一种催化活性提高的甲醇脱氢酶突变体及其应用制造技术

技术编号:42505783 阅读:26 留言:0更新日期:2024-08-22 14:20
本发明专利技术公开了一种催化活性提高的甲醇脱氢酶突变体。本发明专利技术基于来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的甲醇脱氢酶MdhBs,通过构建甲醇脱氢酶MdhBs全基因随机突变文库,经筛选及测序获得3种体内甲醇催化活性提高的突变体MdhV79A、MdhN241D+E309K、MdhK72T+T153P;同时将最优的双位点突变体MdhK72T+T153P拆分出的MdhK72T和MdhT153P进行了单个位点活性的探究;进一步采用了定点饱和突变策略构建T153突变文库并经测序验证,筛选得到催化活性提高的突变体。获得的突变体在甲醇生物利用中具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学和生物工程领域,具体涉及一种催化活性提高的甲醇脱氢酶突变体及其应用


技术介绍

1、生物制造是推动工业制造向可持续发展模式演变的重要方式,但是目前生物制造高度依赖粮食原料。国家统计局统计我国发酵用粮约2亿吨,约相当于粮食总产量的30%,原料供给已经成为生物制造的瓶颈之一。甲醇是煤炭化工、页岩气化工和工农业废弃物气化的初级平台产品,是一种天然的一碳化合物,具有来源广泛、价格低廉、转化率高等优点。与糖类相比,其价格较低且平稳,且还具有平均碳原子还原程度高等优势,可为生物合成过程提供更多的还原力,参与生物转化具有明显优势。因此,甲醇是生物制造大宗化学品的理想原料,在未来有着巨大的开发潜力和广阔的发展前景,研究甲醇的生物转化具有重大的经济学与社会学意义。

2、在微生物一碳代谢过程中,甲醇首先由甲醇脱氢酶(methanol dehydrogenase,mdh)催化生成甲醛。随后,甲醛进一步通过核酮糖单磷酸途径(ribulose monophosphatepathway,rump)、木酮糖单磷酸途径(xylulose monopho本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体选自如下任一种:

2.根据权利要求1所述的甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体的氨基酸序列在选自下组的一个或多个位点突变为以下所示的氨基酸残基:

3.根据权利要求2所述的甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3-9任一项所示。

4.一种编码权利要求1-3任一项所述的甲醇脱氢酶突变体的多核苷酸。

5.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含权利要求4所述的多核苷酸。

6.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包含...

【技术特征摘要】

1.一种甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体选自如下任一种:

2.根据权利要求1所述的甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体的氨基酸序列在选自下组的一个或多个位点突变为以下所示的氨基酸残基:

3.根据权利要求2所述的甲醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲醇脱氢酶突变体的氨基酸序列如seq id no:3-9任一项所示。

4.一种编码权利要求1-3任一项所述的甲醇脱氢酶突变体的多核苷酸。

5.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含权利要求4所述的多核苷酸。

6.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包含权利要求5所...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑平王钰钱瑾孙际宾凡立稳周文娟
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所
类型:发明
国别省市:

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