CRISPR蛋白马达及其用于活细胞RNA成像的用途制造技术

本发明专利技术涉及CRISPR蛋白马达及其用于活细胞RNA成像的用途。本发明专利技术提供CRISPR蛋白马达，其包含CRISPR核糖核酸蛋白复合物(CRISP R RNP)、底物链修饰的支架纳米金(AuNP)、锚定链、摆动臂，所述CRI SPR RNP由Cas12a蛋白和crRNA组成，所述底物链一端与所述纳米金连接，另一端具有被所述纳米金淬灭的荧光基团，所述摆动臂的5'和3'端分别与所述锚定链的3'端和所述crRNA的5'端互补，所述crRNA与目标mi RNA互补。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及crispr蛋白马达及其用于活细胞rna成像的用途。

技术介绍

1、细胞内分子的运输是活细胞中的一个关键过程，自然发生的蛋白马达在这一过程中发挥着基本作用。这些马达沿着细胞骨架丝(如肌球蛋白、动力蛋白和驱动蛋白)移动分子，它们的持续运动对各种生命过程至关重要。一个典型的蛋白马达主要由四个元素组成，即驱动引擎、结合腿、行走轨道和功能货物。为了操纵生物体内的生物大分子，人们开发了人工蛋白马达来执行特定的功能。然而，使用自然发生的构建模块来设计和构建这些马达具有一定的挑战性，因为引擎蛋白的功能不能通过氨基酸序列来精确预测和设计。尽管通过结合不同马达系统的功能模块成功地创造了新的蛋白质马达，但引擎蛋白和细胞骨架轨道的不灵活性限制了用于复杂纳米机械任务的蛋白质马达的发展。受蛋白质马达的启发，人工dna马达已经被构建出来，使用dna分子作为构建模块，由于dna杂交的可编程性和基于沃森-克里克(watson-crick)碱基配对的动态构象变化，dna马达可以被定制为具有特定功能。各种类型的驱动引擎已被采用来驱动dna马达，如dna链位移，dna切割的酶催化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.CRISPR蛋白马达，其特征在于，包含CRISPR核糖核酸蛋白复合物(CRISPR RNP)、底物链修饰的支架纳米金(AuNP)、锚定链、摆动臂，所述CRISPR RNP由Cas12a蛋白和crRNA组成，所述底物链一端与所述纳米金连接，另一端具有被所述纳米金淬灭的荧光基团，所述摆动臂的5'和3'端分别与所述锚定链的3'端和所述crRNA的5'端互补，所述crRNA与目标miRNA互补。

2.权利要求1所述的CRISPR蛋白马达，其特征在于，所述锚定链、所述摆动臂和所述crRNA的摩尔比为1:1.2:5。

3.权利要求1或2所述的CRISPR蛋白马达，其特征在...

【技术特征摘要】

1.crispr蛋白马达，其特征在于，包含crispr核糖核酸蛋白复合物(crispr rnp)、底物链修饰的支架纳米金(aunp)、锚定链、摆动臂，所述crispr rnp由cas12a蛋白和crrna组成，所述底物链一端与所述纳米金连接，另一端具有被所述纳米金淬灭的荧光基团，所述摆动臂的5'和3'端分别与所述锚定链的3'端和所述crrna的5'端互补，所述crrna与目标mirna互补。

2.权利要求1所述的crispr蛋白马达，其特征在于，所述锚定链、所述摆动臂和所述crrna的摩尔比为1:1.2:5。

3.权利要求1或2所述的crispr蛋白马达，其特征在于，所述au np与所述cas12a蛋白的摩尔比为1:80以上，优选为1:100。

4.权利要求1或2所述的crispr蛋白马达，其特征在于，所述摆动臂包含pol...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭汉勇，袁爱姣，
申请(专利权)人：中国科学院生态环境研究中心，
类型：发明
国别省市：