帕金森病早期诊断标志物制造技术

本文描述了一种检测帕金森病（ＰＤ）发病的方法以及对用于检测其发病的生物标志物的鉴定。本发明专利技术涉及对包含Ｐｅｒ１和Ｂｍａｌ１信使ＲＮＡ之样品的检测和／或监测，所述信使ＲＮＡ可单独或组合用以确定帕金森病或其任意发展状态是否存在。例如，检测外周白细胞中Ｐｅｒ１和Ｂｍａｌ１信使ＲＮＡ为帕金森病诊断和监测提供了一种有用的工具。

【技术实现步骤摘要】
帕金森病早期诊断标志物
技术介绍
本专利技术总体而言涉及分子生物学、神经生物学和药理学领域以及帕金森病(Parkinson's Disease, PD )的诊断、预后或预防性/治疗性治疗。帕金森病是一种进行性的神经退行性疾病，其特征为黑质中多巴胺神 经元缺失和存活神经元中存在细胞质内含物(路易体，Lewy bodies )。帕 金森病的经典临床特征包括进行性震颤、强直和运动l變。然而，在其早 期阶段，由于缺乏临床症状和可信的生物标志物使得PD #^被诊断。另 外，PD可能被误诊为其它一些疾病，包括，但不仅限于，例如特发性 震颤和多系统萎缩等，这进一步干扰了任何潜在诊断。PD诊断可以基于 神经表现，这些只在大脑脆弱区域内实体细胞损失之后才显现出来。专利技术概要本专利技术总体而言涉及样品的分析测试以及用于PD诊断、预后或者预 防性/治疗性治疗的生物标志物说明的各个方面。其中一个方面，本文提供 了一种诊断或监测帕金森病的方法，其包括(a)确定在一个或多个时间 点取自受试者的样品中5wflW或i^W的表达水平，和(b )将样品中5w"//或的表达水平和参考水平相比较，其中样品中^Wfl//或尸ei^表达水平和参考水平的差异指示出受试者患有帕金森病或其分级。在一个实施方案中，所述参考水平是指未患帕金森病的受试者对照群 体中或的表达水平。在一个实施方案中，所述参考水平是指 未患帕金森病的个体中或i^r 的表达水平。在一个实施方案中， 所述参考水平是指受试者之前的5maW或/Vi^的表达水平。在一个实施 方案中，所述参考水平是指受试者在接受治疗方案之前5附"W或尸eW的 表达水平。在一个实施方案中，所述样品为血液样品。在一个说明性实施方案中， 所述样品包含外周白细胞。在一个实施方案中，测量表达水平的步骤是通过定量PCR实施。在一 个实施方案中，测量表达水平的步骤是通过northern印迹或点印迹实施。在一个实施方案中，测定表达水平的步骤包括将或iVW的 mRNA的量相对于管家基因mRNA的量进行归一化。在一个实施方案中， 所述管家基因选自hCDK4、 p-肌动蛋白、3-磷酸甘油醛脱氩酶和18S rRNAB在一个实施方案中，所述一个或多个时间点包括至少 一个处于昼夜循 环中夜间部分的时间点。在一个实施方案中，所述一个或多个时间点包括 选自约23:00至约9:00之间的至少一个时间点。在一个实施方案中，所述 一个或多个时间点来自选自下列的时间段20:00到22:00， 23:00到1:00, 5:00到7:00,以及8:00到10:00。在一个举例性实施方案中，所述一个或 多个时间点选自约21:00、约00:00、约06:00和约09:00。在一个实施方案中，比较i /imW或表达水平与参考水平的步骤 是通过Mann-Whitney U检验来实施的。在一个实施方案中，受试者5w"// 或表达水平与参考水平的差异与受试者帕金森病分级正相关。在一个 实施方案中，帕金森病分级是通过Hoehn & Yahr分级系统测定的。在一 个实施方案中，确定受试者是否患有帕金森病或其分级的步骤是对Hoehn & Yahr分级系统所确定的分级和受试者必/MflW或Pw/表达水平与参考水 平的差异之间进行Pearson相关性分析。在一个实施方案中，帕金森病的 分^it过UPDRS量表进fr^价。在一个实施方案中，相比于参考水平，受试者丑mflW表达水平在选自 约21:00、约00:00和约06:00的一个或多个时间点处降^f氐指示出受试者患 有帕金森病或其分级。在一个实施方案中，相比于参考水平，受试者/> 7 表达水平在约00:00、约06:00或同时在约00:00和约06:00时升高指示出 受试者患有帕金森病或其分级。在一个实施方案中，相比于参考水平，受 试者表达水平在21:00时降低指示出受试者患有帕金森病或其分级。在一些示例性实施方案中，所述方法另外包括通过测量来源于受试者 取自至少两个时间点之间的样品中和/或5附flW的表达水平以及比较 至少两个时间点之间和/或5maW的表达水平来确定受试者中和 /或5附flW表ii^式的步骤。在一个实施方案中，受试者在约21:00 和约00:00时表达水平比约06:00和09:00时低的表i^漠式指示出受试者患 有帕金森病。在一些示例性实施方案中，本方法还包括4^据受试者所患帕金森病以 及其分m择治疗方案的步骤。在一些示例性实施方案中，本方法还包括在治疗方案施用给受试者之后测量丑附fl/2或/Vr2表达水平的步骤。在本专利技术的一个方面，本文提供了一种筛选可用于治疗帕金森病的化 合物的方法，其包括(a)对施用了测试化合物的受试者的样品中必/im// 或的表达水平进行测量；(b)将5wflW或i^f/的表达水平和参考水 平相比较；和(c)确定所述测试化合物的效力，其中5w"W或iVW的表 达水平相比于参考水平的差异指示出所述测试化合物可用于治疗受试者 的帕金森病。在一个实施方案中，所述参考水平是接受所述测试化合物之 前受试者的A/waW或iVW表达水平。在本专利技术的一个方面，本文提供了 一种诊断或监测受试者帕金森病的 试剂盒，它包含(a) —种或多种用于测量受试者样品中5附iiW或/V" 表达水平的检测试剂；(b)至少一例来自未患帕金森病的受试者对照, 的对照样品；和(c)一种或多种检测试剂的使用说明。在一个实施方案 中，所述一种或多种检测试剂包括用于必附flW mRNA的RT-PCR的引物。 在一个实施方案中，所述一种或多种检测试剂包括用于/VW mRNA的 RT-PCR的引物。在本专利技术的一个方面，本文提供了一种或多种测量受试者样品中 丑wa/7或表达水平的检测试剂用于制备诊断或监测帕金森病的药 剂中的用途。在一个实施方案中，本文提供了一种或多种测量受试者样品中 5附fl//或表达水平的检测试剂用于制备诊断或监测帕金森病的药 剂中的用途，其中(a)所述一种或多种测量受试者样品中或 户w7表达水平的检测试剂确定在一个或多个时间点取自受试者的样品 中5附"W或的表达水平；和(b )将所述样品中5w"W或表 达水平和5附flW或户erJ表达的参考水平进行比较；其中所述样品中 丑w"//或表达水平和参考水平的差异指示出受试者患有帕金森病 或其分级。在一个实施方案中，所述参考水平是指未患帕金森病的受试者对照群 体中5挑flW或i^r7的表达水平。在一个实施方案中，所述参考水平是指未患帕金森病的个体中或i^r 的表达水平。在一个实施方案中， 所述参考水平是指受试者之前的或iVW的表达水平。在一个实施 方案中，所述参考水平是指受试者在接受治疗方案之前或/VW的 表达水平。在一个实施方案中，所述样品为血液样品。在一个说明性实施方案中， 所述样品包含外周白细胞。在一个实施方案中，使用定量PCR确定所述表达水平。在另一个实 施方案中，使用northern印迹或点印迹确定所述表达水平。在一个实施方案中，所述表达水平的确定包括将"挑fl/7或PeW的 mRNA的量相对于管家基因mRNA的量进行归一化。在一个实施方案 中，所述管家基周选自hCDK4、 p-肌动蛋白、3-磷酸甘油醛脱氢酶和 18S rRNA。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种或多种测量受试者样品中Ｂｍａｌ１或Ｐｅｒ１表达水平的检测试剂用于制备诊断或监测帕金森病的药剂中的用途。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈彪，蔡彦宁，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]