MDBK悬浮细胞株的应用、牛冠状病毒及其培养方法和牛冠状病毒灭活疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种MDBK悬浮细胞株的应用、牛冠状病毒及其培养方法和牛冠状病毒灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。本发明专利技术为解决目前使用贴壁细胞对牛冠状病毒进行增殖培养时，采用的是传统贴壁培养，耗时耗力，工艺繁琐的问题以及细胞活率低导致牛冠状病毒不能稳定增殖的问题。所述MDBK悬浮细胞株可以在无血清培养基中使用摇瓶或生物反应器进行扩大培养，获得细胞悬液后接种牛冠状病毒，获得病毒培养液。本发明专利技术提供的病毒培养液可用于制备牛冠状病毒灭活疫苗，同时本发明专利技术还提供了一种牛冠状病毒灭活疫苗的制备方法，制备出的牛冠状病毒灭活疫苗能够有效预防新生犊牛感染牛冠状病毒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于兽用生物制品领域，涉及一种适应牛冠状病毒的全悬浮mdbk细胞株及在培养牛冠状病毒和生产牛冠状病毒灭活疫苗中的应用。

技术介绍

1、牛肾细胞(mdbk)传代细胞系来自于牛肾细胞，可用于病毒培养、原材料检验、营养代谢等研究。mdbk细胞通常采用转瓶或微载体培养，但细胞培养均为贴壁培养工艺，此工艺培养批量小、批间差异大、生产效率低，大规模生产工艺复杂。

2、牛冠状病毒(bcovine coronavirus,bcov)是引起新生犊牛腹泻和成年牛呼吸道疾病最主要的病原，对养牛业造成严重的经济损失。目前还没有特效的药物治疗bcov，接种疫苗是预防bcov最有效的途径之一。国内外多用vero细胞(非洲绿猴肾细胞)或hrt细胞(人结肠癌细胞)贴壁培养牛冠状病毒，进行生产预防牛冠状病毒灭活疫苗。cn110124027公开一种牛轮状病毒、牛冠状病毒二联灭活疫苗及其制备方法，其中采用hrt贴壁细胞对bcov进行增殖培养，采用的是传统贴壁培养，在生产过程中需要大量的细胞转瓶，耗时耗力，工艺繁琐。目前，尚未见利用无血清全悬浮培养mdbk细胞技术生产牛冠状本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种MDBK悬浮细胞株在牛冠状病毒培养或者牛冠状病毒灭活疫苗生产中的应用，其特征在于，所述MDBK悬浮细胞株的特性如下：

2.一种使用MDBK悬浮细胞株培养牛冠状病毒的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用摇瓶进行扩大培养或使用生物反应器进行扩大培养。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中使用摇瓶进行培养或使用生物反应器进行培养。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用摇瓶进行扩大培养，其培养条件为：37℃，5.0％CO2，1...

【技术特征摘要】

1.一种mdbk悬浮细胞株在牛冠状病毒培养或者牛冠状病毒灭活疫苗生产中的应用，其特征在于，所述mdbk悬浮细胞株的特性如下：

2.一种使用mdbk悬浮细胞株培养牛冠状病毒的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用摇瓶进行扩大培养或使用生物反应器进行扩大培养。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中使用摇瓶进行培养或使用生物反应器进行培养。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用摇瓶进行扩大培养，其培养条件为：37℃，5.0％co2，120-130rpm/min，培养68-72h。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用生物反应器进行扩大培养，其培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：于德斌，常继涛，高宏雷，尹鑫，张尧，
申请(专利权)人：哈尔滨维科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：