一种新型的α－葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定制造技术

本发明专利技术公开了一种新型的α－葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定。用微波法从蔷薇科植物地榆中提取得到的有效成分，通过对酵母α－葡萄糖苷酶活性抑制测定，该有效成分能显著的抑制α－葡萄糖苷酶的活性，抑制率达１００％。地榆提取物将作为一种新型的ａ－葡萄糖苷酶抑制剂用于糖尿病的治疗，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于一种新型的a-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定，属于中药或 天然药物领域。
技术介绍
糖尿病是一种严重危害人们健康的常见慢性疾病，其死亡率仅次于心脑血管疾病和肿瘤而居第三位。随着人们饮食习惯和环境因素的改变，我国糖尿病患者逐年上升且呈低龄化趋势。如何有效防治糖尿病已成为当前食品界和医药界的重点攻关课题。 糖尿病(Diabetes mellitus， DM)是由胰岛素分泌的绝对和相对不足以及细胞对胰岛素敏感性下降，引起的以糖代谢紊乱为主的临床综合症，以高血糖为主要标志，且尿中有糖。空腹血糖和餐后血糖是糖尿病诊断的主要指标。餐后血糖由饮食中碳水化合物消化得到寡糖，再经a-葡萄糖苷酶的水解作用而产生。 a -葡萄糖苷酶(a -glucosidase)存在于人体小肠刷状缘上，参与人体糖的代 谢。对维持人体正常生理功能起着重要作用。a-葡萄糖苷酶通过水解a-l，4糖苷键从淀 粉和多糖的非还原端切下葡萄糖，人体对淀粉、糊精、蔗糖等碳水化合物的利用吸收依赖于 小肠刷状缘上该酶的活性，通过调节该酶的活性可改善糖尿病患者餐后血糖的水平。 a -葡萄糖苷酶抑制剂是临床上治疗糖尿病的一种药物，它可竞争性地占据酶与 碳水化合物结合的络合位点，从而推迟底物水解产生单糖的时间，达到降低餐后血糖、平抑 血糖浓度的目的。大量的医学研究表明，a-葡萄糖苷酶抑制剂对治疗和预防糖尿病等具 有重要作用。目前主要来源于微生物代谢产物，如阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇等。临 床证明阿卡波糖、伏格列波糖等治疗II型糖尿病有明显的降低餐后高血糖效果，是较好的 治疗糖尿病药物。a_葡萄糖苷酶抑制剂可逆性竞争抑制小肠壁刷状缘上a-葡萄糖苷酶 的活性，从而明显延缓和阻碍碳水化合物的降解和在消化道的吸收速度，延迟来自双糖、低 聚糖及多糖的葡萄糖吸收。有效推迟并减轻糖尿病人餐后血糖升高的时间及进程，有助于 控制糖尿病的发展尤其是并发症的发生。 但是，微生物来源的a-葡萄糖苷酶抑制剂含量少，提取分离困难。我国具有广 阔的中药资源，经研究发现，a-葡萄糖苷酶抑制剂不仅存在于微生物中，而且在天然植物 中也广泛存在。我国科学工作者以中药疗效为基础，对某些中草药的提取物能显著抑制 a _葡萄糖苷酶活性进行了研究，并取得一定成果。如高小平等从126种中药经水煮醇沉 提取，进行a-葡萄糖苷酶抑制活性筛选，其中24种中药提取物能显著抑制a-葡萄糖苷 酶活性，而大黄、山茱萸、赤芍、五倍子这四种提取物对a-葡萄糖苷酶和蔗糖转化酶抑制 活性明显强于阿卡波糖。李宪璀等.对青岛沿海20种常见大型海藻的脂溶性提取物的酶 抑制活性进行初步筛选。结果发现所有的海藻脂溶性提取物对a-葡萄糖苷酶都有一定的 抑制活性从活性测定结果看，证明海藻提取物中有一种葡萄糖苷酶抑制剂存在。 本专利技术是用微波法从蔷薇科植物地榆中提取得到的有效成分，通过对酵母a -葡 萄糖苷酶活性抑制测定，该有效成分能显著的抑制a-葡萄糖苷酶的活性，抑制率达100%。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供了一种a -葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定方法。 本专利技术的目的之二是以地榆提取物为活性有效成分作为糖尿病治疗的一种新型 原料。 本专利技术的技术解决方案如下 取地榆块根，切成薄片，按照1 : 15-20的比例加入水，用微波加热，温度为86°c -g(rc，提取时间o. 5-ih，重复提取三次，减压浓縮得到地榆粗提物。加入io倍体积的氯仿-正丁醇(v : v = 4 : 1)脱蛋白，而后以3000r/min离心20min，除去沉淀，取上清液 在紫外下(260nm-280nm)测定无蛋白吸收峰为止。上清液再用蒸馏水透析48h，除去溶剂， 浓縮透析液，真空干燥，即得到本专利技术所说的地榆提取物。 建立以4-硝基酚-2-D-吡喃葡萄糖苷为标准底物的测定地榆提取物对酵母 a _葡萄糖苷酶活性的抑制作用。 标准体系建立以4-硝基酚-2-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物，67mmo1/1磷酸 钾缓冲液(P朋.8) 1. 7ml， lmg/ml谷胱甘肽50 y 1， 2mg/ml a -葡萄糖苷酶10 y 1， 37。C保温 10min后，每1ml加入116mmol/L PNPG 300 ii 1，37。C保温lOmin后，加入O. lmol/L碳酸钠 10ml终止反应，紫外分光光度计测定400nm处的吸收值。 地榆水提物200iil加入标准反应体系中，先与2mg/ml a-葡萄糖苷酶10 iU， 37°C 保温lOmin，再加入116,1/L PNPG 300iil，37。C保温lOmin后，加入0. lmol/L碳酸钠终 止反应，紫外分光光度计测定400nm处的吸收值。 结论地榆提取液对a_葡萄糖苷酶活性抑制很强，达到100% 。 本专利技术制备的地榆提取物，是一种新型的a-葡萄糖苷酶抑制剂，用水为溶剂，微 波法提取，工艺操作简单，提取时间短，有效成分的得率高。将得到的粗提物脱蛋白、除去溶 剂，即得到本专利技术所说的提取物。建立以4-硝基酚-2-D-吡喃葡萄糖苷为标准底物的测定 地榆提取物对酵母a-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果表明，地榆提取物对a-葡萄糖苷 酶活性抑制很强，达到100%。那么地榆提取物将作为一种新型的a-葡萄糖苷酶抑制剂用 于糖尿病的治疗，具有广阔的应用前景。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型的α－葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，其特征在于包括以下步骤：取地榆块根，切成薄片，按照比例加入水，用微波加热提取，重复提取几次，减压浓缩得到地榆粗提物。加入氯仿－正丁醇（ｖ∶ｖ＝４∶１）脱蛋白，而后离心，除去沉淀，取上清液在紫外下测定无蛋白吸收峰为止。上清液再用蒸馏水透析４８ｈ，除去溶剂，浓缩透析液，真空干燥，即得到本专利技术所说的地榆提取物。

【技术特征摘要】
一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，其特征在于包括以下步骤取地榆块根，切成薄片，按照比例加入水，用微波加热提取，重复提取几次，减压浓缩得到地榆粗提物。加入氯仿-正丁醇(v∶v＝4∶1)脱蛋白，而后离心，除去沉淀，取上清液在紫外下测定无蛋白吸收峰为止。上清液再用蒸馏水透析48h，除去溶剂，浓缩透析液，真空干燥，即得到本发明所说的地榆提取物。2. 根据权利要求l所说的提取物的制备方法，其特征在于原料按照...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈群，吴菁，
申请(专利权)人：湖州来色生物基因工程有限公司，吴菁，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]