本发明专利技术属医药技术领域，具体涉及一种广枣α-糖苷酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在降血糖、减肥、降血脂、治疗糖尿病等方面的医药用途。广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100：12的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比为100：14石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，用100：14石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即得该提取物；或先用乙酸乙酯洗脱，继用甲醇洗脱，用甲醇洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即得该提取物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体涉及一种广枣α-糖苷酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在降血糖、减肥、降血脂、治疗糖尿病等方面的医药用途。
技术介绍
本品为漆树科植物南酸枣，学名 Choerospondias axillaris (Roxb.)Burtt et Hill的干燥成熟果实。主要分布于我国南部名地。南酸枣果实含有丰富的营养成分，在产地都有生食其果的习惯，是食品生产的好原料，干果实入药名为广枣，为维吾尔习用药材。南酸枣鲜果实可用于食滞腹痛；果核用于烧烫伤；树皮入药有解毒收敛、止血止痛之效，外用治大面积水火烧烫伤。广枣性平，味甘、酸，具有养心，安神，抗心肌缺血，保护心功能等作用，可用于气滞血瘀，胸痹作痛，心悸气短，心神不安等症状。现在药理学研究证明广枣具有诱导白血病细胞系K562和K562/A02细胞凋亡的功效。本专利技术通过大规模、系统地活性筛选，意外地发现维吾尔药广枣提取物及其部分化学组分，具有显著地α-糖苷酶抑制活性，该活性提取物及其组合物有望应用于降血糖、减肥、降血脂、糖尿病等方面。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题是提供一种广枣提取物。本专利技术还提供了以广枣提取物为主要活性成分的组合物。本专利技术同时提供了广枣提取物及其组合物的制备和在制备α-糖苷酶抑制活性药物中的应用。本专利技术是通过如下技术方案实现的：维吾尔药广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2）柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱（石油醚-乙酸乙酯，比例见表1），各石油醚-乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其α-糖苷酶抑制活性，意外地发现先用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:12，体积比）洗脱，继用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:14，体积比）洗脱得到的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:14，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为α-糖苷酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱部位，没有α-糖苷酶抑制活性的作用。最优为先用100：12的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱10倍柱体积，继用100：14的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱20倍柱体积的洗脱液干燥即为本专利技术α-糖苷酶抑制活性的提取物。α-糖苷酶抑制活性的提取物，可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该广枣α-糖苷酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC）分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色；或维吾尔药广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2）柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱（石油醚-乙酸乙酯，比例见表1），各石油醚-乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其α-糖苷酶抑制活性，意外地发现先用乙酸乙酯洗脱，继用甲醇洗脱得到的甲醇洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为α-糖苷酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱部位，没有α-糖苷酶抑制活性的作用。最优为先用乙酸乙酯洗脱10倍柱体积，继用甲醇洗脱20倍柱体积，甲醇洗脱液干燥后即为本专利技术α-糖苷酶抑制活性的提取物。α-糖苷酶抑制活性的提取物，可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该广枣α-糖苷酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC）分析表征如图2，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。具体，发现过程如下：1、广枣经甲醇超声提取物的制备取维吾尔药广枣20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0217A，样品0.1163 g，留样0.0064g，上样量0.1099g，拌样硅胶0.8 g，空白硅胶5 g，石油醚-乙酸乙酯系统洗脱。2、石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱方法和结果取维吾尔药广枣20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0217A 116.3mg，留样6.4mg，剩余109.9 mg。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶500mg，空白硅胶5g，玻璃柱内径1.6cm，石油醚：乙酸乙酯系统梯度洗脱（条件见表1），柱体积12.5ml，每个梯度洗脱100ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图3，图4，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1），石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1），显色方法：香草醛-硫酸显色。表1 梯度(石-乙) 体积 编号 重量(mg) 100∶00 100 SN0217A01 3.3 100∶01 100 SN0217A02 3.1 100∶02 100 SN0217A03 7.2 100∶03 100 SN0217A04 9.2 100∶04 100 SN0217A05 13.7 100∶05 100 SN0217A06 7.7 100∶06 100 SN0217A07 5.3 100∶08 100 SN0217A08 5.0 100∶10 100 SN0217A09 3.3 100∶12 100 SN0217A10 2.1 100∶17 100 SN0217A11 4.1 100∶17 100 SN0217A12 4.4 100∶20 100 SN0217A13 5.0 100∶25 100 SN0217A14 6.3 100∶30 100 SN0217A15 4.1 100∶50 100 SN0217A16 12.7 100∶100 100 SN0217A17 14.3 0∶100 100 SN0217A18 18.2 纯甲醇 100 SN0217A19 40.9 3、抑制α-糖苷酶活性筛选方法和结果1)实验条件a、材料：DMSO(二甲基亚砜) (科密欧公司)；KH2PO4、K2HPO4·3H2O(广东汕头市西陇化工厂)；α-glucosidase酶(美国Sigma公司)；PNPG(美国Sigma公司)b、实验仪器：多功能酶标仪Bio-Rad Model 680型(Bio-Rad Laboratories Inc.) 2)实验方法和过程样品处理：将1mg待测样品溶于20μL二甲基亚砜(DMSO)作为母液，取1μL母液加入99μL缓冲盐配成500μg·mL-1的样品溶液。在96孔板中依次加入α-glucosidase酶PBS溶液20 μL使其终浓度为0.07 u/mL，样品浓度为500 μg·mL-1的PBS溶液10 μL。冰浴5分钟，加入底物PBS溶液20 μL使其终浓度为2.5 mmol/l，用浓度为0.1 M、pH 6.84的PBS溶液补足体积为100 μL。加过样的96孔板在37 ℃水浴30分钟。于405 nm处测定反应物的吸光度，并以阿卡波糖作为阳性对照。样品抑制α-glucosidase酶活性比率用加样品较空白对照的OD值的比值来表示。样品抑制百分率按以下公式计算:酶活性抑制率% = [A空白- (A样品- A背景)] / A空白× 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种广枣提取物，其特征为广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100：12的石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比为100：14石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂洗脱，用100：14石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物；或先用乙酸乙酯洗脱，继用甲醇洗脱，用甲醇洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物。
【技术特征摘要】
1.一种广枣提取物，其特征为广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100：12的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比为100：14石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，用100：14石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物；或先用乙酸乙酯洗脱，继用甲醇洗脱，用甲醇洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物。2.如权利要求1所述广枣提取物，其特征为，提取所用溶剂可以为甲醇、石油醚、水、乙酸乙酯、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，最优为甲醇或95%乙醇。3.如权利要求1所述广枣提取物，其特征为广枣经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:12，体积比）洗脱，继用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:14，体积比）洗脱，用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚-乙酸乙酯，100:14，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；或先用乙酸乙酯洗脱，洗脱，继用甲醇洗脱，甲醇溶剂洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。4.如权利要求1-3所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：王金辉，李国玉，王航宇，黄健，刘晓雪，柳欢，原朋彩，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65
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