一种iPSC途径的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法技术

技术编号:42668612 阅读:38 留言:0更新日期:2024-09-10 12:23
本发明专利技术公开了一种iPSC途径的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法。本发明专利技术所公开的方案具体采用合适培养体系,同时基于全阶段3D培养,通过6个阶段的培养构建多谱系人肝脏类器官。本发明专利技术解决了现有技术中存在人肝脏类器官培养过程中出现的大小均匀度较低,经过传代后出现的成球能力减弱,类器官传代后存活率降低等问题。本发明专利技术提升了通过iPSC途径培养形成的人肝脏类器官传代后的类器官成球能力和存活率,以及类器官的可传代数。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于干细胞生物学及临床医学,涉及一种通过ipsc途径的多谱系人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法。


技术介绍

1、肝脏类器官的出现极大地促进了不同类型肝脏疾病的研究进展,人肝脏类器官表现出相似结构和功能,被认为具有还原人肝脏完整功能的潜力,不仅为研究人肝脏疾病提供了新的模型,且使用多谱系肝脏类器官移植来治疗肝脏疾病在临床医学上具有巨大的应用前景。

2、随着对肝脏类器官构建技术的日益成熟,不同体系的肝脏类器官培养方法陆续被建立。目前已出现的技术均采取前期2d培养,中后期3d培养的模式。然而,人肝脏类器官培养过程中却存在着大小均匀度较低,且随着传代次数的增多,类器官的成球能力减弱,类器官传代后存活率降低等问题。


技术实现思路

1、针对现有技术的缺陷或不足,本专利技术提供了一种ipsc途径的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法。

2、为此,本专利技术所提供的ipsc途径的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法包括:

3、步骤1,将bme、advanced dmem/f12和复苏本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种iPSC途径的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法,其特征在于,方法包括:

2.根据权利要求1所述的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法,其特征在于,方法还包括:利用步骤6获得的人肝脏类器官进行传代培养。

3.根据权利要求2所述的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法,其特征在于,方法还包括:步骤6获得的肝脏类器官以1:4-6的比例进行传代,每代培养周期为10-13天;当类器官生长密度达到70%-80%或大小达到200-300μm时,进行下一代培养。

4.根据权利要求1所述的人肝脏类器官全阶段3D培养构建方法,其特征在于,所述人胚胎干细胞选自人胚胎干细...

【技术特征摘要】

1.一种ipsc途径的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法,其特征在于,方法包括:

2.根据权利要求1所述的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法,其特征在于,方法还包括:利用步骤6获得的人肝脏类器官进行传代培养。

3.根据权利要求2所述的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法,其特征在于,方法还包括:步骤6获得的肝脏类器官以1:4-6的比例进行传代,每代培养周期为10-13天;当类器官生长密度达到70%-80%或大小达到200-300μm时,进行下一代培养。

4.根据权利要求1所述的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法,其特征在于,所述人胚胎干细胞选自人胚胎干细胞h9。

5.根据权利要求4所述的人肝脏类器官全阶段3d培养构建方法,其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴江维马俊林张晓陈家豪裴浩宇
申请(专利权)人:西北农林科技大学
类型:发明
国别省市:

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