System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种重组A型人源化III型胶原蛋白及其表达工程菌制造技术_技高网

一种重组A型人源化III型胶原蛋白及其表达工程菌制造技术

技术编号:42687363 阅读:15 留言:0更新日期:2024-09-10 12:35
本发明专利技术涉及一种重组A型人源化III型胶原蛋白及其表达工程菌,属于基因工程领域。发明专利技术提供了如SEQ ID No.1所示的重组A型人源化三型胶原蛋白氨基酸序列,该重组A型人源化三型胶原蛋白通过毕次酵母在胞外的高水平表达,其培养易于放大,并可利用高密度发酵方式高产目的蛋白。本发明专利技术提供的重组A型人源化三型胶原蛋白能够应用于生物医药、化妆品和医疗器械的制备和生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域,具体涉及一种重组a型人源化iii型胶原蛋白及其表达工程菌。


技术介绍

1、胶原蛋白是生物高分子材料,是动物结缔组织的主要成分,是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白,占蛋白质总量的30%左右,具有良好的生物相容性、低免疫原性和组织可降解吸收性,在创面止血、愈合,缺损组织的填充、修复及重建,药物载体和组织工程等方面有广泛应用,是理想的医用生物材料。目前,胶原蛋白已被广泛应用于止血剂与创面敷料、生物补片、骨修复材料、药物释放载体及作为组织工程支架等方面;临床使用显示,胶原蛋白对缺损组织的修复、再生及重建有着显著促进作用。

2、目前,胶原蛋白获取方法主要由2种途径,一种是动物组织提取,这种方法提取的胶原蛋白虽然具有良好生物相容性、和降解低性等特性,但缺乏足够的机械强度、具有交叉污染的风险。另一种方法则是基因工程法,此方法的优点是人胶原蛋白的质量可控、加工性强、水溶性好、周期性短、较低排斥反应等,但仍然存在纯化工艺复杂、生产成本高、表达出来的蛋白与天然蛋白活性相差很大等缺点。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种重组a型人源化iii型胶原蛋白及其表达工程菌。本专利技术提供的重组a型人源化iii型胶原蛋白可以通过表达工程菌表达,其表达出来的蛋白质的生物学功能良好,生产成本低,更容易实现产业化。

2、为了实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、本专利技术提供了一种重组a型人源化iii型胶原蛋白,其氨基酸序列为seq id no.1所示。

4、本专利技术还提供了一种编码上述蛋白的基因。

5、优选的,所述基因的核苷酸序列为seq id no.2所示。

6、本专利技术还提供了一种含有上述基因的表达载体。

7、本专利技术还提供了一种表达工程菌,所述工程菌含有表达重组a型人源化iii型胶原蛋白的基因。

8、优选的,所述工程菌含有seq id no.2所示基因。

9、本专利技术还提供了一种表达工程菌的构建方法,包括以下步骤:

10、(1)将seq id no.2所示的基因序列克隆到真核表达载体中,得到重组质粒;

11、(2)再将所述重组质粒转染至酵母细胞中,得到酵母表达工程菌。

12、优选的,所述酵母为毕赤酵母。

13、优选的,所述构建方法还包括:培养、高拷贝筛选步骤(2)中所述毕赤酵母表达工程菌。

14、优选的,表达载体为ppic9k。

15、本专利技术提供了一种制备重组a型人源化iii型胶原蛋白的方法,使用所述表达工程菌表达重组a型人源化iii型胶原蛋白,然后进行分离纯化。

16、本专利技术还提供了一种上述的重组a型人源化iii型胶原蛋白在制备药品、化妆品、食品、保健品、医疗器械中的应用。

17、有益效果:

18、本专利技术提供的重组a型人源化三型胶原蛋白基因序列与人源iii型胶原蛋白基因序列相应部分100%相同,不存在氨基酸的替换或者突变,因此,具有良好的亲水性及以及高活性,使得其在生物医学材料、美容化妆品及护肤品领域等有应用潜力。

19、本专利技术提供的重组a型人源化三型胶原蛋白的制备方法具有大规模、简便、成本较低等优势。

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【技术保护点】

1.一种重组A型人源化III型胶原蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列为SEQ IDNO.1所示。

2.一种编码权利要求1所述重组A型人源化III型胶原蛋白的基因。

3.根据权利要求2所述基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。

4.一种含有权利要求2或3所述基因的表达载体。

5.一种表达工程菌,其特征在于,所述工程菌含有表达权利要求1所述重组A型人源化III型胶原蛋白的基因。

6.根据权利要求5所述的工程菌,其特征在于,所述工程菌含有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

7.一种表达工程菌的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

8.根据权利要求7所述的表达工程菌的构建方法,其特征在于,所述真核表达载体为pPIC9K。

9.一种制备重组A型人源化III型胶原蛋白的方法,其特征在于,使用权利要求5所述表达工程菌表达重组A型人源化III型胶原蛋白,然后进行分离纯化。

10.权利要求1所述重组A型人源化III型胶原蛋白或权利要求9所述方法制备得到的重组A型人源化III型胶原蛋白在制备药品、化妆品、食品、保健品、医疗器械中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种重组a型人源化iii型胶原蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列为seq idno.1所示。

2.一种编码权利要求1所述重组a型人源化iii型胶原蛋白的基因。

3.根据权利要求2所述基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列为seq id no.2所示。

4.一种含有权利要求2或3所述基因的表达载体。

5.一种表达工程菌,其特征在于,所述工程菌含有表达权利要求1所述重组a型人源化iii型胶原蛋白的基因。

6.根据权利要求5所述的工程菌,其特征在于,所述工程菌含有seq i...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡静波殷利红张晓静
申请(专利权)人:浙江暨北生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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