【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学，尤其是涉及一种lta4h蛋白在制备预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性试剂盒中的应用。
技术介绍
1、肝癌是全球第六大常见癌症，也是癌症相关死亡的第三大原因。肝癌(hcc)占肝癌总数的80％以上。尽管hcc的早期诊断也能通过确保在早期阶段发现疾病，从而使治愈性治疗成为可能。然而，由于现有监测工具的敏感性不足以及在临床实践中的使用不足，大多数hcc患者仍在疾病晚期被诊断出来，进而错失治愈性治疗的最佳时期。同样，尽管自免疫检查点抑制剂(ici)治疗出现以来，晚期hcc患者的预后有所改善，但只有约30％的患者有客观反应。因此，寻找有效的诊断方法、治疗靶点及联合治疗策略以延长肝癌患者生存时间及治疗疗效是一个亟待解决的科学难题。
2、白三烯a4水解酶(lta4h)是一种多功能锌金属酶，具有环氧化物水解酶和氨肽酶活性。其氨肽酶功能通常与处理参与炎症和宿主防御机制的肽有关。作为环氧化物水解酶，lta4h促进了白三烯a4(lta4)向白三烯b4(ltb4)的转化。ltb4是一种重要的趋化因子，通过blt1和blt2受体主要调节各种炎症反应。目前研究主要集中在lta4h在肿瘤进展中的作用，发现该酶在多种人类恶性肿瘤中的表达水平较高。这些研究主要强调lta4h在肿瘤细胞中的生物功能，特别是其通过调节结直肠癌、胰腺癌和皮肤癌细胞增殖来促进肿瘤进展。然而，lta4h在调节肝癌免疫微环境重塑和肝癌发生发展中的作用和机制未见报道，lta4h表达与肝癌患者预后及免疫治疗疗效的关系也没有相关报道。
技
1、为了解决上述问题，本专利技术的目的是提供一种lta4h蛋白在制备预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性试剂盒中的应用。本专利技术提供的基于分子标记物(lta4h蛋白)的评估方法基于常规免疫组化技术，具有成本低、操作简单、技术可靠性高等优点，适用于临床试剂盒开发。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
3、本专利技术的第一个目的是提供lta4h蛋白(肝细胞癌组织中的lta4h蛋白)在制备肝癌预后和/或免疫治疗响应性的试剂和/或试剂盒中的应用。
4、在本专利技术的一个实施方式中，所述应用采用免疫组化方法检测lta4h蛋白的表达评分。
5、在本专利技术的一个实施方式中，所述预后包括检测、预后评估、复发监控和免疫治疗疗效评估。
6、本专利技术的第二个目的是提供一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性试剂盒，所述试剂盒中含有lta4h的单克隆抗体或多克隆抗体、免疫组化试剂。
7、在本专利技术的一个实施方式中，免疫组化试剂包括二甲苯、乙醇、3％h2o2溶液、1％bsa封闭液、dab显色剂、苏木素和辣根过氧化物酶标记的抗兔igg。
8、本专利技术的第三个目的是提供一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，所述评分模型如下：
9、肝癌组织切片中lta4h蛋白表达评分低于lta4h蛋白表达评分阈值时，表示肝癌预后效果好，和/或，免疫治疗响应性好：；
10、肝癌组织切片中lta4h蛋白表达评分高于lta4h蛋白表达评分阈值时，表示肝癌预后效果差，和/或，免疫治疗响应性差；
11、其中，lta4h蛋白表达评分为免疫组化染色光密度评分和染色阳性率评分的乘积。
12、在本专利技术的一个实施方式中，lta4h蛋白表达评分阈值为4。
13、在本专利技术的一个实施方式中，所述免疫组化染色光密度评分规则如下：
14、当无阳性着色(阴性)时计0分，当淡黄色着色(弱阳性)时计1分，当棕黄色着色(阳性)时计2分，当棕褐色着色(强阳性)时计3分。
15、在本专利技术的一个实施方式中，所述免疫组化染色阳性率评分规则如下：
16、当免疫组化阳性细胞百分比≤25％时计1分，
17、当免疫组化阳性细胞百分比为26％-50％时计2分，
18、当免疫组化阳性细胞百分比为51％-75％时计3分，
19、当免疫组化阳性细胞百分比为＞75％时计4分。
20、具体的，1)利用组织芯片制作仪制作组织芯片，2)采用imagescope(aperio公司)软件对整张组织芯片进行扫描，3)对每个芯片点进行免疫组化染色光密度评分(0-3)及免疫组化染色阳性率评分(0-4)，利用免疫组化染色光密度评分(0-3)乘以免疫组化染色阳性率评分(0-4)得到lta4h蛋白表达评分，并设定以lta4h蛋白表达评分阈值为4。
21、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
22、本专利技术首次提出利用lta4h的表达水平判断肝癌患者预后及免疫治疗疗效，并提供将lta4h蛋白作为分子标志物的检测试剂盒，利用lta4h单克隆抗体以及免疫组化实验试剂，分析lta4h蛋白在肝癌组织中的表达评分，指导肝癌患者预后及免疫治疗疗效评估，对于肝癌患者的诊疗具有重要的指导意义。
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1.LTA4H蛋白在制备肝癌预后和/或免疫治疗响应性的试剂和/或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用采用免疫组化方法检测LTA4H蛋白的表达评分。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述预后包括检测、预后评估、复发监控和免疫治疗疗效评估。
4.一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有LTA4H的单克隆抗体或多克隆抗体、免疫组化试剂。
5.一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，所述评分模型如下：
6.根据权利要求5所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，LTA4H蛋白表达评分阈值为4。
7.根据权利要求5所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，所述免疫组化染色光密度评分包括0分、1分、2分和3分。
8.根据权利要求7所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，当无阳性着色时计0分，当淡黄色着色时计1分，当棕黄色着色时计2分，当棕褐色着
9.根据权利要求5所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，所述免疫组化染色阳性率评分包括1分、2分、3分和4分。
10.根据权利要求9所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，当免疫组化阳性细胞百分比≤25％时计1分，
...【技术特征摘要】
1.lta4h蛋白在制备肝癌预后和/或免疫治疗响应性的试剂和/或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用采用免疫组化方法检测lta4h蛋白的表达评分。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述预后包括检测、预后评估、复发监控和免疫治疗疗效评估。
4.一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有lta4h的单克隆抗体或多克隆抗体、免疫组化试剂。
5.一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，所述评分模型如下：
6.根据权利要求5所述的一种预测肝癌预后和/或免疫治疗响应性的评分模型，其特征在于，lta4h蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：王红阳，杨帅，陈磊，
申请(专利权)人：复旦大学附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：
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