-氨基丙酸,分子式为c11h12n2o3,分子量为220.23。5-羟基色氨酸(5-htp)是一种不参与蛋白质合成的天然氨基酸,是色氨酸的衍生物,由色氨酸苯环上5位的氢原子被羟基取代而生成。在人体内,5-羟基色氨酸是神经递质血清素与胺类激素褪黑素的前体,对睡眠、痛觉、体温、食欲与行为等生理功能具有调节作用,已被用于抑郁症、偏头痛和失本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种苯丙氨酸羟化酶突变体,其特征在于,由苯丙氨酸羟化酶中一个或多个点突变得到,所述点突变的突变位置包括:

2.根据权利要求1所述的苯丙氨酸羟化酶突变体,其特征在于,当所述点突变同时为4个时,所述点突变突变位置包括:K58G、Q117K、K230R和C265S。

3.一种重组菌株pET28a-PAH/BL21,其特征在于,由包括以下构建方法构建得到:

4.一种制备5-羟基色氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)发酵使用的培养基包括:葡萄糖10g/L、酵母膏11.5g/L、蛋白胨1...

【技术特征摘要】

1.一种苯丙氨酸羟化酶突变体,其特征在于,由苯丙氨酸羟化酶中一个或多个点突变得到,所述点突变的突变位置包括:

2.根据权利要求1所述的苯丙氨酸羟化酶突变体,其特征在于,当所述点突变同时为4个时,所述点突变突变位置包括:k58g、q117k、k230r和c265s。

3.一种重组菌株pet28a-pah/bl21,其特征在于,由包括以下构建方法构建得到:

4.一种制备5-羟基色氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)发酵使用的培养基包括:葡萄糖10g/l、酵母膏11.5g/l、蛋白胨15g/l、硫酸铵4g/l、磷酸氢二钾18g/l、磷...

【专利技术属性】
技术研发人员:彭泽昊马静杨东彦
申请(专利权)人:河北凯恩利生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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