【技术实现步骤摘要】
本申请涉及微生物应用，具体涉及一种抗氧化剂提高裂壶藻epa产量的生产方法及其应用。
技术介绍
1、二十二碳五烯酸(epa)是一种重要的ω-3长链多不饱和脂肪酸，epa具有抗凝血、降血脂、预防心血管疾病和动脉粥样硬化的功能，此外epa具有明显的抗脂质氧化的作用,可以减轻过氧脂质对细胞的损伤。epa在人体内转化时间长、产量低，因此需要通过日常膳食或特定的膳食补充剂补充。目前，人们对健康的重视程度日益升高，而epa因其重要的生理功能在食品、医药和饲料喂养等各个领域具有十分广阔的应用前景。目前市售epa补充剂的原料来源主要是鱼油，但鱼油生产提取复杂、价格昂贵、带有不舒服的鱼腥味以及生产过程污染较大，因此开发一种提取简单、绿色的epa原料来源十分重要。微生物生产epa近年来成为了研究热点，微生物来源的epa具有生产安全，不受季节限定等优点，被认为是未来最有潜力的epa生产来源。
2、裂壶藻(schizochytrium limacinum)又称裂殖壶菌，是一类高产dha的海洋微藻类，同时也能生产epa和n-3dpa等多不饱和脂肪酸，但野生型菌株epa和n-3dpa的产量低、无法满足产业化生产所需。因此，如何提高菌株的epa产量使其能产业化是相关研究人员和公司所关注的重点。许多研究表明,细胞内ros是含油微生物脂质积累的信号，裂壶藻的fas代谢途径需要消耗氧气进行,尽管大部分氧气消耗用于菌体生长及油脂积累,但是因氧气而产生的活性氧(ros)损伤不可避免。过量的ros会造成蛋白质、脂质及其他生长代谢物损伤,甚至影响菌体的生长周期。
3、抗氧化剂是一种可以清除自由基，缓解过量的自由基对细胞损害的一种物质，此外一些水溶性抗氧化剂作为外源添加剂可能会参与裂壶藻的代谢过程。目前通过外源添加抗氧化剂调节裂壶藻epa产量尚未见报道。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的不足之处，本申请提供一种抗氧化剂提高裂壶藻epa产量的生产方法及其应用，以解决epa补充剂主要是鱼油提取造成的鱼油资源不丰富，价格昂贵、鱼腥味大、产业化困难的缺陷，本申请提供的方法能够有效的提高裂壶藻epa发酵产量，具有提取简单、生产安全，不受季节限定的优势，是一种绿色的epa原料来源。
2、为实现以上目的，本申请提供的技术方案如下：
3、本申请一方面提供了一种提高裂壶藻epa产量的生产方法，其特征在于，在裂壶藻的发酵培养基中或发酵培养过程中添加抗氧化剂。
4、在一些实施例中，所述抗氧化剂为水溶性抗氧化剂，选自以下中的至少一种：儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子酸丙酯、d-异抗坏血酸钠、抗坏血酸、植酸、阿魏酸。
5、在一些实施例中，所述抗氧化剂为水溶性抗氧化剂，选自以下中的至少两种：儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子酸丙酯、d-异抗坏血酸钠、抗坏血酸、植酸、阿魏酸。
6、在一些实施例中，所述抗氧化剂的浓度：0<所述抗氧化剂的浓度≤1g/l。
7、在一些实施例中，表没食子儿茶素没食子酸酯0.15～0.3g/l。
8、在一些实施例中，没食子酸丙酯0.01～0.1g/l。
9、在一些实施例中，阿魏酸0.06～0.4g/l。
10、在一些实施例中，所述提高裂壶藻epa产量的生产方法，包括如下步骤：
11、步骤s1：将裂壶藻活化后，转接于种子培养基以获得一级种子；
12、步骤s2：将步骤s1中获得的一级种子转接于含抗氧化剂的发酵培养基中进行发酵培养获得油脂。
13、在一些实施例中，所述提高裂壶藻epa产量的生产方法，包括如下步骤：
14、步骤s1：将裂壶藻活化后，转接于种子培养基以获得一级种子；
15、步骤s2：将步骤s1中获得的一级种子转接于发酵培养基中培养48h-96h后加入抗氧化剂继续进行发酵培养获得油脂。
16、在一些实施例中，本专利技术所述的接种或转种等的接种量为常规接种了。具体例如可以是3-10％。
17、在一些实施例中，所述提高裂壶藻epa产量的生产方法，包括如下步骤：
18、步骤s1：将裂壶藻接种于种子培养基中进行活化后将其转接于种子培养基以获得一级种子；
19、步骤s2：将步骤s1中获得的一级种子转接于含抗氧化剂的发酵培养基中进行发酵培养获得油脂或将步骤s1中获得的一级种子转接于发酵培养基中培养48h-96h后加入抗氧化剂继续进行发酵培养获得油脂。
20、在一些实施例中，所述发酵条件包括：发酵温度25-28℃，转速180-220rpm，发酵ph在5.5-6.0。
21、在一些实施例中，步骤s1和步骤s2中所述种子培养基或发酵培养基包括：葡萄糖45-55g/l，无水硫酸钠10-20g/l，氯化钾0.2-0.8g/l，无水硫酸镁3.5-4.7g/l，硫酸钾0.5-0.8g/l，磷酸二氢钾0.5-1.5g/l，硫酸铵0.5-1.5g/l，无水氯化钙0.1-0.3g/l。
22、优选的，在一些实施例中，步骤s1和步骤s2中所述种子培养基或发酵培养基包括：葡萄糖50g/l，无水硫酸钠15g/l，氯化钾0.5g/l，无水硫酸镁4.1g/l，硫酸钾0.65g/l，磷酸二氢钾1g/l，硫酸铵1g/l，无水氯化钙0.17g/l。
23、在一些实施例中，所述抗氧化剂的dpph自由基清除率在80-95％之间。
24、优选的，在一些实施例中，所述抗氧化剂的dpph自由基清除率在80-90％之间。
25、更优选的，在一些实施例中，所述抗氧化剂的dpph自由基清除率在90-95％之间。
26、本申请另一方面提供一种抗氧化剂在提高裂壶藻epa产量中的应用。
27、在提高裂壶藻epa产量中的应用主要是指在提高裂壶藻epa产量的裂壶藻发酵中添加。
28、本申请的有益效果是：与现有技术相比，本申请提供的一种抗氧化剂提高裂壶藻epa产量的方法，具有如下优势：通过添加外源添加剂抗氧化剂清除自由基，缓解过量的自由基对细胞损害，参与裂壶藻的代谢过程，提高裂壶藻epa产量，相比于传统鱼油提取方法，具有提取简单、生产安全，不受季节限定的优势，是一种绿色的epa原料来源。
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1.一种提高裂壶藻EPA产量的生产方法，其特征在于，在裂壶藻的发酵培养基中或发酵培养过程中添加抗氧化剂。
2.根据权利要求1中所述的生产方法，其特征在于，所述抗氧化剂为水溶性抗氧化剂，选自以下中的至少一种或至少两种：儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子酸丙酯、D-异抗坏血酸钠、抗坏血酸、植酸、阿魏酸；其中，0<所述抗氧化剂的浓度≤1g/L。
3.根据权利要求1或2所述的提高裂壶藻EPA产量的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.权利要求3中所述的生产方法，其特征在于，步骤S1和步骤S2中所述种子培养基或发酵培养基包括：葡萄糖45-55g/L，无水硫酸钠10-20g/L，氯化钾0.2-0.8g/L，无水硫酸镁3.5-4.7g/L，硫酸钾0.5-0.8g/L，磷酸二氢钾0.5-1.5g/L，硫酸铵0.5-1.5g/L，无水氯化钙0.1-0.3g/L。
5.权利要求3中所述的生产方法，其特征在于，步骤S1和步骤S2中所述种子培养基或发酵培养基包括：葡萄糖50g/L，无水硫酸钠15g/L，氯化
6.根据权利要求1中所述的生产方法，其特征在于，所述抗氧化剂的DPPH自由基清除率在80-95％之间。
7.根据权利要求6中所述的生产方法，其特征在于，所述抗氧化剂的DPPH自由基清除率在90-95％之间。
8.根据权利要求1中所述的生产方法，其特征在于，所述发酵条件包括：发酵温度25-28℃，转速180-220rpm，发酵pH在5.5-6.0。
9.一种抗氧化剂在提高裂壶藻EPA产量中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种提高裂壶藻epa产量的生产方法，其特征在于，在裂壶藻的发酵培养基中或发酵培养过程中添加抗氧化剂。
2.根据权利要求1中所述的生产方法，其特征在于，所述抗氧化剂为水溶性抗氧化剂，选自以下中的至少一种或至少两种：儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子酸丙酯、d-异抗坏血酸钠、抗坏血酸、植酸、阿魏酸；其中，0<所述抗氧化剂的浓度≤1g/l。
3.根据权利要求1或2所述的提高裂壶藻epa产量的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.权利要求3中所述的生产方法，其特征在于，步骤s1和步骤s2中所述种子培养基或发酵培养基包括：葡萄糖45-55g/l，无水硫酸钠10-20g/l，氯化钾0.2-0.8g/l，无水硫酸镁3.5-4.7g/l，硫酸钾0.5-0.8g/l，磷酸二氢钾0.5-1.5g/l，硫酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈礼毅，钟惠昌，陈水荣，陈镕，赵小龙，
申请(专利权)人：厦门汇盛生物有限公司，
类型：发明
国别省市：
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