树突状细胞靶向的类病毒体DVLP及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种树突状细胞靶向的类病毒体DVLP及其制备方法和应用。所述类病毒体DVLP由序列如SEQ ID NO.1所示的优化后的Sindbis病毒糖蛋白包裹VLP构成。其制备包括：优化野生型Sindbis病毒的囊膜蛋白氨基酸，得到SV‑G基因序列；构建SV‑G基因的表达载体pCMV‑SV‑G；将pCMV‑SV‑G、pRSV‑REV、抗原表达载体、pMDlg/PRRE‑D64V和pMS2S‑PH‑gagpol‑D64V质粒共同转染HEK293T细胞，转染纯化。本发明专利技术的类病毒体DVLP具有极高的DC细胞靶向性及蛋白稳定性，注射后其携带的mRNA主要集中在注射点与淋巴结，扩散至脾胀、肝脏、肾脏等非目标器官的风险较小，且能够产生高效价的中和抗体，对抗病毒感染，保护宿主，为肿瘤疫苗的开发提供了平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及树突状细胞靶向的类病毒体dvlp及其制备方法和应用，具体涉及树突状细胞靶向的类病毒体mrna递送技术在疫苗中的应用。

技术介绍

1、树突状细胞(dc)是一种重要的抗原呈递细胞(apcs)，对疫苗的效果起着十分重要的作用，其功能主要体现在以下两点：第一，dc细胞能够将抗原加工呈递至t细胞，从而诱导细胞免疫；第二，dc细胞能够将抗原加工呈递至b细胞并诱导体液免疫反应。2010年美国食品和药物管理局批准全球首个dc细胞疫苗provenge用于治疗前列腺癌。然而，provenge生产过程复杂、繁琐，涉及患者自体细胞分离、体外制备，而后进行体内回输。因此，该疫苗生产成本和销售价格高昂，普及性差。此外，抗原mrna在非专职apc的翻译，可能使表达抗原的细胞成为cd8+t细胞介导杀伤的靶标。某些人群在接受covid-19mrna疫苗后出现副作用与此有关。另外，抗体依赖性细胞毒性(adcc)也有可能破坏那些存在抗原蛋白嵌入或分泌的宿主细胞。

2、因此，特异性靶向dc是下一代mrna疫苗的发展方向，可以简化生产工艺、降低生产成本、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种树突状细胞靶向的类病毒体DVLP，其特征在于，所述类病毒体DVLP包括病毒样颗粒VLP、Sindbis病毒糖蛋白，所述Sindbis病毒糖蛋白包裹于VLP表面，所述VLP内部包裹有mRNA。

2.根据权利要求1所述的类病毒体DVLP，其特征在于，所述Sindbis病毒糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的类病毒体DVLP，其特征在于，所述mRNA包括spike、病毒抗原、肿瘤抗原、细菌抗原的mRNA中的至少一种。

4.一种如权利要求1-3任一项所述类病毒体DVLP的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

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【技术特征摘要】

1.一种树突状细胞靶向的类病毒体dvlp，其特征在于，所述类病毒体dvlp包括病毒样颗粒vlp、sindbis病毒糖蛋白，所述sindbis病毒糖蛋白包裹于vlp表面，所述vlp内部包裹有mrna。

2.根据权利要求1所述的类病毒体dvlp，其特征在于，所述sindbis病毒糖蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的类病毒体dvlp，其特征在于，所述mrna包括spike、病毒抗原、肿瘤抗原、细菌抗原的mrna中的至少一种。

4.一种如权利要求1-3任一项所述类病毒体dvlp的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述sv-g基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡宇伽，
申请(专利权)人：上海本导基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：