使用包括热休克蛋白或α-2-巨球蛋白的组合物治疗癌症和传染病的方法技术

本发明专利技术涉及预防和治疗传染病与癌症的方法和组合物。本发明专利技术的方法包括给予（ａ）一种组合物，包括衍生自抗原细胞或病毒颗粒的抗原蛋白或抗原肽和一种或多种不同的热休克蛋白的复合物组；和（ｂ）基于非热休克蛋白和非α－２－巨球蛋白的治疗方式。用于产生抗原肽的种群或蛋白制品包括至少５０％的不同蛋白或至少５０种不同的抗原细胞或病毒颗粒的蛋白。制备抗原肽的方法，包括用一或多种蛋白酶消化抗原细胞、其细胞组分或病毒颗粒的蛋白制品，或将蛋白制剂暴露于ＡＴＰ、盐酸胍（ｇｕａｎｉｄｉｕｍ　　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）和／或酸性条件中。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是在政府支持下在国立卫生研究所(the NationalInstitutes of Health)颁发的许可号CA/A184479下作出的。美国政府在本专利技术中享有某些权利。1.前言本专利技术涉及预防和治疗传染病，以及原发性和转移性肿瘤疾病的方法和组合物。在预防和治疗传染病和癌症的实践中，将包括抗原细胞和/或其消化产物的胞液和膜-衍生蛋白的组合物，与热休克蛋白和/或α-2-巨球蛋白复合，以扩大对肿瘤以及传染物的免疫反应。还包括这样的组合物在与其它的治疗方式联用中的用途。2.专利技术背景2.1.热休克蛋白热休克蛋白(HSPs)，也称为应激反应蛋白，是首先被识别为细胞在热休克应答中合成的蛋白。基于分子量，HSPs已经被分为五个家族，HSP100，HSP90，HSP70，HSP60和smHSP。其后发现了这些家族的许多成员是响应于其它应力刺激而诱发的，包括营养剥夺，代谢性中断，氧自由基，和胞内病原体感染(见Welch，1993年5月，Scientific American 56-64；Young，1990，Annu.Rev.Immunol.8401-420；Craig，1993，Science 2601902-1903；Gething等人，1992，Nature 35533-45；和Lindquist等人，1988，Annu.Rev.Genetics 22631-677)。对热休克及其它生理应激反应的细胞应答进行研究，显示HSPs不仅参与这些不利条件下的细胞保护，而且参与未应激细胞中的基本生化和免疫过程。HSPs可以完成各种不同的伴侣功能。例如，定位于细胞胞浆、细胞核、线粒体或内质网的HSP70家族成员(Lindquist等人，1988，Ann.Rev.Genetics 22631-677)，参与抗原向免疫系统细胞的递呈，还参与正常细胞的蛋白转换、折叠和装配。HSPs能够与蛋白或肽结合，并在三磷酸腺苷(ATP)存在或酸性条件下释放所结合的蛋白或肽(Udono和Srivastava，1993，J.Exp.Med.1781391-1396)。Srivastava等人说明了针对甲基胆蒽所诱导的近亲繁殖小鼠肉瘤的免疫应答(1988，Immunol.Today 978-83)。在这些研究中，发现负责对这些肿瘤分别产生独特免疫原性的分子是96kDa的糖蛋白(gp96)和84至86kDa的细胞内蛋白(Srivastava等人，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 833407-3411；Ullrich等人，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 833121-3125)。用从特定肿瘤分离的gp96或84/86接种小鼠可使小鼠对这种肿瘤产生免疫力，但对抗原性截然不同的肿瘤则无免疫力。对编码gp96和p84/86的基因进行分离和特性鉴定，发现它们之间有着显著的同源性，显示gp96和p84/86分别是同一热休克蛋白的内质网和胞液的对应物(Srivastava等人，1988，Immunogenetics 28205-207；Srivastava等人，1991，Curr.Top.Microbiol.Immunol.167109-123)。此外，发现HSP70可激发对其分离起源肿瘤的免疫应答，对抗原性截然不同的肿瘤则不能激发免疫应答，但和肽脱离的HSP70丧失了其免疫原活性(Udono和Srivastava，1993，J.Exp.Med.1781391-1396)。这些观察结果表明热休克蛋白本身不具备免疫原性，但可与抗原肽形成非共价复合物，该复合物可以引起对抗原肽的特异性免疫(Srivastava，1993，Adv.Cancer Res.62153-177；Udono等人，1994，J.Immunol.，1525398-5403；Suto等人，1995，Science 2691585-1588)。从癌细胞提纯的HSPs和肽的非共价复合物可用于治疗和预防癌症，其见于1996年4月11日提交的WO 96/10411号PCT出版物和1997年3月20日提交的WO 97/10001号PCT出版物(分别为于1998年5月12日公布的No.5,750,119号美国专利和于1998年11月17日公布的No.5,837,251号美国专利，将其全部引入本文中作为参考)。HSP-肽复合物的分离和纯化已有描述，例如从病原体感染细胞分离和纯化，并用于诸如病毒、包括细菌、原生动物、真菌和寄生虫在内的其它细胞内病原体等所致感染的治疗和预防(见，例如，1995年9月21日提交的WO 95/24923号PCT出版物)。还可以用应激蛋白和抗原肽的体外复合来制备免疫原性应激蛋白-抗原复合物，1997年3月20日提交的WO 97/10000号PCT出版物(2000年2月29日公布的No.6,030,618号美国专利)描述了该类复合物在癌症和传染病的治疗和预防中的应用。1997年3月20日提交的WO 97/10002号PCT出版物(参见1999年11月16日公布的No.5,985,270号美国专利)描述了使用应激蛋白-抗原复合物在体外致敏用于过继性免疫疗法的抗原呈递细胞。2.2.α2-巨球蛋白α-巨球蛋白是包含C3、C4和C5补体组分的结构相关蛋白的蛋白超家族成员。人类血浆蛋白α-2-巨球蛋白(α2M)是720kDa同源四聚体蛋白，起初认为其是蛋白酶抑制因子及血浆和炎性流体蛋白水解酶清道夫分子(综述见Chu和Pizzo，1994，Lab.Invest.71792)。α2M是以具有1474个氨基酸残基的前体物形式合成的。前23个氨基酸起信号序列的作用，将其切去后获得带有1451个氨基酸残基的成熟蛋白(Kan等人，1985，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.822282-2286).α2M以共价方式与含亲核氨基酸侧链的蛋白和肽混杂地结合(Chu等人，1994，Ann.N.Y.Acad.Sci.737291-307)，并将它们靶向表达α2M受体(α2MR)的细胞(Chu和Pizzo，1993，J.Immunol.15048)。α2M与α2M受体的结合由α2M的羧基末端介导(Holtet等人，1994，FEBS Lett.344242-246)，关键的残基已得以鉴定(Nielsen等人，1996，J.Biol.Chem.27112909-12912)。通常认为α2M具有抑制蛋白酶的活性，其通过多重结合位点与各种蛋白酶结合(见例如，Hall等人，1981，Biochem.Biophys.Res.Commun.100(1)8-16)。蛋白酶与α2M的相互作用导致复杂的、称为转化的结构重排，这是蛋白酶被硫酯“俘获”之后在α2M的“bait(诱饵)”区内断裂的结果。构型变化使受体结合所需要的残基暴露出来，使α2M蛋白酶复合物与α2MR结合。甲胺可以诱导类似于由蛋白酶诱导的构型变化和切割。不能被受体辨别的α2M的未断裂形态，常常称其为“慢”形态(s-α2M)。断裂形态被称为“快”形态(f-α2M)(综述见Chu等人，1994，Ann.N.Y.Acad.Sci.737291-307)。最近还发现α2MR可以与诸如gp96、本文档来自技高网...

【技术保护点】
治疗或预防癌症的方法，包括给予需要这种治疗或预防的患者包含一组复合物的组合物，所述复合物包括（ａ）热休克蛋白和／或α２－巨球蛋白，和（ｂ）抗原蛋白，其中所述一组复合物是通过热休克蛋白或α２－巨球蛋白与下列物质形成复合物来制备的：（ｉ ）抗原蛋白，其是存在于所述类型癌细胞中的至少５０％的不同蛋白，或（ｉｉ）至少５０种存在于所述类型癌细胞中的不同蛋白；和给予所述患者至少一种不包括热休克蛋白或α２－巨球蛋白的治疗方式。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：PK斯里瓦斯塔瓦，
申请(专利权)人：康涅狄格大学健康中心，
类型：发明
国别省市：US[美国]